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1、纤支镜检查联合BALF细胞p53突变检测对肺癌诊断价值［摘要］目的探讨纤支镜检查联合支气管肺泡灌洗液中细胞p53突变检测对肺癌的诊断价值。方法对可疑肺癌患者行纤支镜检查，并以聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析法检测BALF细胞p53的第5、6、7、8外显子突变情况。结果在最终确诊的68例肺癌患者中，纤支镜检查诊断肺癌49例，p53突变检测发现37例，纤支镜检查与检测BALF中细胞p53突变联合的方法共同检出61例肺癌患者，阳性率高达89.7%，较单独纤支镜检查差异有高度统计学意义(P0.05)o按病理分类，鳞癌26例(68.4%,2
2、6/38),腺癌7例(33.3%,7/21)，其他4例(44.4%,4/9),鳞癌与腺癌中突变比较差异有统计学意义(x2=6.756,P0.05)o按分化程度，高、中分化者突变44例(38.9%,14/36),低、未分化者突变23例(71.9%,23/32),两者比较差异有统计学意义(x2=7.431,P<0.01)(表1b检出各外显子突变情况：第5外显子7例，第6外显子10例，第7外显子8例，第8外显子12例。2.2纤支镜检查结果和联合检测的评价本组病例中，通过活检经组织病理学诊断肺癌46例，通过刷检经细胞病理学诊断肺癌40例。活检和刷检共诊断肺癌
3、49例，通过刷检细胞学检查使纤支镜对肺癌的诊断率从67.1%提高到72.1%o68例肺癌患者中，通过纤支镜活检和细胞学检查共发现49例，检测BALF中p53突变发现37例。37例p53突变的患者有12例在纤支镜活检和细胞学检查中无特殊发现，而最终通过手术病理证实为肺癌。二者联合共诊断检出肺癌61例，阳性率为89.7%,与单独纤支镜检查（72.1%）的差异有高度统计学意义（x2=6.848,P<0.01b3讨论纤支镜检查在临床应用广泛，是肺癌诊断的重要手段[6,7]o通过对病变部位支气管钳夹活检、刷检、经支气管针吸活检等，纤支镜可对大部分病例进行有效诊
4、断。然而，钳夹活检、刷检对直径大于2cm且外向型生长的肿块有较高的诊断率，但仍有部分肺癌，特别是周围型肺癌诊断较为困难[2]0另外，在纤支镜检查时，选择怎样的联合策略一直以来倍受争议[8]。本实验通过在纤支镜检查时，利用活检、细胞学联合敏感基因突变的方法，探索其在肺癌诊断中的应用价值。既往研究证实，基因突变存在于人体的多种体液细胞中，对这些体液细胞中的基因学检测有助于肿瘤的诊断。Tobi
5、==等［9］通过结肠洗涤液中K-ras基因突变情况用于结肠肿瘤的诊断和鉴别，支气管肺泡灌洗液在肺癌诊断中的价值已有大量的研究报道［10,11］oOshita等口2］
6、研究发现，检测支气管肺泡灌洗液中K-ras突变对肺癌诊断敏感性可高达75%。因此，检测BALF中的敏感基因突变可能是一个有效的肺癌辅助诊断方法，是探索肺癌诊断新方法的努力方向。p53是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因之-,在人类一半以上的恶性肿瘤中发现有p53基因的异常，约50%非小细胞肺癌和70%小细胞肺癌患者存在有p53突变口3,14］o本研究通过对p53突变的检测，发现能弥补纤支镜检查的不足，二者联合对肺癌诊断率高达89.7%,较单独纤支镜检查差异有高度统计学意义(P<0.01>>本组实验数据显示，性别并不是p53突变发生的危险因素。p
7、53突变在不同的TNM分期中也无统计学意义，提示p53突变可能是肺癌发生中的早期事件。本研究还发现，p53突变在鳞癌和腺癌患者之间，以及不同分化程度的组别之间差异有高度统计学意义(P<0.01)，因而检测BALF中p53突变对肺癌的临床病理分型和预后的判定可能具有一定的指导意义。本研究不足在于，不同位置、大小和形态的肿块纤支镜检查阳性率有所不同［2］,因病例数有限而未对不同类型肿块分别评价联合检测的价值。但是鉴于任何肿块通过纤维支气管镜检查灵敏度有限的前提下，检测BALF细胞中p53突变可弥补其不足并提高阳性率。同时，纤维支气管镜活检存在一定的风险，
8、有些患者不能接受或存在某些禁忌，如凝血功能障碍或血压过高等安全问题而限制其应用。此时，检测BALF中p53突变不失为一种很好的诊断方式，因其安全性高、并发症少更能广泛应用于临床。综上所述，检测BALF中p53突变可弥补纤支镜检查的不足，二者联合有助提高对肺癌的诊断率，对肺癌的诊断有着重要意义，并对临床病理分型和预后的判定可能具有一定的指导价值。由于肿瘤发生的分子生物学基础是基因的异常，基因的改变常先于临床症状的出现，检测BALF中p53突变甚至还可以达到对肺癌早期诊断的效果。［参考文献］strategiesforlungthoracotomyandN
9、ipponMedSch,[1]KoizumiK.Currentsurgicalcancerwithafocu
