大豆抗疫霉根腐病基因鉴定及分子标记

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1、华中农业太学2005届硕I。学位论文1．4．4生物防治Cn(聚氨基葡萄糖)是从海洋软体动物及鳖壳上提取的活性物质，对大豆疫霉菌具有抑菌作用和化学免疫作用，0．2％拌种防效为51．4％(李宝英等，1997)。C95制剂是1995年引进的一种生物活性制剂，具有抗菌活性，同时具有化学免疫功能，可诱导植物体产生抗性，提高被害植株的抗病性。试验结果表明，0．02％的C95拌种防效最好，可达到62．3％。(李宝英等，1999)。生物制剂“818”具有保苗效果好，防效期长，防效在60％以上，使大豆增产10．3％(丁俊杰等，2001)。杨秀芬等(2002)利用嗜线虫致病

2、杆葡代谢物拮抗大豆疫霉菌，结果表明：嗜线虫致病杆菌代谢物对大豆疫霉菌丝生长和孢子囊的形成有强烈的抑制作用，对孢子囊的萌发亦有一定的抑制效果，因面能有效控制疫霉的进一步侵染，减轻病害的发生和流行，是有前景的一种生物农药。1．5大豆对疫霉根腐病的抗性遗传国内外研究均表明，大豆对大豆疫霉根腐病的抗性受显性单基因控制。Bernard等(1957)对八个大豆杂交组合F'代群体进行了抗大豆疫霉根腐病遗传分析，结果各群体的抗感分离比均为3：1。证明了大豆对大豆疫霉根腐病的抗性遗传是受显性单基因控制。国内对大豆疫霉病的抗性遗传研究起步较晚，马淑梅(2001)曾用两个杂交

3、组合对大豆疫霉菌1号生理小种的抗性进行初步研究，结果两个组合的F2代抗性都分离，一个组合分离比为3：1，受显性单基因控制，另一个为9：‘7，受两对基因控制。胡喜平(2004)利用三个抗病品种合丰34、红丰8、垦农4与三个感病品种北丰11、垦鉴豆23及合丰39配制的四个单交组合F1、F2代和一个回交组合Fl代对中国大豆疫霉病1号生理小种的抗性进行遗传分析，杂交组合的F1均为抗病，F2代的抗感分离比为3：1，表明大豆对大豆疫霉病的抗性受显性单基因控制，回交测验中的F，抗感比为1：1，再次证明大豆对大豆疫霉菌1号生理小种的抗性遗传受显性单基因控制。1．6抗大豆

4、疫霉根腐病基因鉴定常规鉴定大豆疫霉根腐病抗病基因的方法是将未知基因的材料与已知抗病基因品种杂交进行等位性测验，方法是将含未知基因的大豆品种分别与含已知抗病基因品种进行杂交，如果F2代都表现互补，则说明此基因为不同于已知抗病基因的新基因所致。在基因对基因的植病系统中，可以应用病原菌的毒力基因来检测和鉴定寄主的抗病基因，即基因推导(Flor，1956)。与基因等位性测验相比，用基因推导鉴定抗病基因具有省时省工的优点，在一些基因对基因植物与病原菌系统中己广泛应用：目前已鉴定出14个抗大豆疫霉根腐病基因Rpsl．a、Rpsl-b、Rpslwc、Rpsl—d、Rp

5、sl—k、Rps2、Rps3．口、gps3．b、Rps3．c、Rps4、Rps5，Rps6、Rps7，Rps8，含有14个抗病基因的鉴别寄主都已获得了纯系(表1．1)。大豆与大豆疫霉菌的相互作用是典型的基因对基因关系，因此选择一套能有效鉴别大豆疫霉根腐病抗病基因的大豆疫霉菌鉴别人豆抗疫癣根腐病基困黪定及分了标记生理小种，应用苗期下胚轴伤口接种方法分别接种大豆资源和14个含已知抗病基因的标准生理小种鉴别品种，将大豆资源对鉴别生理小种的反应型与14个标准生理小种鉴别品种的反应型进行比较，初步推导出被鉴定大豆资源所含抗病基因类型，为下一步育种工作准备有益材料。

6、Rennie等(1992)19个大豆疫霉菌生理小种对4个日本大豆品系PB60836、P1360839、P1360841、P1360837，以及P1360836、P1360839和P136084分别与Horasoy杂交组合后代进行了多抗性评价，对所选用的小种反应结果表明：P1360837不含任何抗病基因，P1360836与Horasoy杂交组合后代出现Rpsl．a和Rps5分离、P1360839与Horasoy杂交组合后代出现砌s1．C和Rps3分离、P1360841与Horasoy杂交组合后代出现Rpsl．b和肋sP(至少含有1个新抗病基因)分离。朱振东

7、等(2003)利用5个菌株对黑龙江省主要栽培大豆品种(系)进行了多抗性评价。结果在60个大豆品种(系)中，对5个不同毒力的大豆疫霉菌菌株的反应类型与13个含抗病基因的大豆鉴别寄主的反应型比较时发现，有7个品种可能含有Rpsl．口或Rpsl．c基因，品种农大3861可能含有Rps3．c基因，十个品种可能含有Rps7基因，其他九个反应型的品种可能含有未知抗病基因。这些结果为抗病育种提供了直接或间接的目的基因抗性资源，减少了育种年限和工作量。表1．1已知大豆疫霉根腐病抗病基因Table1．1KnownresistancegeneforPhytophthoras

8、ojae毕中农业大学2005届硕．1：学位论文1．7抗大豆疫霉根腐病资源筛选利用