基因克隆和转基因论文

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1、基因克隆和转基因论文基因工程的利弊王家骥200905511472009级城市坏境艺术设计摘要：转基凶克隆技术是最近发展起來的利用细胞核移植技术生产转基因动物的方法，它是以动物体细胞为受体，将R的基因以DNA转染的方式导入能进行传代培养的动物体细胞，再以这些体细胞为核供体，进行动物克隆。与传统转基因方法相比具有明显的优势。木文概述了传统转基因技术的缺陷、转基因克隆技术的优越性、研究概况以及目前存在的问题等。关键词：转基因动物克隆转基因克隆DNA转基因植物食品生物学引言：基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核莒酸序列

2、的总称，是具有遗传效应的DNA分了片段。基因控制蛋白质介成，是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根本原因，即所谓〃种瓜得瓜，种豆得豆〃，”一母生九子，九子各不同〃。基因通过DXA复制及细胞分裂把遗传信息传递给下一代，并通过控制蛋门质的合成使遗传信息得到表达。正文：生物学家早在一百多年前就知道，4物的表征遗传口其亲代。生物细胞的细胞核，含有染色体，其组成分为DNA。DNA含有四种碱基一腺嚓吟(adenine)，胸腺喘咙(thymine)，胞喘噪(cytosine)和鸟嚓吟(guanine)(它们分别简称A、

3、T、C、G)。这些碱基在DNA屮看似杂乱无章，但它们的排列顺序，正代表遗传讯息。每三个碱基代表一-种胺基酸的密码。基因就是这些遗传密码的组合，亦即代表蛋门质的胺基酸序列。每个基因含冇启动控制区，以调控基因的表达。基因工程技术(基因工程是一项很精密的尖端生物技术。对以把某一生物的基因转弗送入另一种细胞中，甚至可把细菌、动植物的基因互换。当某一基因进入另一种细胞，就会改变这个细胞的某种功能。)在页药及农业上应用广泛。这项尖端科技加上最近突破性的生殖科技，却引发人们极大的隐忧及争论。1.基因克隆和转基因过程1.1基因克隆基因

4、克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为：分、切、连、转、选。〃分〃是指分离制备合格的待操作的DNA,包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA；〃切〃是指用序列特异的限制性内切酶切开载体DNA,或者切出H的基因；〃连〃是指用DNA连接酶将冃的DNA同载体DNA连接起來，形成巫组的DNA分子；〃转〃是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增；〃选〃则是从宿主群体屮挑选出携带有重组DNA分了的个体。基因技术工程的两个最基本的特点是分了水平上的操作和细胞水平上的表达，而分子水平上的操

5、作即是体外重组的过程，实际上是利用工貝酶对DNA分子进行〃外科手术〃。1.1.1基因克隆技术基因克隆技术包括了一系列技术，它大约建立于70年代初期。美国斯坦福大学的伯格（P.Berg）等人于1972年把一种猿猴病毒的DNA与X噬菌体DNA用同一•种限制性内切酶切割后，再用DNA连接酶把这两种DNA分了连接起来，于是产生了一种新的重组DNA分子,从此产生了基因克隆技术o1973年,科恩（S.Cohen）等人把一段外源DNA片段与质立DNA连接起来，构成了一个重纽质粒，并将该重纽质粒转入大肠杆菌，第一次完整地建立起了基因克

6、隆体系。一般来说，基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有白主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构建成新的重组DNA,然后送入受体生物屮去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。因此基因克隆技术又称为分子克隆、基因的无性繁殖、基因操作、重组DNA技术以及基因工程等。采用重组DNA技术，将不同来源的DNA分子在体外进行特异切割，重新连接，组装成一个新的杂合DNA分子。在此基础上，这个杂合分子能够在一•定的宿主细胞屮进行扩增，形成大量的子代分子，此过程叫基因克隆。1.1.2克隆过程概述DNA的克隆是指在体外将含有冃

7、的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入猶主细胞或受体41物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，因此DYA克降又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。D7A克降涉及一系列的分子生物学技术，如U的DNA片段的获得、载体的选择、各种工具酶的选用、体外重组、导入宿主细胞技术和重组子筛选技术等等。（1）目的DNA片段的获得DNA克隆的第一步是获得包含ti的基因在内的一群DNA分子，这些DNA分子或來口于ti的生物基因组DNA或来自目的细胞mRNA逆转录合成的双链cDNA分子。由于基因组DNA

8、较大,不利于克隆，因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段，常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列己知rfoFL比较小就对用人工化学直接合成。如杲基因的两端部分序列已知，根拯已知序列设计引物，从基因组DNA或cDNA中通过PCR技术可以获得FI的基因。（2）载体的选择基因工程的载体应具冇一些基本的性质：1）在宿