质谱技术在临床微生物实验室的应用进展

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1、·182·实用检验医师杂志2015年9月第7卷第3期ChineseJournalofClinicalPathologist,September2015,Vol.7,No.3综述质谱技术在临床微生物实验室的应用进展韩志勇刘媛媛作者单位：300280天津市，天津海滨人民医院检验科【摘要】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrixassistedlaserdesorptionionization－timeofflight－massspectrometry，MALDI－TOF－MS）技术是一项能够分析多种组分（如蛋白质、脂类、脂多糖等）的技术，其以操作简便、自动化

2、、快速和高通量的优点成为临床微生物检验的新方法。MALDI－TOF－MS技术在细菌、真菌和厌氧菌鉴定中较其他常用微生物检验方法的准确率高，且均可鉴定到种。但在亲缘关系较近的链球菌属和嗜麦芽窄食单胞菌中的鉴定准确性较低，仍需进一步探索研究。MALDI－TOF－MS技术对金黄色葡萄球菌、产碳青霉烯酶细菌和鲍曼不动杆菌等的耐药性筛查具有较高的准确率，但对肠杆菌科耐药性的检测效果较差，仍需深入研究。随着细菌数据库及标准菌株图谱的完善，MALDI－TOF－MS技术必将在微生物鉴定、分型和耐药监测等方面发挥更大作用。【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；细菌；真菌；

3、厌氧菌；耐药性；菌种doi：10．3969／j．issn．1674－7151．2015．03．013目前，在医院临床微生物实验室鉴定细菌主要依赖于传量分析器将同时进入其中的不同质量的离子按质荷比大小统的生物化学反应、分子生物学和形态学等方法，培养分纯分离。分离后的离子依次进入离子检测器，采集放大离子信出单个细菌菌落的鉴定耗时长，即使使用自动化细菌鉴定仪号，经计算机处理，绘制成质谱图。这些原理使MALDI－TOF－器，在时间上还是不能满足临床对检测结果时效性的要求；MS能完成多种成分（包括蛋白质、脂类、脂多糖和脂寡糖、而基于分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高

4、了灵敏DNA、多肽及其他能被离子化的分子）的分析［1，2］。同时具有样度和时效性，但对工作人员技术要求高，检测成本高，只能针本制备方便、实验操作简单、数据库可不断扩展等优点，可实对某些特定菌株，还是难以满足临床常规要求。自80年代现样本微量化、高通量检测和结果自动分析，检测过程从上初，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrixassisted样到结果报告可在数分钟内完成。laserdesorptionionization－timeofflight－massspectrometry，2在临床微生物细菌鉴定中的应用MALDI－TOF－MS）技术就已经成为一个用

5、于研究与分析蛋白2．1细菌鉴定近年来，用MALDI－TOF－MS鉴定细菌的报质特征的有利工具，以其操作简便、自动化、快速、高通量等道不断增加，由于分析所需细菌的样本量小，只需要将菌株优势受到青睐，并开始应用于医院微生物实验室，成为了一培养24h后就可分析，分析每个样本孔需1min左右的时种新的微生物鉴定方法。然而由于仪器昂贵，一次性投入成间，显示出这一技术在临床病原菌鉴定中广阔的应用前景。本高，MALDI－TOF－MS在国外临床微生物实验室的应用尚未2010年，Bizzini等［3］对使用MALDI－TOF－MS方法和传统方普及，在国内临床微生物检验中的应用也

6、刚刚起步。但是，法鉴定临床分离细菌进行了比较，用MALDI－TOF－MS鉴定MALDI－TOF－MS质谱技术以其固有的优势进入临床微生物1371株已用传统方法鉴定完成的临床分离株，其中1278株诊断，发展迅速，并预计在将来彻底改变微生物实验室的面（93．2％）可以鉴定到种的水平，73株（5．3％）可以鉴定到属的貌。本文就国内外对MALDI－TOF－MS技术用于临床微生物水平，不能够准确鉴定的有20株（1．5％）；在被鉴定到种的水鉴定临床分离菌株及细菌耐药性研究的最新进展做一综述。平的1278株菌中，有63（4．9％）株的鉴定结果与传统方法的1MALDI－TOF

7、－MS技术鉴定结果不一致，其中绝大多数（42／63）不一致的结果是由MALDI－TOF－MS分析法是通过对被测样品离子质荷比系统数据库相关分类的差异造成的，14株是由质谱仪的分辨的测定来进行分析的一种分析方法，其基本原理是使样品中率较低造成的，另外的7株是由于传统方法的鉴定错误。van的分析物在离子源中发生电离，生成不同质荷比的带电荷的Veen等［4］也对980株临床分离细菌进行了前瞻性实验研究，离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。质结果表明MALDI－TOF－MS对菌株进行鉴定的准确性要高于ChaoXing实用检验医师杂志2015年9月第7卷

8、第3期ChineseJournalof