鸡新城疫诊断技术规程

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1、鸡新城疫诊断技术规程1范围本规程引用GB16550-1996新城疫检疫技术规范。本规程规定了新城疫群体检疫、个体检疫、实验室检验和检疫后处理的技术规范。本规程适用于鸡和其他可感染新城疫的禽类。2群体检疫对养禽场、独立饲养的禽群及外售、外运的禽群施行检疫。2.1查明疫病背景通过询问兽医人员或检查疫病记录，检查被检禽场（群、室）在过去的一年内是否有出现过新城疫临诊病例，是否有与新城疫接触史，周围2km范围内是否发生过新城疫。2.2查清免疫状况通过查验免疫证明或查询其他资料，检查被检群是否已按规定注射合格疫苗。如按规定免疫并正处于规定的保护期内，禽只健康状况

2、良好，被认为免疫合格。如免疫不符合规定要求，要以合格疫苗再次接种，隔离饲养观察至群体抗体滴度达25以上，全群健康，认为免疫合格；观察期内发现疑似新城疫病禽，须按2.3和2.4条要求进一步检查。2.3群体临诊检查首先作静态检查，让禽群处于静止状态，观察营养状况、精神状态、呼吸、粪便、鼻和口腔分泌物有否异常。然后观察禽只运动状况，有否跛行、共济失调、痉挛等异常现象。检查中重点注意以下情况：a.精神沉郁或无任何症状而死亡；b.体温升高、食欲减退、精神委顿、产蛋减少或停止；c.口腔和鼻腔分泌物增多，素囊胀满；d.呼吸困难、喉部发出“咯咯“声（晚间较明显）；e.

3、下痢，粪便成绿色；f.偏头转颈，作转圈运动或共济失调。若发现疑似病例，按2.4条要求进一步检查，同时对全群隔离饲养。2.4病理解剖检查对临诊疑似病例，应全部或抽样解剖，依据下述病变作出初步判断：a.口腔、喉部有粘液，咽部粘膜出血；b.腺胃乳头肿胀，挤压后有豆腐渣样坏死物流出，乳头有散在的出血点；c.肌胃角质下层有条纹或点状出血、有时见不规则溃疡，腺胃与肌胃交接处有出血斑、条；D小肠前段有大面积散在出血点，或肠粘膜有纤维性坏死并形成假膜，假膜下出现红色粗糙溃疡；E盲肠和直肠皱褶处有出血，盲肠扁桃体（淋巴滤泡）出血坏死；F气管粘膜充血、出血、气管内有粘液；

4、G心冠脂肪、心外膜及心尖脂肪上有针尖状小出血点。3个体检疫3.1在无群体检疫条件的场合，须进行个体检疫。个体检疫合格的禽只一般供食用，如继续饲养应隔离3周，经观察无异常后，方准与其它禽只混养。3.1.1查明是否来自疫区。3.1.2查验免疫证明。3.1.3临诊检查和病理解剖检查检查内容参照2.3条和2.4条进行，发现疑似新城疫染疫禽只，立即作无害化处理。4实验室检验4.1下列情况进行实验室检查a.产地定期检疫；b.监测免疫状态；c.疑似病鸡的定性，或临诊及解剖检查初步诊断为新城疫，需进一步确诊；d.检疫中发现重大疫情（如禽流感），须作鉴别诊断；e.行政主

5、管部门、饲养单位、售购或争议双方要求进行实验室诊断。4.2实验室检测方法a.病毒分离鉴定试验，见附录A。b.血凝抑制试验，用于免疫监测，见附录B。5.检疫后的处理5.1经临床检查、解剖检查和实验室诊断等综合判断，确诊为新城疫的禽群或禽只，按GB16548处理。5.2经初步诊断为新城疫可疑的禽群（禽只），按下述方法之一处理：a.除将可疑禽只按5.1条处理外，全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，如在接种后观察期内出现可疑禽只，亦按5.1条处理，观察21天后，对临床健康，免疫滴度达到25以上的禽只，经体表消毒后按健康禽只对待。b.经初步诊断为新城疫可疑的禽群（

6、禽只），在全部隔离饲养的同时，对可疑禽只采样作实验室诊断，如确为新城疫者，全群即按5.1条处理。5.3发生过新城疫的禽场在半年之内，其禽只不准出售、外运。附录A病毒分离鉴定试验A1仪器设备注射器：1ml。注射针头：5—5.5号。血凝试验板：V型、96孔。微量移液器：50ul。恒温箱。超净工作台或无菌室。A2试剂。无菌生理盐水。青霉素。链霉素。标准阳性血清。A3样品采集及处理A3.1活禽用气管拭子和泄殖腔拭子（或粪）。A3.2死禽以脑为主；也可采心、肝、脾、肾、气囊等组织。A3.3样品用生理盐水研成1：5乳液；拭子侵入2—3ml生理盐水中，反复吸挤压至无

7、水滴出，弃之。溶液中加入青霉素（使终浓度为1000单位/ml）、链霉素（使终浓度为1mg/ml）。泄殖腔拭子（或粪）样品，青霉素、链霉素量提高5倍。然后调pH7.0—7.4，37℃作用1h，再1000r/分钟离心10分钟，取上清0.1ml，经尿囊腔接种9—10日龄SPF鸡胚。A4培养物的收集及检测A4.1培养4—7天的尿囊液经无菌采集后-20℃保存.A4.2尿囊液按附录B作血凝试验，并与标准阳性血清作血凝抑制试验，确定有无新城疫病毒繁殖。A4.3MDT（最小病毒致死量引起鸡胚死亡的平均时间）的测定：将新鲜尿囊液用生理盐水连续10倍稀释，10-6—10-

8、9的每个稀释度接种5个9—10日龄SPF鸡胚，每胚0.1ml，37℃孵化。余下的病毒保存于4℃