hiv实验室检测技术及其研究进展

《hiv实验室检测技术及其研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、HIV实验室检测技术及其研宄进展邓睿荣柳州钢铁（集团）公司疾病预防控制中心广丙柳州545002【摘要】艾滋病被誉为传染病的“头号杀手”，从发现至今，人们一直在探索艾滋病的预防控制措施，HIV的实验室检测在艾滋病诊断、防治等有着极为重要的作用。随着分子牛.物学技术的飞速发展，HIV的实验室检测技术也在不断发展进步。为此，木文对艾滋病实验室检测技术及进展进行综述。【关键词】HIV;检测；进展艾滋病即获得性免疫缺陷综合征（AIDS）,是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染机体所引起的免疫功能缺陷损伤的一类综合病患。自1981

2、年在美国首先发现艾滋病病例至今，艾滋病在全球范围内迅速传播。艾滋病是一种目前尚无有效治愈办法、病死率极高的传染病，它在全世界的广泛流行已成为严重的公共卫生问题和社会问题。20多年来，实验室免疫学检测是诊断HIV/AIDS的主要依据［1］。HIV感染的早期发现、早期诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，只有发现传染源才能更有效地控制艾滋病传播。随着分子牛.物学技术的飞速发展，HIV的实验室检测技术也在不断发展。木文从HIV抗体、抗原、核酸及免疫功能等方面对艾滋病实验室检测技术及进展进行综述。1、常用HIV抗体检测技

3、术常用的HIV抗体检测技术包括初筛试验（包括初筛和复检）和确证实验。1.1HIV抗体筛查试验1.1.1酶联免疫吸附试验（ELISA）:适用于大批量标木的检测，可使用血液、唾液、尿液样品。EUSA的基木原理是将待测抗原或抗体先固定于固相载体表面，再用酶标记的抗原或抗体与己被固定的相应抗体或抗原发生特异性反应，加底物显色，用酶标仪测定结果。该方法是筛查实验最常用的和最主要的筛查检测HIV抗体的方法。ELISA是国际上应用最广、HIV抗体初筛最常用的HIV血液筛查检测技术［2］。1985年美国FDA批准使用第1代EUSA

4、检测试剂至今，几乎不用第二代试剂。0前国内外主要使用第三代双抗原夹心试剂，窗口期由10周缩短至3-4周。第四代ELISA试剂是最近几年发展起来的HIV抗原抗体联合测定试剂，可同吋检测P24抗原和抗HIV-1/2抗体。艽优点在于能冋吋检测抗原抗体，降低血液筛查的残余危险度［3］。国外文献［4］报道第4代HIV检测试剂可进一步将“窗口期”缩短4-5天。国产第4代HIV检测试剂比第3代HIV检测试剂灵敏度高，国产第4代HIV检测试剂在血液筛查过程中可发现HIV感染窗U期标本［5］。但由于抗原抗体均包被在微粒上，使灵敏度提

5、高，同吋也使特异性降低，引起假阳性。如生物梅里埃HIV第4代EUSA检测试剂，假阳性显著升高［6、7］。第3代HIV试剂敏感性较第4代试剂存在漏检现象［8】。郑晓红等［9］研究显示，在检测早期感染的样本吋，第4代HIV试剂的反应性更强，而降低了部分特异性的第4代试剂仍不失为一种较好的筛査高危人群样本的检测试剂。1.1.2化学发光或色度荧光试验这类试剂采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原或抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测

6、定结果。奋效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。具有灵敏度高、准确、重复性好、线性范围宽、安全无毒、无放射性污染等优点，尤苏是该方法反应快速，每个测试仅需28min，非常适合夜间急诊，但同时也有一些不足，比如假阳性率较高，要慎重对待［10、11］。2.1.2快速检测（RT）试验这类试验简便快速，适合于急检测、门诊急诊检测，一般可在10-30分钟内可得出结果。2.1.2.1明胶颗粒凝集试验（PA）将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温。当待检样品含有HIV抗体吋，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，

7、根据明胶颗粒凝集情况判定结果。该方法是一种简便快速筛选的方法，但灵敏度和特异性较低，II不如ELISA试验，故在献血及大型医院不作为常规检测方法。乔恩发等［12］报道，微量明胶颗粒凝集试验检测滤纸片干血斑HIV-1抗体的方法，可信度高、操作简便成本低，为大规模开展HIV-1流行病学调査提供了另一种良好的实验方法。2.1.2.2免疫渗滤试验斑点EUSA和斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：均以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状固定在膜上，加待检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出冇色斑点。反应吋间在10分钟以内。有效试验

8、的质控点必须显色。此试验完成操作需要数个步骤，检测吋间较长，试剂价格高，使用者较少。2.1.23免疫层析试验以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，待检样品（血液或唾液）沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出奋色条带。奋效试验的质控带必须显色。快速免疫层析法试验具冇试剂无需冷藏、步骤简洁、无需任何仪器设备等特点，适合用于临床侵入性检查前、紧急输