实验一、培养基的配制

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1、实验一、培养基的配制9/7/20211实验一、培养基的制作实验二、消毒灭菌（多种灭菌方法）实验三、细菌观察（一）实验四、细菌观察（二）实验五、放线菌观察（5406、紫、灰、诺卡氏等）实验六、酵母菌观察和血球板计数实验七、霉菌观察（青、曲、根、木等）9/7/20212实验八、土壤微生物的稀释分离、纯化实验九、分离结果检查及平板计数，细胞大小测定实验十、空气、水、食品中微生物的检测实验十一、生化实验（一）实验十二、生化实验（二）实验十三、细菌噬菌体效价测定实验十四、菌种保藏实验十五、考查9/7/20213实验报告一、目的要求二、原理三、器材四、操作步骤五、结果(统一用A4实验

2、报告纸,手写)9/7/20214内容：1.牛肉膏蛋白胨培养基（细菌）2.高氏1号培养基（放线菌）3.马丁氏培养基（分离土壤真菌）附录ⅡP2149/7/20215一、实验目的目的：学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤9/7/20216二、操作步骤1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制9/7/20217牛肉膏蛋白胨培养基的配制配方：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂15-20g，水1000ml，pH7.4-7.6。9/7/20218牛肉膏蛋白胨培养基的配制1.称量按配方称取各种药品放入大烧杯。牛肉膏用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水熔化后倒入烧杯,也可放在称量纸上,

3、称量后直接放入水中，这时若稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离，然后取出纸片。蛋白胨很容易吸湿，在称取时动作要迅速。9/7/20219牛肉膏蛋白胨培养基的配制2.熔化在烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，加热熔化，最后补足所损失的水分。注意：在琼脂熔化过程中，需不断搅拌，以防琼脂烧焦糊底。配制培养基时，不可用铜或铁锅加热熔化，以免离子进入培养基中，影响细菌生长。9/7/202110牛肉膏蛋白胨培养基的配制3.调pH用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH或1mol/LHCl，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达到所需范围。注意：pH不要调过头，以避免回调

4、而影响培养基内各离子的浓度。9/7/202111牛肉膏蛋白胨培养基的配制4.分装分装试管，其装量不超过管高的1/5;分装三角瓶的量以不超过三角瓶容积的一半为宜。注意：分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶）口上，以免沾污棉塞而引起污染。9/7/2021129/7/202113牛肉膏蛋白胨培养基的配制5.加塞培养基分装完毕后，在试管或三角瓶上塞上棉塞（或泡沫塑料塞及试管帽等），以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。9/7/202114牛肉膏蛋白胨培养基的配制6.包扎加塞后，再在棉塞外包一层牛皮纸或报纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道棉绳或

5、橡皮筋扎好。用记号笔注明培养基名称、班级、组别、配制日期。9/7/202115牛肉膏蛋白胨培养基的配制7.灭菌：121℃灭菌20-30min。8.搁置斜面：将灭菌的试管培养基冷至50℃左右（以防斜面上冷凝水太多），将试管口端搁在合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。9.无菌检查：放入37℃的温室中培养24-48h，以检查灭菌是否彻底。9/7/2021169/7/2021179/7/2021182、高氏Ⅰ号培养基的配制9/7/202119高氏Ⅰ号培养基的配制配方：可溶性淀粉20g，NaCl0.5g，KNO31g，K2HPO4·3H2O0.5g，MgSO

6、4·7H2O0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，琼脂15-20克，水1000ml，pH7.4-7.69/7/202120高氏Ⅰ号培养基的配制1、称量和溶化先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化，然后再称取其他各成分依次逐一溶化。待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。9/7/202121高氏Ⅰ号培养基的配制2、pH的调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白胨培养基的配制。121℃灭菌20-30min。9/7/2021223、马丁氏培养基的配制9/7/202123马丁氏培养基的配

7、制配方：KH2PO41g，MgSO4·7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，琼脂15-20g，水1000ml，pH自然9/7/202124马丁氏培养基的配制1、称量和溶化准确称取各成分，并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。将各成分完全溶化后，补足水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的溶液，在1000ml培养基中加入1%的孟加拉红溶液3.3ml，混匀后，加入琼脂加热溶化。9/7/202125马丁氏培养基的配制2、分装、 加塞、包扎、灭菌检查与牛肉膏蛋白胨培养基相同。115℃灭菌30min。9/7/202126马丁氏培养