实验一蠕虫学粪便检查法(一)【资料】

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1、实验一蠕虫学粪便检查法(一)一、内容1•直接涂片法;2.饱和盐水漂浮法;3.各种蠕虫卵的特征。二、参考资料蠕虫学粪便检查是蠕虫病生前诊断的重要方法。因为大多数的寄生性蠕虫是寄生在家畜、家禽的消化道及其相连的器官(如肝脏、胰脏),有的寄牛在呼吸器官和牛殖器官(家禽),如示圆线虫、前殖吸虫。寄生在这些部位的寄生虫,它们的虫卵、幼虫或节片都随着宿主的粪便排除体外,因此,通过粪便检查可以获得生前诊断。除蠕虫以外,还冇一些原生动物的寄生虫,如结肠小袋纤毛虫及球虫,它们的包囊或卵囊亦随着宿主的粪便排除体外,依靠粪便检查也可以建立生前诊断。根据蠕虫学

2、粪便检查的目的可分为:(一)蠕虫虫体检查法:是从粪便中检查虫体或节片,如莫尼茨绦虫,一般以肉眼直接检査;(二)蠕虫虫卵检查法:是从粪便屮检杳虫卵,如人多数的吸虫、绦虫和线虫;(三)蠕虫幼虫检查法:是从粪便中检查幼虫,如牛、羊的网尾线虫等,随粪便排出的不是虫卵而是幼虫。下面主要分述虫卵和幼虫检杏法。1•蠕虫虫卵检查法(之一):(1)直接涂片法:収一片洁净的载玻片,在玻片中央滴加1-2滴50%甘油生理盐水,然后用锻子或牙签挑取少量粪便,与甘汕牛理盐水混匀,并将粗粪渣推向一边,涂布均匀,作成涂片,涂片的厚薄以放到书上隐约可见下而的字迹为宜,加

3、上盖玻片,置显微镜下检杏,检杳时先在低倍镜下顺序查找,如发现虫卵,再换高倍镜仔细观察。如无廿汕住理盐水时可以用常水代替,加LT油可使标本清晰,易于观察,并可防止涂膜很快变干燥。但是检查原虫的滋养体,必须以生理盐水进行稀释,不应加甘油,否则会彩响其运动而妨碍观察。本法操作简单,能检查各种蠕虫卵,但检出率不高,特别是轻度感染时,往往得不到可靠结果,因此,本法只能为辅助的诊断方法,并且每次检查要重复观察8-10片,才能收到确实的效果。(2)饱和盐水漂浮法:本法基本原理是采用比重比虫卵大的溶液,使虫卵浮集于液体的表血,形成一层虫卵液膜,然后蘸取

4、此液膜,进行镜检。方法:先配制饱和盐水溶液,配制时先将水点开,然后加入食盐搅拌,使之溶解,边搅拌边加食盐,直加至食盐不再溶解而生成沉淀为止(1000毫升沸水中约加食盐380克),再以双层纱布或棉花过滤至另一干净的容器内,待凉后即可使用。(溶液凉后如出现食盐结品,则说明该溶液是饱和的,合乎要求,其比重为1.18,此溶液应保存于温度不低于13°C的情况下,才能保持较鬲的比重)。取粪便5-10克,置于100-200毫升的烧杯屮,先加入少量饱和盐水,把粪便调匀,然后加入约为粪便的12倍量的饱和盐水,并搅拌均匀,用纱布或40目的铜丝筛过滤于另一干

5、净的烧杯内,滤液静置30-40分钟,此吋比饱和盐水比重轻的虫卵,大多浮于液体表面,再川钠耳或直径0.5T厘米的铁丝圈蘸取此液膜,并抖落在载玻片上,进行镜检,或者将此滤液直接倒入试管内,补加饱和盐水使试管充满,加上载玻片(盖玻片应与液面完全接触,不能留有气泡),静置30-40分钟,収下盖玻片,贴在载玻片上进行镜检,可以收到同样效果。本法检出率高,在实际工作中广泛应用,可以检查大多数的线虫卵和绦虫卵,为了提高漂浮效果,可用其他饱和溶液代替饱和盐水。如在检查比重较大的后圆线虫时,可先将猪粪便按沉淀法操作,取得沉渣示,在沉渣屮加入饱和硫酸镁溶液

6、,进行漂浮,收集虫卵。常见虫卵及漂浮比重如下表:寄生虫卵比重漂浮液比重种类比重种类1000ml水屮加入比重的试剂量(g)猪蛔虫卵1.145饱和盐水38()1.170—1.190钩虫卵1.085—1.090硫酸锌溶液3301.180毛圆线虫卵1.115—1.130氯化钙溶液851.050猪后圆线虫卵1.20以上同上4401.250肝片吸虫卵1.20以上硫代硫酸钠溶液17501.37—1.39姜片吸虫卵1.20以上饱和硫酸镁9201.26华支睾吸虫卵1.20以上饱和硝酸钠10001.20—1.40双腔吸虫卵1.20以上2•操作、观察注意点:

7、(1)在操作中,粪便不能互相感染,已经使用过的工具,必须进行消毒,或另换工具,才能检杳第二个粪样,粪样更不能搞错,特别在大面积普杏工作屮,一定要做好登好编号,每次检查都要有详细记录。(2)粪便耍求新鲜,防止暴晒、腐败而失效。(3)镜检时一定要详细观察,严格区别虫卵与非虫卵。虫卵:都有一定的卵壳结构,且都有一定的形状,如圆形、椭圆形、三角形等,多数都是两侧对称,内含有卵细胞或一个已发育的幼虫或毛蝴。非虫卵:在粪便中容易与虫卵混淆的杂物冇各种植物细胞、花粉颗粒、脂肪球、气泡、真菌他子、啡类及其虫卵、纤毛虫等等。但这些物质,由于种类不同,其形

8、状、大小、颜色也各不相同。如各种植物细胞,有的呈螺旋形,有的呈双层环状物的,也有呈铺石状的,但都有明显的细胞壁,与虫卵结构显然不同;各种花粉颗粒,往往都带有一定的颜色,易谋认为蛔虫卵,但花粉颗粒没有卵壳的结

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