GBLP相互作用蛋白研究

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1、所属专业:应用药理GBLP相互作用蛋白研究邱峰】),毛小琴%陈世知习,邱宗荫2严卩垂庆医科大学附属第一医院,垂庆400016;厂垂庆医科大学临床检验诊断学教育部垂点实验室,重庆400016;3)重庆医科大学附属第二医院,重庆400010)摘要为了进一步阐明GBLP在普蔡洛尔(PRO)生物学效应发生机制屮的作用,木文采用免疫共沉淀法结合HPLC-CHIP-IT-MS/MS系统筛选并鉴定了GBLP相互作用蛋白。结果表明,有7种蛋白与GBLP存在相互作用,分别为Caseina-Sl>Caseina-S2>pcasein>桥粒芯蛋H1询体、a-烯醇化酶、果

2、糖二磷酸醛缩酶C、硫氧还原蛋白过氧化物酶2。这些蛋白的生物信息学检索结果提示,GELP可能参与了细胞的能量代谢调节和抗氧化机制,与PRO的牛物学效应发牛机制密切相关。关键词普蔡洛尔;人脐静脉内皮细胞;GBLP;免疫共沉淀;液相色谱■芯片■离子阱串联质谱ScreeningandidentiHeationofGBLPinteractionalproteinsQIUFengMAOXiao-Qin2),CHENShi-Zhi3),QIUZhong-Yin4)*JIAXiong-Fei5)(ntheFirstAffiliatedHospital,Chongq

3、ingMedicalUniversity,Chongqing400016,China;2)KeyLaboratoryofLaboratoryMedicalDiagnosticsofMinistryofEducation,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China;3)theSecondAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400010,China)AbstractTofurtherelucidaterolesofGBLPin

4、biologicalcharacteristicsmechanismofpropranolol(PRO),Co-immunoprecipitationandHPLC-CHIP-IT-MS/MSwereusedtoscreenandidentityinteractionalproteinsofGBLP.Theresultsshowedthat7proteinsmightinteractwithGBLP,whicharccaseina-Sl,caseina・S2,卩casein,dcsmoglcin1precursor,a-enolase,fructo

5、se-bisphosphatealdolaseCandperoxiredoxin2.BioinformaticsoftheseproteinshintedthatGBLPmightparticipateenergymetabolismregulationandantioxidationincells,whichcloselycorrelatedtobiologicalcharacteristicsmechanismofPRO.Keywordspropranolol;humanumbilicalveinendothelialcell;GBLP;Co-

6、immunoprecipitation;HPLC-CHIP-IT-MS/MS基金项I-1:重庆市自然科学基金项H(No.CSTC-2005BB5227)Email:作者简介:邱峰,男,副主任药师*通讯作者:邱宗荫,男,教授,博士研究生导师TEL:023・68485727zongyin@gmail.com在过去的工作中,我们采用比较蛋口质组学策略研究了普荼洛尔(PRO)对映界构体R什)/S(・)・PRO诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白质表达谱差异,在所鉴定出的差异表达蛋白质屮,发现G蛋白卩业单位2样1蛋白(GBLP)在R(+)-PR0干预后的H

7、UVEC中高表达l,JoGBLP是新近发现的RACK家族成员之一,乂称为活化的蛋白激酶C受体1(RACK1),是细胞内多种信号分子的底物和相互作用蛋白〔切。己知GBLP可与蛋白激酶C(PKC)结合,作为细胞内受休使活化的PKC锚定于细胞骨架,参与细胞内多种信号通路级联反应。例如,GBLP可能在卩2肾上腺素受体(

8、32・AR)介导的信号转导中起作用,它可使卩受体发牛非特异性脱敏(磷酸化),当沉默RACK1基因后,可显著减少P2-AR的磷酸化⑶;RACK1还可连结两个PKC亚型,从而调节PKC介导的心肌肥厚信号⑷。GBLP的这些作用可能与PRO保护心肌

9、细胞、抗氧化、抑制血管平滑肌细胞增生等生物学效应和立体选择性的发生机制有重要关系,但目前尚无相关报道。本研究分别用PRO対

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