法舒地尔对肺动脉高压血管重塑中ROCK及ET―1活性的影响

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1、法舒地尔对肺动脉高压血管重塑中ROCK及ET-1活性的影响【摘要】目的探讨法舒地尔对肺动脉高压（PAH）血管重塑中ROCK及内皮素-1（ET-1）活性的干预作用。方法42只大鼠，随机分为空白对照组（C组，7只）、PAH模型组（P组，7只）、生理盐水组（NS组，14只）、法舒地尔组（ROCK组，14只）。注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型，ROCK组于第28天开始注射法舒地尔，治疗4周；P组无干预；NS组注射生理盐水。干预结束后测量、观察各项指标。结果ROCK组和指标与其他组相比，干预效果明显较好（P【关键词】法舒地尔；肺动脉高压；血管

2、重塑DOI：10.14163/j.cnki.ll-5547/r.2016.21.159PAH是心血管常见疾病之一，是因为肺血管的增生及重构导致肺血管阻力进行性增高的致命性疾病。以往研究证明ROCK信号通路参与了肺血管的收缩和重建，但是PAH确切的发生机制尚未完全明确。本研究力求进一步明晰法舒地尔在肺血管的收缩和重建中的作用和作用机理，提高对肺动脉高压发病机制的理解，希望能为预防和治疗肺动脉高压提供临床依据。1材料与方法1.1材料清洁级健康雄性Sprague—DaWley大鼠42只，体重180〜248g,适应性喂养7d后，随机分为C组7

3、只、P组7只、NS组14只、ROCK组14只。1.2肺动脉高压动物模型的建立及干预将野百合碱（Sigma公司，美国）溶解于1mol/L稀盐酸溶液，以1mol/L氢氧化钠溶液滴定至pH7.2,最后用生理盐水配制成1%溶液，在大鼠头颈部皮下一次性注射野百合碱50mg/kgo4周后野百合碱诱导的肺动脉高压模型建立成功，即P组；C组给予普通饲料喂水，直至第8周末；ROCK组于第28天开始腹腔注射法舒地尔（日本旭化成制药株式会社，国药准字养,自由进食饮水。NS组于腹腔注射等体积生理盐H20050331,产品生产批号：ERS11MM）15mg/（

4、kg?d）至第8周末。1.3方法①大鼠肺动脉平均压（mPAP）的测定:注射野百合碱后第4、8周末各自停止用药2d,以10%水合氯醛30ml/kg腹腔内注射麻醉，采用右心导管测压方法经右颈外静脉插管至肺动脉和右心室，肝素化后用RM-6240B/C多导电生理记录仪（成都仪器厂）测定mPAP；②组织学观察：留取肺组织，备提取蛋白。固定于10%中性福尔马林溶液中2d,常规处理，备用于HE染色和ROCK蛋白免疫组化。测定直径75〜150Um的肺动脉血管壁厚度占血管外径的百分比（WT%）及管壁面积占血管总面积的百分比（WA%）；③免疫组化分析肺组

5、织中ROCK蛋白表达；④提取蛋白及免疫印迹（Westernblot）半定量分析ROCK-1、pMYPT-1及MYPT-1蛋白表达；⑤半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测mRNA表达。1.4统计学方法采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数土标准差（x-土S）表不，米用t检验。P