DB13T 743-2005 蝴蝶兰生产技术规程

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1、B丹n0乙DB、…，J卜、.J﹄1﹃.J.，方标DB13/T743-2005蝴蝶兰生产技术规程2005-04-15发布2005-04-15实施河}}省质量技术监督局发布DB13/T743一21}}}:,前.-J‘-曰DB13/T743一2005《蝴蝶兰生产技术规程》分为两部分:—第1部分:蝴蝶兰种苗生产技术规程;—第2部分:蝴蝶兰盆花生产技术规程。本标准由河北林业局提出。本标准起草单位:河北农业大学。本标准主要起草人:王志刚、聂庆娟、孟朝、李彦慧、毛富玲、倪志云、史宝胜、刘冬云、张芹。学兔兔www.bzfxw.co

2、m学兔兔www.bzfxw.comDB13/T743.1一2005蝴蝶兰生产技术规程第1部分:蝴媒兰种苗生产技术规程1范围本标准规定了蝴蝶兰的种苗生产技术、种苗质量、包装、运输、标准、检疫等等内容。’本标准适用于蝴蝶兰种苗的商品化生产。2种苗生产2.1品种选择生产中一般根据商品要求和生产条件，选择市场杨销的常规品种。2.2井殖方法蝴蝶兰种苗生产以组织培养繁殖为主，也可采用无菌切茎培养、分株等方法。2.3设施、设备2.3.1设施拥有交通方便、环境清洁、空气干燥的实验室—化学实验室、洗涤室、灭菌室、接种室、培养室、炼苗

3、室等。2.3.2设备及器械高压燕汽灭菌设备、超净工作台、电子天平、冰箱、解剖镜、空调、加湿器、培养瓶、紫外线灯、常用玻璃仪器、手术刀、镊子、酒精灯等。2.4前期准备2.4.1培养基配制通常采用MS培养基。按照iii。培养基的配方配制培养基，并将培养基趁热分装人培养瓶，封口系禁，塞上带通气孔(切.Smm，塞棉塞)的橡皮塞，或用封口膜封口后系紧。2.4.2灭菌2.4.2.1培养基ba苗在高压蒸汽灭菌器内用湿热空气灭菌法(压力。.11Mpa一0.14Mpa,温度}r℃一126℃条件下15min一20min进行灭菌。2.4

4、.2.2接种工具接种工具在接种前可随培养基一起灭菌，也可在接种过程中用酒精灯灼烧进行灭菌。2.4.2.3其他实验室及实验服用紫外线灯杀菌;接种台、手等用75%酒精涂擦。2.5组培苗的培养2.5.1外植体诱导2.5.1.1.母株选择符合要求;植株生长健壮、无病虫害。2.5.1.2外植体类型常用外植体包括花梗、叶片、茎段与茎尖。·1·学兔兔www.bzfxw.comDB13/T743.1一20052.5.1.3取材时期花梗为外植体时，花梗长至5cm一10cm时最好，开花后的花梗也是主要的外植体之一;叶片作为外植体时，以

5、叶龄3d}7d的叶片最好，茎段或茎尖作为外植体时，无菌苗和株龄40d内的植株较好。2.5.1.4外植体消毒材料取回后，先用自来水冲洗1h}2h。在超净工作台上将已切割成适当大小的材料，先用75%酒精清洗30s，再用无菌水冲洗后，叶片与茎段在0.1%HgCLn或5%NaOH溶液中浸泡10min-20min，无菌水冲洗S次一8次;花梗在0.1}H邪In或5%NaOH溶液中浸泡10min一20min，无菌水冲洗5次一8次，在无菌接种盘上剥出花梗休眠芽外的苞片，再用0.050kH邪玩或5%NaOH溶液中浸泡，无菌水冲洗5次

6、一8次。2.5.1.5接种在超净工作台上将已消毒的材料置于无菌垫盘上，用镊子和手术刀将叶片切割成1emu大小;花梗长约2cm(休眠芽上下各1cm)，适当的茎段;0.3mm一0.4mm茎尖，再用摄子将切割好的材料植人事先准备好的诱导培养基中。操作时要注意对瓶口进行灼烧，做完后及时极盖滤纸膜或塞上瓶塞，并在瓶外用记号笔标注品种、接种日期和培养基类别等;工具使用一段时间后应进行灼烧，以防止交叉感染。2.5.f.6诱导培养基1)丛芽诱导培养基:MS+2一5m留Ib一BA;pH值为5.2一5.52)原球茎诱导培养基:1/2M

7、S+3}5mg/Ib一BA+10%椰乳汁;pH值为5.2一5.52.5.1.7培养条件培养温度为26t2℃，花梗培养温度不宜低于26℃，光照强度为600Ix一800Lx，光照时间14h/do2.5.2丛芽增殖培养2.5.2.1继代培养基丛芽继代增殖培养基:}}+1一3mg/Ib一BA;pH值为5.2一5.52.5.2.2培养条件培养温度为26土2℃，光照强度2000t100Ix，光照时间14h/dQ2.5.2.3方法每40d一SOd继代增殖一次，一般继代次数不超过15次。随着继代增殖次数的增加，6一BA的浓度可以适

8、当的降低。继代接种过程中，尽量减少对材料的伤害。2.5.3原球茎增殖培养2.5.3.1增殖培养1)增殖培养基:1/2MS+3mg/L6一BA+10%椰子汁+3%蔗糖2)培养条件:培养温度为26t2℃，光照强度2000t100Lx，光照时间10h/do3)方法:将原球茎切割成小块后，接种到增殖培养基中，每40d一50d继代增殖一次，一般继代次数不超过10次。2