水浸提灵芝多糖条件研究

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1、西安源森生物实验室对水浸提灵芝多糖的条件研究灵芝提取物灵芝多糖作为西安源森生物的主打产品之一，以其调节人体免疫、抗衰老的特色优势受到了保健詁市场的广泛认可。它的常用提取方法包括水、稀酸、稀碱以及二甲基亚矶等多种溶剂类型，经过研究，西安源森生物实验室发现，水浸提法在操作成本、灵芝多糖活性保持方面具有相当优势。为了研究确定水浸提灵芝多糖的适宜条件，西安源森牛•物实验室在本次实验中，采用苯酚■硫酸检测法对灵芝多糖的含量进行测定，对水浸提灵芝多糖的吋间、温度、固液比例三因素进行试验和正交试验：一.实验材料与方法1.材料、仪器和试剂材料：赤芝，来自西安源森生物实验室仪器：752-

2、C紫外可见分光光度计、分析天平、植物粉碎机试剂:标准衙萄糖、苯酚、硫酸。2.实验方法（1）多糖含量测定方法：采用苯酚•硫酸法。（2）材料处理：取一定量干燥的灵芝碎片，经植物粉碎机破碎后，加入一定比例水在一定温度下浸提一定时间，得到灵芝多糊的水浸提液。（3）标准溶液的制备：収标准衙萄糖20mg于500mL容量瓶中，加水定容至刻度。（4）标准曲线的制作：精确量取标准葡萄糖溶液0.0、0.4、0.6、0.8、1.0、2.2、1.4、1.6及1.8mL,各以水补至2.0mL,然后分别加入6%苯酚1.0mL＞浓硫酸5.0mL,静置10min,摇匀，室温放置20min后于490nm

3、处测定吸光度。横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得到标准曲线如图1。图1标准曲线（5）灵芝多糖提取液稀释至适当倍数后，精密吸取1.0mL,按照标准曲线的方法测定吸光度，计算得灵芝多糊含量。二.实验结果实验结果一：不同浸提时间对灵芝多糖提取的影响浸提时间对灵芝多糖提取的影响如图2所示：0.07654ooO•••ooO32oO••oO2.52.01.5时间/h1.00.5图2不同浸提时间对多糖提取吊的影响如图2所示，在浸提时间到2h时，提取量基木不再变化，说明此时提取液中的灵芝多糖己经达到平衡，因此浸提时间2h时的捉取效果最好；从整体曲线走向來看，浸捉时间越长，提収效果

4、越好，总至2h吋达到平衡。实验结果二：浸提料液比对灵芝多糖提取的影响料液比是指浸提时的加水量（图3）：料液比图3料液比对灵芝多糖提取笊的彫响如图3所示，灵芝多糖溶出量随着加水量的增加逐渐提高，但是当加水量过大会给后续的浓缩操作带來不便；以实际应用为前捉，加水量应该确定在灵芝多糖提取量趋于稳定的节点（1：15）,因此料液的最佳比例应为1：15o实验结果三：浸提温度对灵芝多糖提取率的影响温度的不断升高，分子运动的速度越快,越易于灵芝多糖在水中溶出（图4）：O•••••ooooO択fx-UOIT60708090100浸提温度/9图4浸提温度对灵芝多糖提取童的彫响（1）浸捉温度

5、越髙，灵芝多糖的提取效果就越好；（2）在80〜90°CZ间，灵芝多糖提取量的增加趋于平缓；（3）随着浸提时间的延长，浸提液会不断减少，从而会影响灵芝多糖的提取最，并且温度过高也会影响灵芝多糖的生物活性。因此，最适宜的灵芝多糖浸提温度范围应该在80〜90°C之间。实验结果四：正交试验为了确定浸提吋间、料液比例和浸提温度对灵芝多糖提取效果的影响大小，西安源森生物对此三因素进行了正交试验。因素水平表1：农1正交试验因素水平表水平浸提温度/9A浸提时间/hB料液比C1701.01:102801.51s153902.01:20正交试验结果以及数据分析见表2和表3所示:衣2正交试验

6、结果及其直观分析衣试验号温度A/X：时间B/h料液比CD多糖提取屋g/（1kg灵芝）1l(70>1(1.0)1(1s10>11.5121(70)2(1.5)2(1：15>22.1331(70)3(2.0)3(1:20)32.8642(X0)1(1.0)2(1:I5)34.2652(80)2(1.5)3(1:20)15.3662(80>3(2.0)1(1:10)25.2973(90>1(1.0)3(1:20)25.8183(90>2(1.5)1(1:10)36.3993(90>3(2.0)2(1s15)16.99K6.49611.58113.19013.86040.59

7、7Kt14.91113.88013.38)13.230心19.19015.13614.02613.507R12.6943.5550.8360.353衣3方差分忻衣变异来源自由度平方利方差FA262821.1631410.581.80*B236225.3618112.68C23380S.1616902.58D233734.8216867.41谋差e469960.1817490.05总和8F(0.1)=1.80从正交试验结果看出：（1）最佳提取条件为:A3B3C3,即浸提温度-90°C浸提时间-2.0h料液比一1:20（2）由方差分析和直观分