实验一动物蠕虫学粪便检查技术(一)

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1、实验一动物蠕虫学粪便检查技术（一）一、实验目的及要求（1）掌握粪便材料的采集、保存的方法及要领。（2）掌握粪便中蠕虫虫卵及虫体检查法的操作技术。（3）在显微镜下能初步识別吸虫卵、绦虫卵、线虫卵和棘头虫卵，掌握其一般特征。二、实验内容（1）粪便采集、保存的方法及要领。（2）粪便中蠕虫虫体检查法。（3）粪便中蠕虫虫卵检查法。（4）蠕虫各纲虫卵的鉴別特征。三、实验材料（1）拟检查的各种家畜的新鲜粪便。（2）各种虫卵的形态挂图。（3）检查粪便使用的各种器材：载玻片，盖玻片，蹑子，平皿，烧杯，漏斗，漏斗架，胶帽吸管，离心管，试管，玻璃棒，粪筛，纱布，平底管（青霉索小瓶）

2、，玻璃珠，火柴棍，特制铁丝圈，虫卵计数板，普通离心机，光学显微镜等。（4）检查粪便使用药品：50%甘油水,O.lmol/L（或4%）NaOH,饱和盐水四、实验方法、步骤和操作要领（一）粪便的采集、保存和送检法供寄生虫检查的粪便应是新鲜而未被污染的，故须从直肠直接采取，除非亲眼看到动物排粪，才可从地面收集口然排出的粪便，也可向直肠内注入油类促使排便。直肠取粪：大家畜按直检的方法采集，猪、羊可将食指或中指仲入直肠，钩取粪便，或釆集粪堆或粪球上部或屮间未被污染的部分：从野外釆集的粪样，动物曾在上面践踏过，无诊断价值，但当直肠采不到粪便吋，这些粪还是可以检查的。但应尽

3、量选择较新排出的粪便且要收集几份样品，采取的粪便按头编号装入清洁的容器（塑料杯或纸杯）内，粪样尽可能装满，以便排出空气，减少虫卵的发育和孵化。采粪用具应每采1份，清洗1次，以免互相污染。采取的粪便应尽快检查，不能立即检查时，应放在冷暗处或冰箱屮保存，若当地不能检查需送检或长期保存吋，可将粪便浸入加温至50-60°C的5%-10%福尔马林溶液中，使粪便中的虫卵失去生活能力，起固定作用，又不改变形态，还防止微生物的繁殖。注意在操作中，粪便不能互相感染，己经使用过的工具，必须进行消毒，或另换工具，才能检查笫二个粪样，粪样更不能搞错，特别在大面积普查工作中，一处要做好

4、登好编号，每次检查都要有详细记录。（二）粪便的初检在采用各种镜检方法Z前，必须观察粪便的颜色，稠度，气味，黏液多少，冇无血液，饲料消化程度等，特别应仔细观察有无虫体、幼山、绦山结片等。（三）虫卵检查法1直接涂片法（ExaminationofDirectSmears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴廿油与水的等量混合液（加廿油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍仔细混匀。再用银子去掉大的草棍和渣子等，Z后加盖玻片（不得产牛气泡），置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。（图1-1）图1-1直接涂片法示意图另一方法是直接涂片法的改良法叫冋旋

5、法。取2〜3g粪样加清水2〜3倍，充分混匀成悬液。后用玻璃棒搅拌0.5-lmin,使Z成冋旋运动，在搅拌过程屮迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖片在镜下检查。检查时多取儿滴悬液。该方法的原理是由于冋旋搅动的结果，可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄牛虫卵或幼虫。注意事项：做直接涂片时，涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时，纸上的字迹隐约可见为宜。直接涂片法的优点是简便、易行、快速、适合于虫卵星大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。因此在实际工作屮，需多检儿片，以提高检出率。检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似

6、虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。因一般山卵（特别是线虫卵）色彩较淡，镜检时视野宜稍暗一些（聚光器下移）。（二）漂浮法（MethodInvolvingFlotation）其原理是采用比重高丁•虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进行检查。漂浮液通常多采用饱和盐水，其方法简便、经济、易行。饱和盐水漂浮法对人多数线虫卵、绦虫卵及某些原虫卵囊均有效，但对吸虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效杲较差。1饱和盐水漂浮法（费勒鹏法）饱和盐水的配制:把食盐加入沸水锅内，搅拌，使之溶解，边搅拌边加食盐，直到食盐不再溶解而出现沉淀为止（即1000ml沸水中加入约4

7、00g食盐），精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤，待冷却后即可使用（冷却后的溶液有食盐结晶析出，即为饱和，其比重为1.18）；粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备用。此溶液应保存于温度不低于13°C的情况下，才能保持较高的比重°饱和盐水漂浮方法操作步骤：取粪便5-10克，置于100-200＜升的烧杯中，先加入少量饱和盐水，把粪便调匀，然后加入约为粪便的12倍屋的饱和盐水，并搅拌均匀，用纱布或40目的铜丝筛过滤于另一干净的烧杯内，滤液静置30-40分钟，此时比饱和盐水比重轻的虫卵，大多浮于液体表面,再用钳耳或直径0.5-1厘米的铁丝圈蘸取此液膜，并抖落在

8、载玻片上，进行镜检，或者将此滤液直接倒