临床微生物在细菌耐药控制中的

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1、胡付品华山医院抗生素研究所临床微生物在细菌耐药控制中的重要作用临床医生的要求有明显感染症状但细菌培养结果呈阴性培养并报告的细菌不是目标病原菌药敏试验报告的抗菌药太少，或本院已不用需要用的药物却没有做药敏试验药敏结果显示敏感，但临床疗效差细菌室不能提供相关指导微生物室人员的要求标本采集过程或步骤不正确有些病原菌生长营养要求高，或生长周期长不是所有细菌都能做药敏试验不是所有药物都能做体外药敏实验不是所有细菌或所有药物都有判断标准临床医生不主动联系实验室人临床微生物人员临床医生不沟通引发的抱怨恶性循环的后果临床医生不愿意做病原学检查抗菌药物滥用催生细菌耐药性的上升临床微生物进一步不了解临床不能更好

2、的为临床提供有力的支持主要内容正确的标本采集规范的药敏试验常规检测特殊耐药菌株检测少见耐药表型结果解读及时准确的细菌耐药监测报告巧妇难为无米之炊标本采集的原则容器必须无毒性避免正常菌群的污染选择正确的标本采集部位采用正确的操作方法厌氧培养的标本不能冷藏标本量要足够假阴性信息记录标本运送原则所有标本最好在2小时内送往实验室一般而言，保存标本不超过24小时环境敏感菌不能冷藏淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌痰标本的采集和运送采集时间：使用抗生素前采集方法：自然咳痰：必须用清水彻底漱口，用力咳痰，于灭菌容器中或输送培养基中。支气管镜或支气管毛刷:由医生采集，建议直接种入输送培养基痰标本的厌氧培养标

3、本采集：必须用气管穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不能作厌氧培养。注意事项无菌容器>1mL最好在2小时内送至实验室于4℃保存不能超过24小时痰培养标本培养前革兰染色当白细胞大于25个每视野，上皮细胞小于10个每视野时为合格的痰标本。实验室在接种前必须作痰涂片革兰染色，当在低倍镜下白细胞小于10个每视野、上皮细胞大于25个每视野时应视为不合格痰标本；当白细胞小于10个每视野，上皮细胞小于25个每视野时再参照油镜观察标本中细菌分布作出判断至少检查10个低倍镜视野不可接受的痰标本可接受的痰标本痰标本培养培养基条件血平板5%CO2，35℃×48h麦康凯平板5%CO2，35℃×48h巧克力平板5%C

4、O2，35℃×48h血平板麦康凯平板巧克力平板痰标本细菌学检查肺炎链球菌流感嗜血杆菌卡他莫拉菌优势生长的细菌就是致病菌吗？血液培养的原则-优质的实验室操作疑似感染患者首次血培养至少一套，包括一瓶需氧瓶及一瓶厌氧瓶。采集后标本如不能及时送检，应置常温保存，不能放冰箱或35-37℃培养箱。采血时间：尽可能在使用抗生素前，寒颤和发热初期。采血量：采一次或采一瓶是错误的至少应采一套2瓶，分需氧和厌氧。2瓶血量不少于16-20ml，先将10ml注入需氧瓶，再将剩余血采血注入厌氧瓶。采血方法：不推荐静脉血直接入瓶；不宜在静脉导管或静脉留置口采血。影响血培养病原菌生长的因素血量：1:5-1:10或按厂家规

5、定培养基中的抗生素吸附剂树脂活性炭液面的气体需氧瓶：CO2厌氧瓶：CO2，N2血培养存在的主要问题如果皮肤定植的细菌没有被杀死，细菌将通过针头进入血培养瓶并生长如果不能将真正引起感染的凝固酶阴性葡萄球菌和皮肤定植菌“污染”菌区分开，可能会导致万古霉素的应用血培养的常见问题假菌血症(Pseudobacteraemia)：病原菌来源于病人血流之外不正确采血实验室操作可产生暴发性，消毒液被菌污染仪器问题白细胞过多过量的血量其它污染：这些菌（阳性杆菌、棒状杆菌、丙酸杆菌、气球菌、凝固酶－葡萄球菌、微球菌）也引起全身感染污染瓶只见于一套瓶中的1-2瓶只有第二套来鉴别不作药敏保留此瓶几天，等待第2套结果

6、22标本的收集和运送：瓶数及血量Cockrill2004年报告：163位病人，血培养仪病特点阳性率1套1+2套1＋2＋3套一般菌血症65%80%96%感染性心内膜炎90%分泌物采集规范对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等。采用穿刺或引流的的方法采样，应在用药前采集。注意脓液的气味、性状、颜色，注意厌氧菌存在的可能。不能及时送检应用输送培养

7、基。注意：表浅标本中的细菌大多已死亡无菌体液的采集运送规范无菌采集是培养成功的首要因素为提高阳性率，可将无菌体液注入血培养瓶。采集的标本应立即送至临床细菌室，脑膜炎球菌有自溶酶，离体后回迅速自溶。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌离体后极易死亡。延迟送检时一定不能放冰箱，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对温度敏感的细菌在冰箱会很快死亡。尿液采集和运送正常人膀胱中的尿液是无菌→排出时受外尿道中正常菌群污染→混有细菌。采集时机：