蠕虫学粪便检查技术(三)

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兽医寄生虫与寄生虫病学实验室蠕虫学粪便检查技术（三） 蠕虫学粪便检查法类别虫卵直接涂片法漂浮法沉淀法幼虫贝尔曼氏法平皿法 掌握贝尔曼氏幼虫分离法的操作技术学会显微镜测微尺的使用方法了解消化道线虫第三期幼虫的主要形态特征目的与要求 器械漏斗、漏斗架、胶头滴管、乳胶管、止水夹、温度计、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、物镜测微尺、光学显微镜、离心机、离心管等。材料新鲜粪便、卢戈氏碘液、纱布实验器材 一、幼虫分离法贝尔曼氏法实验内容与方法①将乳胶管与玻璃漏斗连接，并用止水夹夹住，置于漏斗架；②取15~20g粪便于纱布中包好，置于漏斗中，加入约40℃的温水，以没过粪便为准；③排净管中气泡，静置1h；④放出粪液于离心管中，1500r/min离心3min，弃上清，吸取沉渣涂片镜检。 平皿法（适用于球状粪便）取粪球3~10个，置于培养皿中，加入少量40℃左右的温水；静置10~15min，吸取皿底虫体，涂片镜检。注意事项：贝尔曼法检查粪便时，需将完整粪球放入，不必弄碎；所加温水必须充满整个装置，并浸泡住被检材料，中间不能有气泡或空隙。贝尔曼法也可用于组织器官材料的检查，要求材料必须新鲜，且应尽量撕碎。 二、测微技术1.测微器的组成目镜测微尺物镜测微尺 2.使用方法将物镜测微尺置于镜台上，先用低倍镜观察，对准焦距后改为高倍镜，待看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度和物镜测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边第一条线（零刻线）相重合，再向右寻找两尺的另一条重合线。分别计数两重合刻度之间目镜测微尺和物镜测微尺的格数。 左边重合线（零刻线）右边重合线目镜测微尺物镜测微尺目镜测微尺的校准10μm 3.计算公式目镜测微尺每格长度（μm）＝物镜测微尺重合格数×10目镜测微尺重合格数例如，目镜测微尺20小格等于物镜测微尺3小格，已知物镜测微尺每格10μm，则3小格的宽度为3×10＝30μm，那么相应地在目镜测微尺上每小格大小为3×10/20＝1.5μm。 4.虫体的测量取下物镜测微尺，将涂片置于载物台上，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物，然后在高倍镜下用目镜测微尺测量幼虫虫体长度。测量弯曲虫体时，可通过转动目镜进行分段测量，之后相加即可。 注意事项校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，当更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新对目镜测微尺进行校正。测量时如需使用油镜，必须在物镜测微尺上加盖玻片，以防格线模糊化。 三、消化道线虫第三期幼虫仰口线虫与食道口线虫(×100)仰口线虫（口器）(×400) 三、消化道线虫第三期幼虫食道口线虫三期幼虫(×100)食道口线虫肠细胞(×400) 谢谢