不同蜂蜜中蛋白差异研究

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1、福建农林大学硕士学位论文不同蜂蜜中蛋白的差异研究名：胡庆银申请学位级别：硕士特种经济动物饲埜指导教师：缪晓青20100401木实验对荔枝、龙眼、洋槐、枇杷、极树、油菜六种蜂蜜分别进行取样，然后对六种蜂蜜的蛋白进行提取、分离和纯化；用SDS-PAGE凝胶电泳技术和双向电泳技术对六种蜂蜜的蛋口质进行对比和分析，从中找出他们的共同蛋口和差异蛋口，通过对蜂蜜蛋口的检测和分析，从中找出蜂蜜蛋片质图谱，进而对蜂蜜真假的检测提供有力的证据。通过对六种蜂蜜蛋白的研究和分析，得出如下结论：（1）六种蜂蜜屮的蛋白含量极低，而且蛋白含

2、量各不相同，荔枝、龙眼、洋槐、枇杷、锻树、汕菜六种蜂蜜的蛋白质含量依次为：0.280mg/ml、0.208mg/ml>0.272mg/ml、0.176mg/mk0.224mg/ml>0.192mg/mlo（2）六种蜂蜜的原蜜和成品蜜的蛋口质百分含量基本一致，说明蜂蜜加工过程对蛋白质的影响不大。（3）对六种蜂蜜蛋白定量后，按相同蛋白量上样进行电泳，图谱结果显示他们的蛋口在55kD附近含量都很大，但相互之间存在蛋口量的差异。大部分蛋口条带分布在20kD-110kDZ间，六种蜂蜜蛋白种类虽然冇很大的相似性，但六种蜂蜜也

3、冇各自的特异蛋白。（4）取等体积的六种蜂蜜，捉取蛋白后将其定容到相同体积，各取10pL进行SDS-PAGE凝胶电泳，得出六种蜂蜜的蛋白图谱在55kD、35kD、30kD和25kD处都有蛋白条带，但是六组样品屮的蛋白条带分布和颜色深浅却不相同；从六种蜂蜜蛋白图谱屮可以得出枇杷蜂蜜蛋白含量最低；荔枝和龙眼蜂蜜的蛋白含量较高；锻树蜂蜜在116kD处的蛋片条带比其他样品耍深的多，说明这些蛋片质种类虽然相同但含量不同。荔枝蜂蜜在65kD处有明显的区别于其他样品的条带出现，龙眼蜂蜜在120kD处有特异性蛋白条带，洋槐蜂蜜在8

4、5kD、50kD和22kD处有特界性条带出现，油菜蜂蜜的特界蛋白在23.5kD处，通过对蛋白含量和特界性蛋白的检测可以得出六种蜂蜜蛋白之间存在明显的差界。（5）分离出六种蜂蜜蛋口并定量，按相同蛋口量进行双向电泳，发现六种蜂蜜蛋口的等电点基本都集中在pH4-7Z间。六种图谱的分布区域基木一致，每种蜂蜜的图谱中对应区域都存在其特冇的蛋白分布点，分布最丰富的蛋白点集中在pH6-911分子量在25kD-100kD之间。选取四个主要的区域进行分析，在分子量为26kD且pH在5-7之间，六种蜂蜜蛋白点表达量各不相同；分子量为

5、85kDftpH从6.5-7.5之间六种蜂蜜的蛋白点表达量不同；分子量在55kD且pH值从6-8.5处六种蜂蜜蛋白的表达量差异十分显著；分子量在41kD且pH值从6-7.3处六种蜂蜜蛋白表达量各不相同，因此六种蜂蜜的蛋白点具冇明显的差异性。（6）六种不同蜂蜜蛋白之间存在着差异，这对鉴别多种蜂蜜相互掺假有一定的参考价值。用相同的蛋白提取方法，在果葡糖浆中并没有蛋白被提取出來，这将对果葡糖浆这种假蜜的检测提供有利证据。关键词：蜂蜜；蛋口；差异；电泳AbstractThisstudywasconductedwithsi

6、xsamplesofhoneysoflitchi,longan,acacia,loquat,lindenandrapetofindanewmethodtodetectadulteration.Thesixproteinsofhoneywasextracted,andacomparativeanalysiswasconductedtofindoutthedifferencesofthembySDS-PAGEgelelectrophoresisandtwo-dimensionalelectrophoresis.Byd

7、etectionandanalysisofhoneyproteins,fromwhichtofindtheprofileofproteins,wecandetermineifthehoneywasadulterated.Theresultsofsixhoneyproteinswereshownbelow：(1)Thesesixhoneyswerelowinproteins,andtheproteincontentsweredifferent.Theproteincontentsinhoneysoflitchi,l

8、ongan,acacia,loquat,lindenandrapewere0.280mg/ml>0.208mg/ml>0.272mg/ml>0.176mg/ml>0.224mg/ml>0.192mg/ml,respectively.(2)Theproteincontentsofrawhoneywerealmostthesameasprocessedhoneyinthiss