草莓叶片再生体系的研究

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1、安徽农业大学毕业论文（设计）论文题目姓名院系指导教师草莓叶片再生体系的研究于忠慧朱立武学号041301111067中国•合肥二OO八年六月安徽农业大学学士学位论文（设计）开题报告课题名称草莓叶片再生体系研究课题來源自选课题学牛姓名于忠慧专业园艺学号041301111067指导教师姓名朱立武职称教授研究内容1•筛选草莓叶片组织培养分化适介的培养基；2•研究草莓叶片再生植株的培养途径；3.分析不同草莓品种与植株再生的关系。研究计划3.14〜3.20填写开题报告，药品配制、培养基消毒；3.21〜6.10外植休选取、接种，培养效果观察记载；6.10〜6.

2、15试验数据的统计分析，论文撰写。特色与创新1•为利用草莓叶恻盘进行转基因研究提供基础。2.本试验采用组织培养法，利用草莓叶片诱导愈伤组织和不定芽，筛选适宜的培养基浓度，建立高效草莓叶片再生体系。指导教师意见同意开题，按计划进行试验。*3.10教研室启、见院系见主要领导签字：年月口草莓叶片再生体系的研究作者：于忠慧指导老师：朱立武（安徽农业大学园艺学院合肥230036）摘要：本试验为探索草莓抗除草剂bar基因高效转化方法，就生产上广为栽培的“丰香"草莓品种的试管苗为材料，就影响其植株再生的有关因子进行探讨，利用遗传转化手段提高其抗性，将克服常规育

3、种年限漫长的弊端。在基因的遗传转化中，基因能不能成功转化的关键主要取决于是否有一个高效的离体再生系统，为继续对该品种的遗传改良奠定基础。关键词：草莓叶片再生体系前言:草莓（Fsgd刃ddwmssQDuch）是一种蔷薇科草莓属（Fragarici）多年生草木植物，是世界上温带地区的一种重要水果。草莓是高效经济作物，在枇界各国小浆果生产屮，它的栽培面积及产量都一直处于首位。草莓具右栽培容易、当年结果、产量高、经济效益好等优点，近10年来，我国草莓生产发展迅速，陆续培养出一批新品种，栽培面积迅速扩大。但目前存在的问题是：优良品种满足不了生产规模的扩大；

4、病毒病严重的影响草莓的产量和品质。因此，利用生物技术尤其是转基因技术对其进行遗传改良意义重大。草莓的生物技术研究与其它作物相比，进展较慢，但随着农业生物技术的发展，有了长足的进步。目前，草莓的各种器官、组织和细胞的培养迅速发展起来，已开展了茎尖培养、叶片培养、花药培养、胚培养、原生质体培养等方面的研究，并取得了一定的进展。叶片和匍匐茎的培养人多数是以两种方式形成再生芽，一部分是rti愈伤组织形成层细胞局部快速分裂形成的；一部分不经过愈伤组织直接经表皮细胞脱分化形成的；鉴于组培苗叶片和匍匐茎外植体具有取材方便，便于保存和携带等诸多优点，范云六和张春

5、义认为建立规模化、成熟、高效的草莓遗传转化的再生体系，保证转基因植物大量群体获得，从而有利于转基因性状与其它农艺性状的组合筛选。姜国勇⑴以无菌实生苗的芽、叶片、叶柄分别接种在诱导愈伤组织的培养基上，比较了7种培养基所诱导的愈伤组织对不定芽分化的影响，结果由MS+6-BA1mg/L+IAAO.lmg/L所诱导的愈伤组织在分化培养基上不定芽分化率最高达81.9%。3种外植体由实生芽所形成的愈伤组织不定芽分化率最高，叶柄次Z,叶片最低，分别为70.0%、55.7%和49.9%o再生苗在MS+IBA1.0生根培养基上生根率为84.9%,SarwarU为根

6、的形成要在强光和有蔗糖的条件下才能完成。程林梅等以以草莓叶片和匍匐茎为材料诱导愈伤组织再生植株。选用“星都J“静香"、“马利亚"和''宝交"早生品种,结果表明：“星都"茎段在MS+B5+TDZ2mg/L+IAA0.1mg/L可高频率诱导再生芽，再生频率达100%。每个茎段再生芽10〜15个。叶片再生频率仅70%o“星都”品种匍匐茎再生遗传转化系统已形成，并可用于转基因研究。迄今为止，草莓的叶片培养研究已取得了一定的进展，但仍存在着很多亟待解决的问题。首先，草莓基因型对遗传转化的影响很人，是影响农杆菌转化效率的一个重要因素。因此，要收集更广泛的不同

7、基因型品种，以便筛选出容易再生的基因型进行遗传转化。其次，目前以叶盘为转基因受休的系统所得到的不定芽多采用愈伤组织途径分化而来，直接由器官发生或经胚状体途径发生而來的还少见甚至未见报道。而后者有利于解决遗传转化过程中的嵌合体问题，因此有必要进行进-步研究。再次，不同的草莓品种对不同种类、不同质量浓度的抗生素及抑菌素要求有界。因此,应加大这方面的研究，为转基因的顺利进行奠定基础。此外，有关草莓离休叶片发生不定芽的内在机理还不甚清楚，有待于进一步研究。1材料与方法1」材料药品：嗓苯隆（TDZ）、6■节氨基瞟吟（6・BA）、a蔡乙酸（NAA）、口引卩朵

8、丁酸（IBA）均购自上海生工生物工程技术服务有限公司。电子天平：上海精科天平的FA1104上皿天平；低温冰箱「70°C的SANYO（MD