植病研究技术重要试题

《植病研究技术重要试题》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、列出儿种常用的血清学检测技术1.植物病原细菌鉴定的主要有哪几方面的依据2.植物病毒病的鉴定是否需要遵循科赫尔法则？如何获得牛物分离物3.简耍介绍气流传播的真菌病害常用的接种方法有哪些4.请叙述5种以上基于PCR原理的延伸技术巢式PCR是种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。笫二对引物称为巢式引物(因为他们在笫一次PCR扩增片段的内部)结合在第一次PCR产物内部，使得笫二次PCR扩增片段短于第一次扩增。巢式PCR的好处在于，如果第一次扩增产生•了错误片断，则第二次能在错课片段上进行引物配对并

2、扩增的概率极低。因此，巢式PCR的扩增非常特异反转录PCR(ReverseReaction,RT-PCR)乂称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板，釆用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成eDNAo多重PCR—般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定•多重PCR(multiplexPCR),乂称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同•重组PCR将两个不相邻的D

3、NA片段重组在一起的PCR称为重组PCR。其基本原理是将突变碱基、插入或缺失片段、或一种物质的儿个基因片段设计在引物中，先分段对模板扩增，除去多余的引物后，将产物混合，再用-•对引物对其进行PCR扩增。所得到的产物是一重纽合的DNA0锚定PCR川于扩増已知一端序列的目的DNAo在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。锚定PCR(AnchoredPCR,A-PCR)主要用于分析具有可变末端的DNA序列，Loh等用A-PCR对人外周血淋巴细胞T细胞受体a■链的mRNA的多变性进行了分析。13.叙述分子生物学的中心法则并给出

4、图示屮心法则(geneticcentraldogma),是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋口质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。詡译14.卅i物细菌病害的症状有何特点、症状：细菌病害症状主要有：①腐烂。由于细菌分泌的果胶酶的分解作用而使受害植物的根、茎、块根、块茎、果实、穗等肥厚多汁器官的细胞解离、组织崩溃腐烂，如白菜软腐病。②坏死。主要发生在叶片和茎杆上，出现各种不同的斑点或枯焦，前者如棉花角斑病，后者如水稻门叶枯病。③萎瓠因细菌寄牛•在维管朿内堵塞导管或因细

5、菌毒素而引起，如青枯病。④肿瘤。市于细菌刺激，使寄主细胞增牛、组织膨人而形成，如癌肿病。⑤黄化矮缩。在木质部寄生的细菌使栢株表现黄化、萎缩，如葡萄皮尔氏病、杏叶焦病、什蓿矮化病、林蔗矮化病和桃幼果病等。15.如何区分植物病毒病与英他病害受害植物常表现如卜.症状：①变色。由于营养物质被病毒利用，或病毒造成维管朿坏死阻碍了营养物质的运输，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等；花朵的花青素也可因而改变，使花色变成绿色或杂色等，常见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶病。②坏死。由于植物对病毒的过敏性反应等可导致细胞或组织死亡,变成枯黄至褐色，

6、有时出现凹陷。在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。③崎形。rti于植物正常的新陈代谢受干扰，体内生长索和具他激素的生成和植株正常的生长发冇发生变化，可导致器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生长点异常分化形成从枝或从簇，叶片的局部细胞变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及黄化等。16.真菌菌种保存的基本原理是什么？简耍介绍几种常用的菌种保存方法。基木原理微牛•物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程屮，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的吋间内使其不发生变界而乂保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因索

7、，所以，菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。保藏方法大致可分为以下儿种：1•传代培养保藏法又有斜而培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用）,培养后于4—6°C冰箱内保存。2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延氏保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石贴，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4.寄主保藏