（浙江专版）2017_2018学年高中生物课时跟踪检测（二）分离以尿素为氮源的微生物浙科版

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1、课时跟踪检测（二）分离以尿素为氮源的微生物1．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如图所示：(1)图中物质A为________________，若要统计每克土壤样品中以尿素为氮源的细菌的活菌数目，宜采用________________法接种到尿素培养基上，对照组配制的培养基为____________培养基，若用同浓度的土壤稀释液接种，实验组培养皿中菌落数____________(填“大于”“等于”或“小于”)对照组。在能利用尿素的细菌菌落周围，有红色环带出现的原因是_______________________________________

2、________。(2)下列培养基中，能分离出分解尿素的细菌的是(　　)A．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水B．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、尿素C．NaCl、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素D．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(3)欲将分离得到的以尿素为氮源的细菌进行扩大培养，应使用________培养基。答案：(1)无菌水　涂布分离　LB全营养　小于　能利用尿素的细菌产生的脲酶，将培养基中的尿素分解，产生的氨使指示剂呈红色　(2)B　(3)LB液体2．苯酚是工业生产排

3、放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入______作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(填“影响”或“不影响”)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用____________________法。(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于__________________________

4、________；使用________________________________法可以在⑥上获得单菌落。(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？_______________________________________________________________________________________________________________。解析：根据微生物对营养的需求，在培养基中加入或不加某些物质以达到促进目的菌生长，抑制或阻止其他杂菌生长的目的，然后再用涂布分离法、划线分离法或其他方法筛选出单个目的菌落，再接种

5、培养即可获得纯目的菌。在设计实验中要注意单一变量原则和对照原则，操作中要严格进行无菌操作。答案：(1)苯酚　影响　涂布分离　(2)④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基加入了苯酚作为碳源　涂布分离法或划线分离　(3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程进行无菌操作3．图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。请回答下列问题：(1)图中选择培养基应以__________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加__________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。(2)

6、在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是________________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为_________

7、_____，突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。解析：(1)脲酶能够催化尿素水解释放出氨和二氧化碳，因此选择培养基中应以尿素为唯一氮源。挑取单菌落接种到加有酚红指示剂的鉴别培养基中，培养一段时间后，菌落周围的氨增加，pH升高，酚红指示剂将变红色。(2)该过程采取的接种方法为涂布分离法。利用涂布分离法对细菌进行计数时，应选择菌落数在30～300的平板，因此平板上长出的细菌菌落平均数为(156＋178＋191)÷3＝175个。每克土壤样品中的细菌数为175÷0.1×105＝1.75×108个。血细胞计数板计数法会将死细胞计算在内，而稀释涂布

8、平板计数法只能计数活细胞(只有活细胞才能在平板上生长)，故一般血细胞计数板计数法所得结果要比涂布分离法所得结果大。(3)箭头处插入70个