【精品】生物化学实验指导

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1、生物化学实验指导唐山师范学院生命科学系生物技术教研室2007年7月第一部分生化实验基本要求1一生物化学实验室规则1二实验报告要求及格式1第二部分基本操作及常用仪器的使用2一器皿的清洗2二移液3三缓冲溶液的配制5四溶液的混匀6五离心机的使用6六分光光度计的使用7第三部分学生实验9实验一氨基酸的分离鉴定一一纸层析法9实验二血清蛋口醋酸纤维薄膜电泳10实验三聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白12实验四双缩腺法测定蛋白质浓度14实验五紫外分光光度法测定蛋白质浓度15实验六考马斯亮兰结合法测定蛋白质浓度16

2、实验七酵母核糖核酸的提取与组分鉴定17实验八核酸的定量测定——紫外吸收法18实验九核酸的定量测定——二苯胺法19实验十核酸的定量测定——苔黑酚法21实验••一菜花(花椰菜)中核酸的分离和鉴定22实验十二唾液淀粉酶活性分析24实验十三血清丙氨酸氨基转移嗨(ALT)活性测定28实验十四过氧化氢晦Km的测定29实验十五维生素C的定量测定31实验十六肌糖元的酵解作用34实验十七脂肪酸卩■氧化36第四部分附录39一常用缓冲溶液的配制方法39二实验室中常用酸碱的比重和浓度44第一部分生化实验基本要求一、生物

3、化学实验室规则1、每个同学都应该自觉遵导课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不人声谈笑。2、实验前必须认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂得每一操作步骤的意义，了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。实验过程中要听从教帅的指导，严肃认真地按操作规程进行实验，并把实验结杲和数据及吋、如实记录在实验记录木上，文字简练、准确，要求同学们记录完整准确的实验数据，养成良好的实事求是的工作作风和求真务实的科学态度，严禁伪造实验数据，弄虚作假。完成实验后经教师检查同意，方可离开实验室，课后写

4、出实验报告，于下次实验前上交。3、实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐，公用试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药晶洒在实验台血和地上。实验完毕，仪器须洗净放好，将实验台血抹拭干净，才能离开实验室。4、使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤利使用仪器时，应小心细致，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告教师，不得擅口动手检修。5、实验室内严禁吸焰。灯应随川随关，乙胛、丙酮、乙储等易燃品不能宜接加热，并要远离火源操作和放置。实验完毕，应立即关好

5、电源开关和水笼头，拉下电闸。离开实验室以前应认真、负责地进行检查，严防发生安全事故。6、所有实验用的废液，废弃物等，都要收集在适当的容器内，加以储存再处理，不能倒在水槽内或到处乱扔。7、仪器损坏时，应如实向教师报告，并填写损坏仪器登记表，然后补领。8、实验室内一切物品，未经本室负责教员批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。9、每次实验课由班长负责安排值H牛。值H牛的职责是负责当天实验室的卫牛、女全和一切服务性的工作。最后离开实验室的实验人员，必须检查并关好水、电、门、窗。二、实验报告要求及格

6、式实验报告是实验的总结和汇报，通过实验报告的写作可以分析总结实验的经验和问题，学会处理各种实验数据的方法，加深对生物化学实验的理解和掌握，同时也是学习撰写科学研究论文的过程。实验报告的格式应为：实验题kl1、实验目的；2、实验原理；3、仪器和试剂；4、实验步骤；5、实验结果；6、分析实验报告的写作水平也是衡量学生实验成绩的一个重要方面。实验报告必须独立完成，严禁抄袭。写实验报告要用实验报告专用纸，以便教师批阅，不要用练习本和其他片页纸。实验报告使用的语言要简明清楚，抓住关键，各种实验数据都要尽可

7、能整理成表格并作图表示之，以便比较，一口了然。实验结果的分析要充分，尽可能多查阅一些有关的文献和教科书，充分运用已学过的知识和生物化学原理，进行深入的探讨，勇于提出自己独到的分析和见解，并欢迎对实验捉出改进意见。生命科学系生物技术教研室2007.06.20第二部分基本操作及常用仪器的使用一、器皿的清洗1、玻璃仪器的清洗实验中所用的玻璃仪器清洁与否，直接影响实验的结果，往往由于仪器的不清洁或被污染而造成较大的实验误差，有时其至会导致实验的失败，因此玻璃仪器（包括离心管等塑料器皿）是否彻底清洗净是非

8、常重要的。⑴初川玻璃仪器的清洗新购买的玻璃仪器表血常附着有游离的碱性物质，可先用0.5%的去污剂洗刷，再用自來水洗净,然后浸泡在1%〜2%盐酸溶液中过夜（不可少于四小时），再用自來水冲洗，最后用无离子水冲洗两次，在ioo°c〜12O°C烘箱内烘干备用。（2）使用过的玻璃仪器的淸洗先用自來水洗刷至无污物，再用合适的毛刷沾去污剂（粉）洗刷，或浸泡在0.5%的淸洗剂中超声清洗（比色曲绝不可超声），然后用口來水彻底洗净去污剂，用无离子水洗两次，烘干备用（计量仪器不可烘干）。清洗后器IIIL内外不可挂有水