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1、实验室研究技术训练姓名:胡明明学号:2013102040076病毒性肝炎及丙型肝炎病毒病毒性肝炎在我国,病壽性肝炎的发病数据已位于传染病的第一位,如得不到及时治疗,将发展为肝硬化以及肝癌,每隹用于治疗和护理病毒性肝炎患者的费用高达3600亿人民币。病毒性肝炎对人民的健康造成了巨大危害,相应的研究工作和防疫工作显得非常重耍。病毒性肝炎是由病毒感染引起的主要以肝脏炎症为表征的一类传染疾病。其主要传播途径通过肠道或体液、血液传播。病毒性肝炎主要由5类同源性不大的肝炎病毒引起:甲型肝炎病毒(HepatitisAVirus,HAV)、乙型肝炎病毒(HepatitisBVirus,HBV)、丙型肝炎病毒
2、(HepatitisCVirus,HCV)、丁型肝炎病毒(HepatitisDVirus,HDV)、戊型肝炎病毒(HepatitisEVirus,HEV)。其中乂以HAV,HBV,HCV最为常见。HAV与HEV感染引起急性肝炎,HBV、HCV、HDV感染造成慢性感染并最终导致肝硬化和肝癌。除了以上5类肝炎病毒之外,诸如单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、黄热病毒等病毒也能引发病毒性肝炎。一病毒性肝炎的历史回顾最早记录通过体液传播的肝炎病例可以追溯至1885年,一位名叫Lurman的德国人报道在不莱梅的一间1,289人的船厂中,由于针头和注射器消毒不正确的原因,15%的工人在接种天花病毒疫苗以
3、后2-4个月纷纷岀现黄疸症状,随后爆发了肝炎疫情(MocarskiandCourcelle2001)o止式对病毒性肝炎的研究开始于第二次世界大战期间。其被分为感染性肝炎(infectioushepatitis)和血清同源性肝炎(homologousserumhepatitis)(Major,Mihaliketal.1999)o后来,随着引起这两种肝炎的病毒被分别命名为HAV和HBV,甲型肝炎(HepatitisA,HA)和乙型肝炎(HepatitisB,HB)替了原有的名称。在精确的检测肝炎病毒种类的方法出现Z前,病毒性肝炎病人的诊断都是通过临床和传染病学的特征来进行。1965年,HBV表面
4、抗原(HBsAg)被发现(Blumberg,Alteretal.1965),并在1968年发现其与HBV的联系(Reed,Xuetal.1997;Osella,Massaetal.1998)O至此,人类对病毒性肝炎有了清晰的认识。1971年,建立了以放射性免疫共沉淀的方法检测HBsAg,这种方法的准确性得到了广泛的承认(Lander,Alteretal.1971)O很快,人们又发明了HBsAg和HBV核心抗原(HBcAg)的放射免疫检测方法。通过这三种方法,感染HBV的病人都能准确的被诊断出。然而,人们发现肝脏移植并发行肝炎的病人并不被HBV感染,唯一的另一种己知病源体是HAV,而HAV的病
5、理特征又与此不符。于是人们认为存在着至少一种其他的致肝炎的病原体。1978年,由美国国立卫生院(NIH)开展的一项工作屮,被调查的30名病人屮,仅2名诊断结果为HAV患者,12名为HBV患者,其他16名病人被称为非A非B型肝炎(NANBH)患者(Nelson,Marousisetal.1997)。在此基础上,NANBH的观念得到了广泛地认可,对这种未知的病原体的工作开始展开。在接下来的15年屮,许许多多研究小组都声称发现了这种新的病毒,或者与英相关的病毒抗原或抗体。但事实证明没有一个报道是完全正确的。尽管如此,还是能通过这些报道窥见一些这种全新病毒的一些病毒学和流行病学的特性。第一,它除了感
6、染人类Z外还能感染黑猩猩(Alter,Purcelletal.1978;Hollinger,Gitnicketal.1978)。第二,通过它通常是通过血液传播可以预见出这种新病毒能引起慢性的感染。这样的慢性感染能导致慢性的肝脏疾病、肝硬化(Alter,Hollandetal.1975)。第三,这种病毒在脂类溶剂中没有活性,暗示这种病毒表面有包膜纟吉构(Feinstone,Mihaliketal.1983)o第四,它能穿过50纳米的滤器,说明它的颗粒直径在50纳米以下(He,Allingetal.1987)o由此,一种细小,有包膜结构的新病毒的画面出现在人们面HUo随着上世纪80年代分子生物学
7、技术的飞速发展,使得确定这种病毒的具体信息变得可能。在慢性感染的黑猩猩身上提取得到的血浆具冇高滴度的病毒(BradleyandMaynard1986)o来自Chiron公司的Houghton研究小组利用这种血浆构建了一个X噬菌体表达文库(Choo,Kuoetal.1989),在此基础上筛选与NANBH病人血清中相关的蛋白。他们得到了一个编号为”5-1-1"的克隆能表达与NANBH特异相关的抗原。5-1-1克隆