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1、第18卷第3期烟台大学学报(自然科学与工程版)Vo.l18No.32005年7月JournalofYantaiUniversity(NaturalScienceandEngineeringEdition)Ju.l2005文章编号:1004-8820(2005)03-0206-06¹小球藻培养条件的研究于贞,王长海(烟台大学生物工程系,山东烟台264005)摘要:对影响小球藻生长的NaHCO3、NaNO3、KH2PO4、维生素等4种主要营养因素进行了优化,获得了以海水为基础的优化培养基配方:NaHCO30.10g/L,NaNO30.225g/L,KH2PO40.005g/L,pH6.0.另外,适
2、量添加土壤浸出液和维生素也会明显提高藻的产量.流加培养可以促进小球藻生物量的增加.关键词:小球藻;流加培养;维生素;土壤浸出液中图分类号:Q949.2文献标识码:A小球藻(Chlorellaspp)为绿藻门(ChloropHyta)小球藻属(Chlorella)单细胞藻,含有小球藻多糖、脂肪酸等多种营养成分,具有多种保健和药理作用,如小球藻多糖具有抗肿瘤、抗病[1]毒、抗血栓及增强机体的免疫功能等药理作用.经过热处理和破壁处理的小球藻,可直接制成小球藻片、小球藻颗粒剂或小球藻胶囊,适用于预防和辅助治疗高血压、高血脂、动脉粥样硬化、冠心病、消化性溃疡、免疫功能低下等疾病,还可用于减轻肿瘤放疗和化
3、疗的副反[2]应.小球藻粉还可用于开发具有更高附加值的精细化工产品和医药制品,如工业上用于制取叶绿素、脯氨酸、油脂等;在医药领域用于提取有效活性成分制成各种医药制剂.另外,在环保方面小球藻可应用于污水处理.小球藻是光能自养型生物,它可和人形成一个循环系统,即人呼出的CO2可供小球藻生长,而小球藻产生的O2可供人体呼吸之用,这使得小球藻在航天方面具有重要的开发价值.要更好地利用小球藻,首先要获得大量的小球藻藻体,本研究通过优化小球藻培养条件来提高小球藻生物量,为其进一步的扩大培养提供依据.1材料与方法1.1藻种与仪器1.1.1藻种来源小球藻(Chlorellaspp)藻种由烟台大学海洋生化研究所
4、提供.1.1.2仪器HZQ-QG振荡箱(哈尔滨东联电子技术开发有限公司);LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂).1.2实验方法收¹稿日期:2004-11-01作者简介:于贞(1973~),女,山东烟台人,讲师,硕士,主要从事海洋微藻方面的研究.第3期于贞,等:小球藻培养条件的研究#207#1.2.3生物量的测定用血球计数板计数.1.2.4实验用培养基在f/2培养基基础上进行优化.1.2.5土壤浸出液的制备首先取没有施化肥或农药的土壤在三角瓶(1L)底部铺上1[3]cm厚的土层,随后加入1L蒸馏水,高压灭菌30min后,静置24h,倾出上清液即可使用.31.2.6
5、培养条件23e,光强为4.5@10lx,转速为140r/min下培养1.2.7正交试验优化小球藻培养盐小球藻生长所需要的营养元素有15~20种,天然水体的大多数元素都能满足它的需要,不会成为限制性因子.C、N、P是小球藻生长的主要营养元素.小球藻营光自养生长,可直接利用空气中的CO2.表1因素水平表--CO2主要以HCO3的形式被利用.因此HCO3盐可直Tab.1Levelsoffactors;4<接作为小球藻生长的碳源.氮是生物最重要的营养ABCD成分,而硝酸盐一直是培养小球藻的一种普通氮源.NaCO/NaNO/KHPO/3324培养基的pH是影响藻类有关生长代谢等许多生pH-1-1-1g#
6、Lg#Lg#L理过程的另一重要因子.本实验利用正交试验优化培养基中NaHCO3、NaNO3和KH2PO4的浓度及小球藻生150.050.0750.0054长适宜的pH,采用L9(3)正交表进行四因素三水平260.100.1500.015正交实验。如表1所示.370.150.2250.0252结果与讨论2.1营养盐浓度和pH值对小球藻生长的影响按表1设计的因素水平在光照培养箱中培养,结果如表2所示.表2正交试验及结果Tab.2Orthogonalexperimentsandresults-1-1-16-1pHNaCO3/g#LNaNO3/g#LKH2PO4/g#L生物量/10#mL1111128
7、.082122240.073133336.034212397.552231122.56231273.1273132108.338221372.009332198.00K1104.18233.91173.2248.58K2293.12234.56235.56221.52K3278.33207.15266.86205.53R62.999.1431.2214.35#208#烟台大学学报(自然科学与工程版
