东海陆架沉积物可培养细菌的筛选和抑菌活性研究【开题报告】

东海陆架沉积物可培养细菌的筛选和抑菌活性研究【开题报告】

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时间:2017-08-02

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1、毕业论文开题报告生物科学东海陆架沉积物可培养细菌的筛选和抑菌活性研究一、综述本课题国内外研究动态,说明选题的依据和意义海洋微生物,尤其海洋细菌以其分类的多样性和规模而言,作为生物活性物质产生菌的潜力是巨大的。海洋微生物研究依据分离菌的生境来源可分为海水、沉积物、共栖、共生和深海菌群。生境的不同,不但影响菌群的分布,而且影响微生物代谢产物的合成。从报道的研究结果看,沉积物细菌、共栖细菌和共生细菌是海洋微生物天然药物筛选的重要来源。海洋微生物在海洋中的分布十分广泛,海水、底泥、海洋漂木及海洋动植物的体表或组织内部等都有它们的存在。20世纪40年代以来,人们一

2、直采用分离培养的方法来研究海洋微生物的多样性,即将海洋微生物从环境中分离纯化,然后通过一般的生物化学性状或者特定的表现型来分析其多样性。海洋微生物是海洋生物的重要成员,这类海洋生物不但物种多样性比海洋动植物更加丰富,而且与其他海洋生物一样可产生与陆栖生物结构不同的具有抗菌、抗肿瘤、抗蛋白酶、抗病毒药理活性物质。此外,海洋微生物还具有可以利用现代微生物发酵技术进行生产、不会破坏生态平衡、无原材料后顾之忧、易实现产业化等优势,被认为是最具开发前景的可持续性利用的药源。在海洋微生物代谢产物研究方面,国内外对海洋细菌和放线菌的活性天然产物的研究起步较早,研究较深

3、入,发现的新化合物的数量也较多。相比之下,国内外对海洋真菌的系统研究起步较迟,对其代谢产物化学及生物活性的研究水平远不及海洋细菌和放线菌,据报道从1970年至1993年从海洋真菌中发现的新化合物不到35个,直到1990年开始,发现新化合物的速率才有所增加,进入较快速的发展阶段。目前已从海洋真菌中分离到近300个具有抗菌、抗肿瘤及抗病毒等生物活性的新化合物,表明海洋真菌中蕴藏着许多具有潜在应用前景的活性物质。目前海洋微生物药物的开发和应用现状主要有以下几方面。首先是海洋微生物在抗菌抗病毒类药物方面的开发和应用,它是陆栖微生物药物研究开发的延续和扩展。药物的

4、直接来源是从海水、海泥中筛选出的微生物代谢产物,可直接开发成新药或经修饰后成为新药,也可作为新药开发的先导化合物。海洋微生物药物开发和应用的重点在抗肿瘤药物方面。人们期望从筛选的海洋微生物代谢产物中得到所需新型抗肿瘤药物成为研究开发的重点领域。在当今抗生素普遍应用的时代,社会和科学界对细菌的耐药性迅速出现显得措手不及,因此迫切需要新类型的抗生素快速和持续的开发,以适应细菌抗生素敏感性改变的速度。由于海洋环境的特殊条件,使海洋微生物具有丰富的生物多样性,近年来的研究发现海洋微生物及其代谢产物的活性成分具有化学结构的多样性,生物活性的多样性高生物活性,特殊作

5、用机制等一些非常值得注意的特点。总之,海洋微生物药物的开发虽取得巨大成绩,但研究开发尚处于初级阶段,还有更多海洋微生物药物等待进一步开发来提供给临床上更多治疗和预防用新型特效药。海洋微生物药物的研究开发需要依靠现代科技的进步和各门学科的协同作用,目前海洋微生物药物的迅速开发和应用是新技术不断涌现并推广应用的必然结果。当然,海洋的微生物不计其数,而我们对海洋微生物的研究也仅仅限于常见的一些很少很少的一部分。中国东海独特的海洋环境蕴藏着丰富的微生物资源,这些资源有待去大规模开发利用,而对海洋微生物资源的调查对今后开发微生物资源具有重要的指导意义。本实验以我国

6、东海海泥中的微生物为研究对象,通过平板稀释分离和分子生物学相结合的手段,评估海洋中的微生物种群多样性,为东海微生物资源的利用和开发提供依据。二、研究的基本内容,拟解决的主要问题:本实验是对东海陆架沉积物可培养细菌的筛选和抑菌活性的研究。采用直接从不同深度的海底沉积物样品用无菌蒸馏水稀释并接种于6种不同的培养基内,并且每种培养基原浓度和原料稀释10倍进行培养,以纯海水组做对照,经过10—20天的培养,培养出的各种菌株,选择其中的有明显差异的菌种进行分离纯化、做到出现单个菌落表现出其特征之后试管保种,用自己的方式记录菌株来源和编号,并对部分菌株进行活化和抑菌

7、活性的测定。以此来研究东海海底沉积物细菌多样性。拟定主要解决的问题有:海底沉积物中不同深度层次的细菌种群对各种培养基的适应生长、菌株的培养时间温度的控制;不同深度层次的细菌种群差异性分析;抑菌活性的测定。三、研究步骤、方法及措施:首先,直接从1g沉积物样品用于99ml无菌蒸馏水稀释做预处理,并做不浓度的梯度(10-2,10-3,10-4,10-5.10-6)稀释溶液。第二步,将处理好的样品并接种于蛋白胨培养基、高氏一号培养基、AMM培养基、zobell2216e培养基、MR2A培养基、纯海水经过10—20天的培养。6种不同的培养基内,并且每种培养基原浓度

8、和原料稀释10倍进行培养,以纯海水组做对照,(具体接种时间我们自行安排)。第三步

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