【精品】生物化学实验指导1

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1、生化实验室的一般规则1.进入实验室应穿着丁•作服。留长发的同学应挽短、戴帽。2.整洁。实验台必须洁净，各种仪器放置要有秩序。实验完毕，必须将仪器洗净、放好，拭净台面，方可离开实验室。3.安静。实验时不可谈笑，如有问题可以小声请教师解答。4.废物及废液处理。实验完的废液应倾入水槽中，并用水冲净。但浓酸、浓碱及氤化物等不可倒入水槽，应倾入预先准备的废液盆或污物桶中。少量浓酸、浓碱可直接倾入水槽，然后以大量流水冲净。火柴梗、废滤纸、棉花等不可扔入水槽，应弃入废物盆或垃圾箱中，以免堵塞水管。5.试剂为标准溶液。取用试剂后，应立即将瓶塞盖好；放回原处。取用有毒试剂

2、时，须用滴定管或滴管。取样时，应注意用多少取多少。如未用完只可弃去，不可倒回瓶中；6•凡可产牛烟雾或有毒气体的实验必须在通风橱屮操作。7.在用恒温水浴箱保温时，应注意随时盖好箱盖。调节温度到所需温度后，即不再旋动调温旋扭。8.贵垂仪器如分光光度计、离心机等必须爱护，使用前应熟读使用方法，记住操作要点，按操作规程工作。如有问题应请教师帮助，不得自行拆卸检修。9.防火。勿使酒精、乙瞇或英它易燃试剂靠近火焰。若蒸发此类溶液时，应用水浴，不得直火加热，以免发牛火灾。10.实验前应熟读实验指导，记住要点。实验时应仔细操作并注意观察现象及结果,及时记录。生化实验的基

3、本操作一、玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤在生物化学实验屮是一项垂要的工作。实验性质不同所采取的洗涤方法也不同。例如研究酶制备的反应时，组织匀浆对金属的污染是非常敏感的，至于细菌的悬浮液对少量的金属可能不敏感，但少量的维牛索和其它有机物质则有较人的影响。一般氧化剂洗液如重鉛酸洗液不能有效地除去油脂、硫酸锁等污迹。因此污迹不同所应采用的洗涤试剂和方法也不同。如可用汽油或洗涤剂（洗衣粉液或洗洁净）除去油脂，用酸性硫代硫酸钠溶液或热草酸除去氧化性污迹MnO?等，用40%尿素除去附着管内壁的血凝块等。洗涤时为节省洗涤剂及加强洗涤效果，一般应先用普通水刷洗使污迹减到最

4、低限度，再采用适宜的方法加以洗涤。应养成每次实骑后立即洗刷实验器皿的良好习惯，这样可以使器皿的洗涤更容易（污迹愈久愈难洗涤），而且保证每次实验均有现成的T净的器皿可用。一般的定性实验屮所用的器血用洗涤剂液刷洗，去掉油脂，用流水冲洗干净后，再用少量蒸馆水冲洗2〜3次即可，下面举出儿种常用的涤剂和洗涤方法：1.重珞酸法。重銘酸洗液的配制：加63克重銘酸钠（或钾盐）于35毫升水中，加热溶解，放冷，缓慢加入浓硫酸到1升（注意：一边加一边搅）。洗涤步骤：（1）器血置于无铅汽油屮以除去油脂或用汽油棉球将油脂拭净。（2）用水洗涤。（3）置于洗液中12〜24小时。（4）

5、取出用口来水洗涤四次，用蒸镉水冲洗两次。2.洗涤剂法。先除去油脂，然后置于洗涤剂溶液中缓缓加热15分钟，取出用流水冲洗T净，再用蒸镭水冲洗数次即可。二、容量仪器使用法1.单位：牛化实验中常用的容量的基本单位通常为毫升，即千分之一升，一升为一千克水在4°C时的容积。1.温度：物体的体积及容器的容积，可因温度而改变，容器的容积-•般在20°C时校准。温度在15°C到25°C时，容器容积的误差小于千分之一，可忽略不计。2.读数法：读数时，背对光线，以口纸置于刻度Z后，水或其他液面下凹的液体，应读液面的最低处，视线应与液面在同一平面上。3.仪器的校准。容积有装量

6、(tocontain)与卸量(todeliver)之分,使用时须注意刻有装量字样的容器(如量瓶及某种吸量管)，表示此等容器在一定状况下，能容纳标明Z量。刻有卸量字样之容器(如滴定管，卸量吸量管)，表示在i定状况下，能卸下标明之量。4.滴定管、吸量管、量瓶等的刻度，用于一般定量测定，已够准确。如欲进行精确之研究实验，须校准容量之刻度，校准方法可参阅定量分析书籍。5.生物化学实验常用Z吸量管有普通吸管与奥氏吸量管(Ostwaldpipette)两种，用普通吸管移取液体，须将管尖端紧靠受器Z内壁，待内部液体流完后，再等候三秒钟。管尖所余液体，任其留于管中。如此

7、卸出之量，即为管上所标明之量。奥氏吸管则不然，管中余存之少量液体，须吹出，使之一并流入受器内。如此卸出之量与管上所标明之量方能符合。奥氏吸量管较普通吸量管准确，宜作定量实验之用。吸量管吸入液体后，应用食指(切勿用拇指)封闭管口，用洁净滤纸将尖端外部擦干，使液面徐徐下降到刻度处，然后使液体流入受器。6.滴定管Z刻度皆为卸量,装入液体后，需注意玻璃塞下端有无气泡。如有气泡存在，须设法除去，液体流出速度要慢。液体流出后，应使尖端接触受器之内壁，将所悬之最后一滴液体滴下。三、离心机使用法1•使沉淀与母液或上清液分开，有过滤与旋离二种方法：有下列情形Z—者，以旋离

8、为宜。(1)沉淀性粘者。(2)沉淀颗粒小而易透过滤纸者。(3)沉淀Z量多而松者。