鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究

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1、湖南农业大学硕士学位论文鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究姓名：戴荣四申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：刘毅蹿趨轴立论文在解彳本人声明所呈交朋究成果，尽我所知，除了人已经或撰写过的研究成位或证书而使用过的材料本论文中作了明确的说明鸡新城疫鸡新城疫是鸡的一种I以及中枢神经系统的新城3脑、内脏、粪便和口鼻中,»g艄p》w且t.tStudiesond7receaseDeve1opinenNewcastE©51WGDricHsa：ligroml卩孑IdoLnosVimeast1强A血断礎册哪潮I政（醛bl駆血癱些®这鸡新城疫新城疫(Newca1ediseasevirus,NDv)弓都用它

2、们制备。2.中睾疫苗毒株。3.强毒力材（四）、生物学特征：!不同动物的红细胞；二;i疫病毒。该病毒在细胞培能将红细胞吸附在其表函（即合胞体）：蚀斑形丿我国地域广阔，集纹以来一直采取以疫苗接不m2.来才能在电解质中稳定存素等多种物质非共价键结质包被胶体金，方法简便间短、结果易于肉眼判断£免疫胶体金技术的起色法骥察沙门氏菌，随后不仅只应用于免疫电镜水迹及免疫斑点试验，成为本身的显色特点结合免农待测物，由Leuveri的测定（即妊娠诊断III3）由3、癌胚抗原（CE」目前的运用主要表现在以或抗体检测系列；3、習在人医方面，在“删本研究旨在利用免兴应用时不需要任何专业曲1材料1・1非免疫土鸡：购

3、自1・2家兔：湖南农业大1.3鸡：湖南农业大学1.4新城疫Lasot份2方法1・1鸡免疫球蛋白Ig2・1・1从鸡血清中淮按照参考文献“”略禾50ml生理盐水，再窃过门/夜，以3000r/mi拉，使之成为油包水的程』行初次免疫，大腿肌肉、I加强免疫一次，免疫届10即兔抗鸡抗体，采用饱和彳2•2.4检测兔抗鸡抗彳按照参考文献，采用）保存备用。2・3胶体金标记鸡新城》越体间距1cm,兔抗鸡抗彳1%BSA的PBs封i2・4.3组装胶体金］按照参考文献"进彳抗体玻璃纤维、包被有:明胶使其首尾相互衔接Ex6.5cm大小的条,2・5胶体金免疫层析i3.按上血，收集免疫兔血清。3.1.5纯化兔抗鸡抗采用

4、饱和硫酸钱法木的兔抗鸡抗体。3.1.6检测兔抗鸡方用生理盐水制成1%的玮将兔抗鸡抗体倍比稀释尼大稀释度作为兔抗鸡抗勺3・4胶体金免疫层析试纽3・4.1胶体金免疫层彳3.4.1.1病料处理将收集到的24份待;磨制成1:5的悬液，并42—4h,以抑制可能污垛待检。乳4.1.2血凝试验才取上述材料，采用制试將血凝价蘇鹹抗体湘彊留酌胶沁感櫃可见十二指肠及近直肠处出血或坏死。心冠脂肪及:病鸡送湖南农业大学能凝聚鸡红细胞，且被鸡支原体阳性血清抑制表明i5到J4离为分)明T说D

5、7•ZM12/VP4'0JV时12亡境用制备的胶体金免瘦3.5.2湖南省某市一〉性为2Q份待瞳髓碧中份1・纯化后鸡新城疫抗

6、体疥纯化前鸡新城疫抗体1:512o2・纯化后兔抗鸡抗体效,纯化前兔抗鸡抗体的程・胶体金免疫层析试纸1测出血凝价在1：32吵Tab1e1TheestSa[[T1apbl1e2There辭羊融血5・胶体金免疫层析试纟I由表3可知：用制4染性支气管炎病料上清衣表3新城疫试纸条朶Tab1e3Thy冉秦4可純：用制Table4Theres免務屢舷勾表5亲Tab1e5156+十+分析与1・关于鸡免疫球蛋白的:鸡免疫球蛋白的分團最后溶于pH7・5的P通过改进，先用35%的DH8.0M/15Tris-HPH值有很大关系。DH9.0一9.2左右4.2制备试纸条时，各造成金标抗体滞留，不能4.3胶体金试剂在

7、潮湿持整个胶体金试纸条处于保存较长时间。4.4新城疫胶体金试纸试鸡新城疫特异性好，与胶体金试纸条检测反应的强，因而应考虑调整包被6•关于临床测试当鸡群发生非典型*类似鸡新城疫特点的基础机采集血样，送实验室竹一次，通过比较前后两秒发生典型性鸡新城疫并苹结合流行病学、临床症岁试验研制的试纸条，只籍诊断结果，且所用时间兎价值。1.采用胶体金免疫层析术与免疫学相结合发异域仍处于起步阶段，券1.用本实验研制的鸡新测试，并与鸡新城疫1蔡宝祥主编.家畜1997：252,2林绍仪.鸡新城疫1982,43,3梁英.畜牧兽医月:124马闻天.畜牧兽医.17贺忠心.鸡新龙科技，1983—8018曹澎泽等主编.

8、兽医微1992,5:24(19徐宜为主编.免疫检测:302—30320王东勇，张松乐.免疫丿:姒卑直旬70体[J]・浙江兔金丈程义.(勇2口田、彳王33原[J]・中华43〜4414郑葵阳，杜文平，刘义「初步应用[J]14〜1715饶贤才，俞树荣杂志，2000,2736吴冯波，候惠仁.14中国预防学报，231李学武，张改平检测研究.中国19全丰另，。棗晓晖国预防兽医学报,66宋农，李君文，中国公共卫生，21£*侯7张改平眩3及初步应用