TNP【大学临床医学毕业论文设计，精选】

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1、临床医学论文・TNP【关键词】TNP摘要：目的：建立裸鼠肺癌骨转移模型，探讨TNP470作为血管抑制剂对肺癌骨转移的形成及生长的影响。方法：将24只肺癌骨转移裸鼠随机分成三组:第一组隔曰予以生理盐水，腹腔注射；第二组隔日腹腔注射3%乙醇；第三组隔日予以TNP47030mg/kg腹腔注射。30天后处死，检测血清碱性磷酸酶、血管内皮牛长因子（VEGF）和肿瘤微血管密度（MVD），HE染色后光镜下观察各组肿瘤组织，流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果：WP470组肿瘤的生长明显受到抑制，肿瘤组织中的MVD与对照组比较显著降低，抑瘤率为36.5%，凋亡指数上升，血清碱性磷酸酶下降。结论：T

2、NP470能够明显抑制裸鼠肺癌骨转移瘤的生长和新生血管形成。关键词：TNP470；肺癌骨转移；血管生成抑制剂肺癌晩期常会出现各种部位的转移，其中以骨转移最为常见，骨转移的发生率为20%〜40%。骨转移早期无任何症状，晩期则表现为局部的顽固性疼痛，并有固定的压痛点。骨转移可导致骨质溶解、高钙血症及病理性骨折等多种并发症，其传统治疗方法有化疗、放疗及放射性核素治疗等。抗血管生成治疗作为一条新的治疗肿瘤思路已被大多数学者所公认〔1〕。TOP470是一种烟曲霉素类似物，其对内皮细胞增殖的抑制作用较烟曲霉素强50倍以上，并能抑制多种鼠肿瘤细胞系的体外增殖和实体瘤的生长。TNP470单独应用

3、对肺癌骨转移瘤生长影响的硏究还未见报道，本实验对此进行初步探讨。1材料和方法11药剂与动物TNP470由日本OsakaTakeda化学工业公司提供，用无水乙醇3ml溶解07ml生理盐水稀释。BALBC裸鼠，鼠龄4周，雌雄兼备‘体重15〜20g‘在SPF环境中饲养。12肺癌骨转移动物模型建立A549单细胞悬液用1640培养基（pH7.0）加15%小牛血清于37°C5%二氧化碳培养箱中培养，注射前PBS洗净，并调节细胞浓度到1x107个/ml。裸鼠乙瞇吸入麻醉后用75%酒精消毒股骨及胫骨处皮肤，取19G针头直接于骨性粗隆上刺透肯皮质,然后将针尖插入骨干内注入0.51的单细胞悬液。注射

4、完后饲养于动物实验中心。13动物分组与体内实验接种后的24只裸鼠均成瘤，将其随机分为3组，每组8只，各组裸鼠体重差异无显著性。①第一组（对照组）：隔日腹腔注射生理盐水；②第二组（溶剂组）：隔日腹腔注射3%的乙醇；③第三组（TNP470组）：隔日腹腔注射TNP47030mg/kg。注射时均为等量液体，于接种30天后断颈处死全部裸鼠，处死之前均摘眼球放血以检测血清碱性磷酸酶的含量;脊椎离断处死后剥山肿瘤组织，称重，测量肿瘤长径和短径'按以下公式计算瘤体积和抑瘤率。肿瘤体积（mm3）二兀/6xaxb2（a为长径,b为短径）抑瘤率二（V1-V2）/VlxlOO%（VI为对照组肿瘤体积小2

5、为实验组肿瘤体积）14各组肿瘤组织内MVD、VEGF表达及结果判断肿瘤组织置于10%中性甲醛中固定24小时，石蜡包埋，组织切片（4/zm），进行免疫组化染色。VEGF和MVD染色均采用SABC法，以PBS代替一抗作阴性对照。VEGF判断标准：高倍镜视野下计数100个细胞，胞浆棕黄的阳性细胞<5%为阴性，n5%为阳性。采用GermanKonTKONIBSA2.5全自动图像分析系测定肿瘤组织中VEGF的平均灰度和象素面积。MVD判断标准〔2〕：凡与临近的肿瘤细胞、微血管或结缔组织分开的，呈棕黄色的单个内皮细胞或内皮细胞串计为一个血管，但肌层较厚或管腔面积大于8个红细胞直径的血管不计数

6、。15流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡肿瘤组织采用EDTA螯合法制备成单细胞悬液后PI（浓度为lOOmg/L）染色，应用EPICSALTRAD型流式细胞仪（美国Beckman公司产品）作细胞周期分析。16统计学处理所有数据采用均数士标准差（士s）表示，P<0.05表示有显著性差异，数据采用SPSS10.5统计软件进行单向方差分析。2结果21各组鼠重、瘤重及肿瘤体积大小对照组及实验组肿瘤生长情况见图1。接种后两组裸鼠瘤体积逐渐增大，对照组肿瘤体积14天后增长明显；INP470组则增长缓慢，20天后肿瘤几乎处于停滞状态，体积无明显变化。实验结束时各组鼠重、瘤重、肿瘤体积见表1。裸鼠体重方面

7、：术后3天称重，三组中均有部分裸鼠体重下降，但到术后6天都基本恢复到术前水平。接种后23天左右，对照组部分裸鼠体重下降、消瘦、行动迟缓；而TNP470组大部分裸鼠均有体重下降的表现，其活力却未见明显受限。瘤重方面：治疗组的瘤重和瘤积与对照组比较均有显著差异（PV0.01）。图1对照组及TNP470组肿瘤对比（略）表1实验组与对照组鼠重、瘤重及肿瘤体积（略）注：*PV0.05,**P<0.01。22各组肿瘤组织VEGF、MVD的表达血管内皮生长因子VEF主要表达于肿瘤细胞的胞浆和胞