两虫如何提高回收率

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时间:2019-11-19

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1、隐孢子虫和贾第鞭毛虫培训班如何提高回收率取样流速控制在1-2L/min清洗容器应使用纯水,不要使用清洁剂样品浓缩离心机应放在牢固的工作台或地板上,尽量减少晃动离心管连同适配器一起配平,保证误差在0.5g以内,尽量减少摆动离心机设定2000g离心力,工作时间15分钟离心机应选用无刹车系统的(自然停止大约需7分钟)吸取上清液需要一个蠕动泵也可选用真空泵,最大真空度小于3.3kPa流速控制在200ml/分钟(+/-20ml)应在管进口处装一个移液枪头(例如:5ml移液枪头)来减少进口的真空力度最终留有5-8ml液体(可以预

2、先在需要体积处做好标记)枪头口应该在离心管中心接近液面处吸取上清,以减少沉淀的损失从离心管内移出液体从离心管吸出所有液体前应先用淘洗液润洗移液管,避免目标菌贴壁加入磁珠前应先涡旋搅拌20秒钟用纯水充分冲洗离心管壁,冲洗两次。例如:如果转移上清液体积为7ml,则进行两次冲洗,每次使用1.5ml纯水每次冲洗后都要涡旋20秒再移出液体免疫磁分离加入100ul两虫磁珠时需注意:放在搅拌机上搅拌15秒,并且确保底部没有剩留磁珠把L10管放在DYNALMX1混合器上室温15-20RPM转速孵育1小时,此过程不可以停止,如果停止则

3、需要重新定时孵化1小时当L10管放在磁极上呈90度角转动时此动作一定不要过快将L10管内的混合物用1xSLBufferA冲洗两-三次,总体积为1ml,混匀,然后转移到1.5mlEP管中(如果是多个管一起时,要马上加入1xSLBufferA,以免磁珠变干)将MPC-S磁极保持180度转动1分钟,吸出上清液。注意:包括盖子里面的液体也要吸出,完成一个后要摇匀后再吸第二个酸解使用标准配置的溶液对配置的溶液进行常规的校准,以保证所使用的部分达到正确的中和移液枪在使用之前应校准,以保证移取的体积准确所有的这些步骤都是为了防止酸

4、解离过程中pH不平衡样品干燥建议样品自然过夜干燥样品应该干燥完全尽量避免使用温箱干燥玻片,除非温箱温度可以准确控制在35˚C(+/-2˚C)染色应加50μl无水甲醇到玻片上,直至风干完全免疫荧光染色过程应在一个潮湿的容器中,请按照操作手册进行应按照规定准备好所需DAPI试剂免疫荧光染色和DAPI染色后,请务必用PBS(pH7.4)或者染色试剂盒提供的缓冲液冲洗玻片,以除去多余的染料可中断的过程及保存时间样品分析步骤最大允许中断时间样品采集、过滤、淘洗72小时离心一个工作日免疫磁分离转移至载玻片样品干燥72小时染色镜检

5、7天(但需封片保存,并放置在避光处)Filta-Maxxpress两虫快速法设备维护每个样品淘洗完用酒精擦洗QC干体根据《生活饮用水卫生标准》中规定清洗分流调节器和滤器。即用6%次氯酸钠浸泡半个小时后用纯水冲洗干净,晾干待用每批样品淘洗前、后请一定用纯水代替淘洗液,按照淘洗步骤清洗设备内部管路每天维护用酒精或者实验室消毒剂擦拭仪器内部及内部表面注意:此时空气压缩机需关闭,记得擦拭离心管座及下面的区域每月维护注意:如果您一周或者更长时间不使用淘洗装置时,应按以下方法进行清洁所需工具使用提供的小六角扳手将淘洗装置的顶盖(

6、红褐色盖子)移开使用提供的大六角扳手,将压力舱盖子上4个内六角头螺丝(见下图)拧松使用提供的角螺丝刀(绿色把手),找到位于压力舱和压力舱盖子之间的凹痕,撬开盖子使用分析乙醇或者6%的次氯酸钠擦拭压力舱内部和压力舱盖子,然后用纯水再擦一遍。使用高真空润滑脂润滑压力舱盖子上的O形圈。将压力舱盖子放回原处,小心不要损坏O形圈;拧紧四个内六角头螺丝,并将淘洗装置的顶盖安装回原处按照清淘洗的步骤,用纯水进行一次或多次淘洗循环。注意:如果您一周或者更长时间不使用淘洗装置时,应按上述方法进行清洁。Filta-Maxxpress两虫

7、快速法设备长期不使用如果设备超过一周不使用,需要将设备管路里的水排出、控干需要准备:将滤芯放在滤器中并连接分流调节器将其连接到淘洗设备内将离心管放入设备内用纯水替代缓冲液按F1完成2遍淘洗,彻底清洗管路内部,将缓冲瓶内纯水倒掉并拧紧盖子按F1当进行第2或第3个步骤时按下急停按钮注意:有时设备显示屏会显示“HighFlowError”.此时是由于管内的液体已经被空气所代替。按下紧急按钮“E-Stop”管路里的水已经被收集在离心管中,将离心管取出Filta-Max手/自动法两虫快速法维护维护每次使用前,请检查所有的O型环

8、是否有磨损或者损坏—如有需要请联系爱德士技术人员每次使用前,使用高真空硅油对活塞头O型环进行润滑润滑其他所有的O型环(浓缩管、滤器)以保证它们处于良好状态Filta-Max自动法设备维修在移开任何面板或者保险丝盒之前,请确认电源处于断开状态更换保险丝注意:双极/中性保险丝更换保险丝前请拔掉电源线。保险丝位于保险丝盒内,保险丝盒位于电源接口附近(

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