CpG-DNA对AA肉鸡新城疫疫苗免疫增强效果的研究

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1、鱼塑堕竺竺竺L●参万方数据ChinaPoultryV01．32，No．11．2010CpG—DNA对AA肉鸡新城疫疫苗免疫增强效果的研究贾雪波1，王成森2(1．中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州225003；2．山东畜牧兽医职业学院，山东潍坊261061)摘要：为探讨CpG-DNA对AA肉鸡新城疫疫苗的免疫增强作用，本研究分别将生理盐水、新城疫Ⅳ系抗原(DNV-IV)、白油加NDv—IV、白油：归NDV-1V加CpG—DNA四组试剂接种一定数量的随机分组的从肉鸡体内，观察不同日龄的AA肉鸡免疫器官指数、细胞因子产生及抗体的分泌情况。结果

2、显示，新城疫Ⅳ系疫苗在白油存在的条件下，对从肉鸡免疫增强作用效果较为明显，而CpG-DNA有进一步增强该效果的作用。试验结果表明，CpG—DNA可以作为潜在的免疫佐剂应用于疫苗生产。关键词：CpG—DNA：AA肉鸡；新城疫；免疫增强StudyofImmunoenhancementofCpG-DNAonNewcastleDiseaseVaccineinAABroilersJIAXueb01。WANGChengsen2，(1．PoultryInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalScienses，Yang

3、zhou，Jiangsu225003；2．ShangdongVocationalAnimalScienceandVeterinaryCollege，Weifang，Shangdong261061)Abstract：％exploretheimmunoenhancementroleofCpGoligonucleotideonAAbroilers，saline，NewcastlediseasetypeIV(NDV-IV)antigen，whiteoilandNDV-IV，whiteoilplusCpGandNDV-IVreagentwasin

4、oculatedfourgroupsbroilersrespectivelyandthebroilersweredividedintogroupsrandomly．Later，theindexofimmuneorgarls。cytokinesandantibodytiterweredetected．TheresultsshowedthatemulsivewhiteoilhadabetterimmunoenhancementfunctionforNDvaccineandCpG-DNA，whichcouldfurtherenhancethe

5、effectiveness．ThestudyindicatedthatCpG-DNAmaybeapotentialimmuneadjuvantforvaccine．Keywords：CpG--DNA；AAbroiler；Newcastledisease；immunoenhancementCpG—DNA是以CpG二核苷酸为核心的未甲基化的特殊DNA序列，可以激活免疫活性细胞产生多种细胞因子，增强机体的特异性和非特异性免疫反应。研究表明，CpG—DNA具有良好的免疫刺激作用，有可能成为一种高效、安全收稿日期：2010-02—16修回日期：2

6、010—03—24的疫苗佐剂，为自身免疫、免疫缺陷和癌症等疾病的防治提供帮助【1’2】。本研究以从肉鸡为研究对象，探讨CpG—DNA对新城疫疫苗的免疫增强作用。1材料与方法1．1试验材料CpG—DNA，用灭菌生理盐水将CpG-DNA一29—万方数据@中圈采禽20lo年第32-卷Jg坚竺配制成浓度为2斗g／斗L的溶液，经0．22炉微孔滤膜过滤，-20oC冻存；新城疫Ⅳ疫苗，购自南京梅里亚公司；1一干扰素(INF一1)和白细胞介素一4(IL-4)放免试剂盒，购自解放军总医院科技开发中心放免所；淋巴细胞分离液，购自天津TBD公司；RMPll6

7、40培养液，购自GIBCO公司。1．2试验动物健康从肉鸡雏鸡(非免)120只，随机分为空白对照组(视母源抗体情况，7-12目龄注射定量的生理盐水)、新城疫Ⅳ系(NDV—IV)免疫组(7-12日龄新城疫Ⅳ系(NDV-IV)免疫)、白油加NDV-IV组(7—12日龄注射白油佐剂和NDV-IV抗原混合成的油乳剂苗)、白油加NDV-IV加CpG免疫组(7-12日龄注射混有CpG的油乳剂苗)。1．3．测定指标1．3．1抗体测定于免疫后7、14、21、28d每组随机采血各10份，测定ND抗体效价。以10只鸡血清抗体滴度的平均值表示该组的抗体水平。1

8、．3．2免疫器官指数测定于免疫后7、14、21、28d每组随机解剖3只，计算脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官与体重的比例指数。1．3．3细胞因子测定于免疫后7、14、21、28d每组随机采血各10份，无菌分离外