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《克唑替尼对非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株的放射增敏分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、核内，再通过诱导靶基因转录表达来起到生物效应。抑制STAT3的磷酸化就能够促进肿瘤细胞凋亡，抑制局部浸润、远处转移，提高自身免疫系统对肿瘤细胞的免疫应答。因此，本课题采用体外培养非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株，观察克哩替尼对两种非小细胞肺癌细胞株的增殖抑制率，并结合放射治疗观察其对两种细胞株的增敏效应,探索其潜在机制的探索。实验方法1MTT法检测克嗖替尼对非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株增殖的抑制率；2平板克隆形成实验检测克呼替尼对非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株放射敏感性的影响；3
2、流式细胞技术检测克醴替尼对非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株的细胞周期及凋亡率影响；4蛋白免疫印迹法检测非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株经过克呼替尼联合放射线后STAT3及P-STAT3表达量的变化。实验结果1MTT实验结果显示：不同浓度的克啜替尼作用于H2228细胞后，增殖抑制率分别是:2.89%,21.03%,34.09%,43.36%,60.75%,68.54%,84.02%在浓度25-1600nM的范围内，抑制率与浓度变化呈正相关。克呼替尼作用于H2228细胞24h后的IC50浓度为33
3、0nMo不同浓度的克呼替尼作用于H3122细胞后，增殖抑制率分别是：23.17%,37.98%,49.80%,58.46%,65.62%,76.46%,84.07%在浓度25-1600nM的范围内，抑制率与浓度变化呈正相关。克瞠替尼作用于H3122细胞24h后的IC50浓度为102nMo2克隆形成实验结果显示：在等量照射剂量下,附加药物照射的细胞存活分数明显低于单纯照射组（P<0.05同组中”照射剂量越大,其细胞存活分数越低（P<0.05当大剂量照射时（6、8Gy）,H2228细胞株在克呼替尼及放射线的作
4、用下较H3122细胞相比，存活分数更低（PV0.051在H2228细胞株组中，联用克呼替尼照射组的D0值（平均致死剂量Dq值（细胞损伤的准域剂量XN值（放射损伤修复能力SF2（照射2Gy后的细胞存活分数）分别为：2.228、1.673、2.329、0.730小于单纯照射组的2.435、1.806、2.500、0.893,SER（Do）：1.064；SER（Dq）:1.079o在H3122细胞株组中，联用克哩替尼照射组为3321、2.342、3.135、0.754也小于单纯照射组的3.333、2.452、3
5、.485、0.930,SER（Do）:；SER（Dq）：1.047o说明克哩替尼能有效减弱H2228及H3122细胞株的放射抗拒性及亚致死性损伤修复的能力，增强其放射敏感性，而且对于H2228细胞株的放射增敏效果更加明显。3流式细胞术实验结果显示：H2228及H3122细胞的凋亡率与照射剂量呈正比。在单纯照射组（Ri组、R2组），随着照射剂量的增加，细胞凋亡率上升。在照射剂量相同的情况下，附加克哩替尼的细胞株经照射后细胞凋亡率明显高于单纯照射组，在4Gy、6Gy、8Gy照射下，附加药物照射组的细胞凋亡率与单纯
6、照射组相比有明显差异（P<0.05X在6Gy、8Gy照射下zH2228细胞株在克哩替尼及放射线的作用下较H3122细胞相比，凋亡率更高（P<0.05X在H2228组细胞中，Ri组细胞随着照射剂量增加，G0/G1期细胞比率轻微升高；S期细胞比率逐渐减少；G2/M期细胞比率逐渐升高。与R.组相比z应用了克呼替尼的RA组细胞随着照射剂量增加，G0/G1期细胞阻滞现象明显；S期细胞比率轻微减少；G2/M期细胞比率轻微增高。RA组与&组相比zG0/G1期细胞阻滞现象尤为突岀。在H3122组细胞中，随着照射剂量增加，R2
7、组与RB组细胞各周期比率均表现岀相同的变化趋势,G0/G1期未见明显变化”S期轻微减少,G2/M期明显增加。RB组与R2组相比，各周期细胞比率均不具有差异性。4WesternBlot法检测结果显示：在H2228细胞组中z在相同剂量照射下，应用克哩替尼联合时STAT3的表达量较单纯照射升高，具有统计学意义（P<0.05）；p-STAT3的表达量较单纯照射降低具有统计学意义（PV0.05丄在H3122细胞组中，在相同剂量照射下，应用克醴替尼联合时STAT3的表达量较单纯照射升高,具有统计学意义（P<0.05）；P
8、-STAT3的表达量较单纯照射降低，具有统计学意义（P<0.05H2228细胞株与H3122细胞株相比，STAT3的表达量升高的更为明显（P<0.05）；P-STAT3的表达量降低的更为明显（P<0.05结论：1在本实验设计的药物浓度范围内，克呼替尼能有效抑制人非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株的增殖。2非小细胞肺癌H2228及H3122细胞株克隆形成率与照射剂量呈反比在等量照射剂量下，附
