共转化ZxNHX-VP1-1基因百脉根的分子鉴定及抗逆性评价【毕业论文,绝对精品】

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1、毕业论文(本科生)中文标题共转化ZxNHX・VPl・l皐因百脉根的分子鉴定及抗逆性评价英文标题MolecularidentificationandtoleranceevaluationofZxVP]・landZxNHXgeneinLotuscomiculafus学生姓名指导教师学院草地农业科技学院专业草业科学基地班年级兰州大学教务处目录摘要错误!未定义书签。Abstract2UUS31材料与方法41.1转基因分子检测的材料41.2转基因植株的分子检测错误!未定义书签。1.3转基因植株的RT-PCR检测41.3.1植物总RNA的提取41.3.2总RNA纯度及浓度检测51.3

2、.3总RNA完整性检测51.3.4RT-PCR扩增51.4转基因植株的抗逆性检测材料51.5实验处理51.5.1盐胁迫处理错误!未定义书签。1.5.2干旱胁迫处理61.6测定指标61.7数据分析62结果142.1植物基因组DNA的完整性检测62.2转基因植株的PCR检测62.3口的基因在转基因百脉根屮表达的RT-PCR分析72.3.1植物总RNA浓度及纯度检验错误!未定义书签。2.3.2RT-PCR的分析82.4ZxNHX-ZxVP共转化百脉根株系具有更强的耐盐性82.5ZxNHX-ZxVP共转化百脉根株系具有更强的抗旱性92.6转基因百脉根株系屮积累了更多的阳离子102

3、.7ZxVP和ZxNHX基因的超表达降低了转基因百脉根的叶片渗透势…••…122.8转基因百脉根株系的叶片具有较高的相对含水量132.9转基因百脉根株系的细胞膜受损程度显著低于野生型植株132.10转基因植株的净光合速率高于野生型植株143讨论144参考文献175致谢20评语21共转^ZxNHX-VPhl基因百脉根的分子鉴定及抗逆性评价刘允佳指导老师:王锁民(兰州大学,草地农业科技学院,730000)摘要:本文以百脉根品种迈瑞博为实验材料,用根癌农杆菌介导的方法将携带霸王离子区域化基因ZxNHX和ZxVPl-1的双价载体转入百脉根,用PCR及RT-PCR检测得15株共转化

4、百脉根植株,并对转基因植株的进行抗旱性耐盐性检测,结果发现:(一)在干旱和盐胁迫下转基因百脉根生长更快,且耐盐抗旱性显著增强。(二)阳离子含量的测定结果表明:不论在正常生长条件,述是在盐或干旱胁迫下,转基I大I百脉根比野生型植株在叶和根中积累了更多的NaJK+fllCa2+o(三)ZrNHX和ZxVPl-1基因的超衣达使得转基因1?脉根株系的细胞膜受损程度显著低于野生型株系:随着NaCl浓度的增加或干旱胁迫时间的延长,转基因和野生型株系的相对质膜透性均呈增加趋势,但野生植株增加的更快。(四)ZrNHX和ZxVPl-1基因的超表达述可保护转基因百脉根的光合系统。以上结果说明

5、ZxNHX^WZxVPl-l的超表达促进了转基I大I百脉根细胞的Na*区域化能力,同吋增强了其细胞对其它阳离子的吸收能力。这一方面可以减少盐胁迫下细胞质中过量Nf对各类细胞器和细胞膜的伤害作用,并稳定细胞内的离了平衡;另一方面可将Na*作为一种有益的渗透调节剂来提高细胞的渗透调节能力,使转基因百脉根能在盐或干旱胁迫下保持较多水分并维持细胞膨压,进而提高转基因植株的耐盐抗旱性。关键词:共转化百脉根ZxNHXZxVPl-1耐盐性抗旱性MolecularidentiflcationandtoleranceevaluationofZxVPl-1andZxNHXgeneinLotu

6、scorniculatusLiuYun-JiaFacultyadvisor:WangSuo-MinCollegeofPastoralAgricultureScienceandTechnology,LanzhouUniversity,Lanzhou,GansuProvince730000,ChinaAbstract:Inthisessay,AgrobactriumstrainGV3101harboringtheZxNHX-ZxVPl-1-pCAMBIA1302plasmidwastransformedintoL.corniculatustogeneratesaltanddr

7、ought-resistantlegumeforageandcomprehensivelyassessedthetoleranceoftransgenicplants.Theresultsindicatedthat:l.Theover-expressionofZxNHXandZxVPl-1enhancedsaltanddroughttoleranceintransgenicL.corniculatus.Undernormalgrowthconditions,transgenicplantsgrewmuchfasterandla

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