组织工程活性真皮构建探究

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1、组织工程活性真皮构建探究;作者：胡葵葵，戴育成，袁敬东毕业论文【关键词】；成纤维细胞毕业论文摘要：目的；探讨用脱细胞真皮(ADM)、胶原海绵膜(SCM)、胶原凝胶构建活性真皮的可行性。方法；从幼儿包皮中纯化、扩增成纤维细胞(Fb),将其分别种植于ADM、胶原凝胶、SCM上，观察细胞增殖及支架收缩等情况。结果；Fb在ADM上不能成活；在SCM±增殖良好，人工真皮收缩不明显；在胶原凝胶中增殖活跃，但人工真皮收缩明显。结论；利用SCM构建的人工真皮，是一种较理想的活性真皮。毕业论文关键词：胶原；成纤维细胞；支架材料；脱细胞基质毕业论文ABSTR

2、ACT：Objective；Tobuildartificialdermisbyusingtheacellulardermis,collagenmembraneandcollagengelasscaffolds・Methods；Thefibroblastswereisolatedfrominfantskin.The3rdgenerationcellswereseededinto3differentscaffolds・TheartificialdermiswasdetectedbyHEstaining,phasecontrastmicrosc

3、opeorscanningelectronmicroscope・ResuIts；ThefibroblastsimplantedontheADMbegantoruptureanddiedafter2to3days・Thoughthefibroblastsproliferatedwellincollagengel,theartificialdermiscontractedobviously.Anotherinoculatingartificialdermiscontractedslightlybyfibroblastsoncollagenme

4、mbrane,andthefibroblastsonthemwereinappropriateproliferation.Conclusion；Theartificialdermisbuiltbycollagenmembraneasscaffoldshasapreferablestruetureforanidealsubstituteofskin.毕业论文KEYWORDS：collagen；fibroblast；trestie；acellulardermismatrix毕业论文皮肤组织工程的核心内容即创造出一种三维生长支架，将由肌体分离出

5、的表皮细胞或成纤维细胞进行体外复合培养，形成人工再生的真皮等同物或皮肤等同物，移植于需要修复、重建的皮肤缺损处。在皮肤组织工程中，寻找能充分发挥组织再生潜能的细胞外基质材料是核心内容。真皮为皮肤提供牢固的机械保护并决定它的外观特征。活性真皮的研制是皮肤组织工程研究中的重点及难点所在。本实验制备胶原海绵膜（spongecollagenmembrane,SCM）、脱细胞真皮（acellulardermismatrix,ADM）、胶原凝胶三种支架，并将成纤维细胞种植于支架上，观察其成活情况，以期为组织工程皮肤的制备奠定基础。毕业论文1;材料与方

6、法毕业论文1.1;胶原制备；取体重250g左右的SD大鼠1只（江西医学院实验动物部），消毒后将鼠尾切成1.5cm小段，剔除皮毛，抽出尾腱置平皿中。取1.5g剪碎尾腱浸入0.05mol/L乙酸（西安化学试剂厂），置冰箱中，并不时摇动，48h后，移入灭菌离心管中。4000r/min离心30min,吸取上清液，按100mL上清液加5gNaCl的比例加入NaCl晶体，可见多量沉淀析出，再次1000r/min离心lOmin,弃去上清液,所得沉淀即为胶原。经冷冻干燥后称重，保存于/C冰箱中备用。毕业论文1.2；SCM的制备将提取的胶原重新溶解于0.0

7、5mol/L乙酸中，制成2.5g/L的胶原溶液。将6硫酸软骨素C（Ch6S,美国Sigma公司）溶液滴加于胶原溶液中，搅拌混匀，Ch6S的终质量浓度为80g/Lo将上述溶液倒入平底培养皿中，厚约2-3mm；放入-30°C的冰箱内预冻4h以上。将预冻后的胶原快速转入真空干燥机内，真空冷冻干燥36ho待样品温度回升到室温，再逐步加热至105°C,恒温24h即成为SCMo将上述制备的胶原膜浸入0.2%（体积分数）戊二醛（上海化学试剂站）溶液中lOmin,用过滤自来水漂洗2h,然后换成双蒸水置4工冰箱24h,去除未结合残存的戊二醛。交联后的胶原海

8、绵，贮存于75%（体积分数）乙醇内备用。毕业论文1.3；SCM的检测；采用扫描电镜对支架表面进行扫描，测量其表面孔径大小。将SCM置于10%（体积分数）中性甲醛中固定，经脱水、透明、浸蜡、包埋