重庆医科大学临床检验诊断学考博试题

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1、临床检验诊断学1.病例分析(全英文的病例)去年考的是梗阻性黄疸2•名词解释(1)APTT(2)CTnTCTnT(3)FQ-PCR(4)增强免疫比浊法(5)DNA芯片/基因芯片(6)TrFIA(7)AG(阴离子间隙)3.简答题，分析题(1)脂蛋门与AS的关系？(2)影响酶促动力学的因索？(3)肾小管与集合管的功能检测？(4)实验室生物安全防护？(5)对一个已知基因序列片段的功能分析(其蛋白质水平上的功能分析),设计你的实验思路分析化学1.名词解释(1)DNA芯片采用光导原位合成或微量点样等方法，将人量生物犬

2、分子比如核酸片段、多肽分了甚至组织切片、细胞等等牛物样品有序地高密度固化于支持物(如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体)的表面，制成点阵，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。根据芯片上固定的探针不同，生物芯片包扌舌基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片。如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片；如果芯片上固定的分子是寡核昔酸探针或DNA,就是DNA芯片。DNA芯片技术包含四个基

3、本要点：DNA方阵的构建、样品的制备、杂交，杂交图谱的检测及读岀。D7A芯片技术的应用：基因表达分析，基因型和多态性分析，疾病的诊断与治疗,肿瘤检测研究及抗肿瘤药物筛选，临床应用蛋口质芯片(proteinarray)是近年来蛋白质组学研究中兴起的种新的方法，它类似于基因芯片，是将蛋门质点到固相物质上，然后与要检测的组织或细胞等进行“朵交”，再通过自动化仪器分析得出结果。这里所指的“杂交”是指蛋白与蛋白Z间如(抗体与抗原)在空间构象上能特界性的和互识别。此方法与传统的研究方法相比具有如下优点：①蛋口质芯片是

4、一种高通量的研究方法，能在一次实验小提供相当大的信息量，使我们能够全面、准确的研究蛋门表达谱，这是传统的蛋口研究方法无法做到的。②蛋白质组芯片的灵敏度高，它可以检测出蛋白样品中微量蛋白的存在，检测水平已达昭级。③蛋白质芯片具有高度的准确性。蛋白质芯片的运用：蛋白质组芯片可用于蛋白质组学研究屮的各个领域，具体来说大致可分为三个方而：研究蛋白质与蛋口质Z间的相互作用，筛选新的蛋口质。用于现在其它方法不能检测到的，如蛋口质-药物、蛋口质-脂质之间的相互作用。还可用于检测蛋白与小分子物质的作用，例如蛋片质与DNA

5、,RNA分子等。问题：蛋白质芯片的制作是决定其运用的关键因素之一，蛋白质组芯片的制作比当前流行DNA芯片制作要复杂，(1)变性高效液相色谱(DHPLC)(DenaturingHighPerformanceLiquidChromatography,DHPLC)又称为温度调控的杂合双链色谱(TemperatureModulatedHeteroduplexChromatography,TMHC),是一种检测D7A突变的HPLC技术。DHPLC检测DNA突变主要是在适当的部分变性温度和洗脱条件下，通过离子对反相高

6、效液相色谱技术使不匹配的异源双链DNA与匹配的同源双链DNA得以分离和检测。已广泛用于基因突变检测、单核甘酸多态性分析(SNPs)和短片段串联重复序列分析(STRs)o在色谱分离过程中，带正电荷的TEAA离子与带负电荷的DNA缔合为离子对，TEAA/DNA离子对通过TEM分子中的烷基链在固定相上产生保留。DM片段越长，所带负电荷越多，与Z结合的TEAA分了就越多。因此，DNA片段越长，与固定和的亲和力就越强。所以，在不变性温度条件下，可分离长度不同的纯合双链DNA分子。(1)化学发光酶免疫分析法(ECLT

7、A)化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的屮间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)宜接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。化学发光酶免疫分析(chemiluminescentenzymeimmunoassay,CLE1A),应属酶免疫分析

8、，只是酶反应的底物是发光剂，操作步骤与酶免分析完全相同[5]:以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体)进行免疫反应，免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物，在信号试剂作用下发光，用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它们有各口的发光底物。增强发光酶免疫分析(enhancedlumincs2ccncecnzymeimmunoassay,ELEIA)在发光系统中加入增强发