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《AAO2原核表达与抗体制备》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、（修改稿一w8122）CfGST转基因拟南芥抗寒性和叶肉细胞超微结构研究张碧玉李玲笃郑思春S冯启理"(华南师范大学生命科学学院，广东省杭物发育生物工程垂点实验室，广州510631)摘要：GWS7基因克隆于加拿大森林害虫云杉呀虫的幼虫基因组。研究GZ7S7'转基因拟南芥表型，低温条件下叶肉细胞超微结构与存活率的结果表明,以野生拟南芥为对照，CfGST转基因拟南芥茎粗叶宽，植株高度、分枝数、荚果数皆降低，生长速度减慢。低温处理后，转基因拟南芥叶片的叶绿体和线粒体膜结构完幣淸晰，存活率提高20%.关键词：67%厂基因；拟南芥；表型；抗寒性中图法分类号：Thecol
2、d-resistanceandultrastructureofleafcellinCfGSTtransgenicArabidopsisthalianaZHANGBiyul,LILing2*,ZHENGSichun3,FENGQili4(CollegeofLifeScience,SouthChinaNormalUniversity.Guan^don^ProvincialKeyIMbofBiotechnologyforPlantDevelopmentsGuangzhou510631PRChina)Abstract：ThegeneCfGSTisclonedfrom
3、thegenomeofChoristoneurafumiferanawhichlivesinCanadianforest.Thephenotype,ultrastructureofleafcellsandsurvivalrateunderlowtemperatureoftheCfGSTtransgenicArabidopsisthalianawereinvestigated.TheresultsshowthattheCfGSTtransgenicArabidopsisthalianaisdifferentfromthewildtypconebysturdie
4、rstem,widerleaves,lowerheight,fewerbranchesandpodsandslowergrowth.Andtheykeepgoodchloroplastandmitochondrionand20%highersurvivalrateaftercoldtreatment.Keywords:GeneCfGSTArabidopsisthaliana;Phenotype;CoId-resistance低温对植物的生长和发育冇着重要的影响。从植物或植物以外的物种范围，获取“抗寒”:基因转入植物，是研究提高植物抗寒性的方法之一⑴。谷胱甘
5、肽转移酶(Glutathionetransferases,GSTs；收稿日期：基金项目：作者简介：张碧玉（1985），性别（女）,2008届大学生EC2.5.1.18）具有解毒、解除活性氧胁迫、调节细胞程序性衰老、作为胁迫信号蛋白等作用。Feng等（1999）从加拿大森林云杉iKJ虫JChoristoneurafumifemnG的幼虫屮分离得到的蛋白片段，与谷胱U•肽转移酶貝•有高度同源性，命名为CfGST（C.fumiferanaglutathioneS~transferase'）,并成功构建克隆载体pT-CfGST.Huang等⑵（2008）利用克隆载体
6、pT-CfGST构建表达载体，经Kern筛选和PCR鉴定，成功将基因整合到拟南芥基因组并已正常转录表达，纯合T?代转基因植株在4°C和10°C胁迫卜-，转基因植株质膜相对透性和MDA积累低于野牛•植株；叶绿索含量、脯氨酸含量和GST活性均提高，耐寒性增强。本实验研究纯合T2代转基因植物的形态学特征，以及在低温胁迫下的存活率和叶肉细胞超微结构变化，为认识GEST基因作用机理提供基础。1材料与方法1.1材料哥伦比亚生态型（Col-0）野牛型拟南芥（ArabidopsisthalianaL）和纯合CfGST转基因拟南芥种子，由课题组保管。1•2方法1.2.1拟南芥
7、培养按照Wan和Li⑶的方法培养拟南芥野牛型和转基因植株。1.2.2植株表型特征观察统计植物成体的株高、根长、分枝数和荚果数。1.2.3存活率统计取4〜6叶期幼茁各55株，在光照生长箱一4±2°C培养20h,然示在20°C培养2d,统计幼苗存活率（牛存植株数占总植株数的百分比率）。1.2.4叶组织结构观察将50d龄的植株置光照生长箱内，5±rc,湿度85%培养7d,取此处理及20°C常温培养的植株叶片M2.5%戊二醛固定液固定，系列酒精脱水，金耙镀膜，用扌「I描电镜（型号FE1PHILIPSXL30ESEM）观察其叶表而纽织和气孔。1.2.5叶绿体、线粒体叶
8、肉细胞超微结构观察叶片取材同1.2.4,经2.5%戊
