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1、STARS在棕徊酸诱导的肌细胞胰岛素抵抗中的作用张柳马慧娟邢邯英牛尚梅吕秀芹宋光耀河北医科大学研究生学院河北省人民医院内分泌科河北省老年医学重点实验室摘要:目的:研究Rho信号横纹肌激活剂(thestriatedmuscleactivatorofRhosignaling,STARS)在棕植1酸诱导的肌细胞胰岛素抵抗中的作用及其机制。方法:采用棕桐酸(palmiticacid,PA)孵育L6成肌细胞构建胰岛素抵抗模型,包括对照组和棕櫚酸组,并通过质粒上调STARS的表达,包括对照组,空质粒组(pcDNA),S
2、TARS过表达组(pcDNA/STARS),棕稠酸组(PA),棕稠酸空质粒组(PA+pcDNA),棕稠酸STARS过表达组(PA+pcDNA/STARS),以及siRNA下调肌细胞中STARS的表达,包括对照组,siRNA阴性对照组(NC-siRNA),STARS敲低组(si-STARS),棕桐酸组(PA),棕桐酸siRNA阴性对照组(PA+NC-siRNA),棕蜩酸STARS敲低组(PA+si-STARS)研究STARS在骨骼肌胰岛素抵抗中的作用以及其下游信号通路。采用RT-PCR及Westernblot
3、方法检测各组STARS>血清应答因子(serumresponsefactor,SRF)、巨核细胞白血病因子1(megakaryoblasticleukemia1,MKL1)、AKT、IRS-1,以及GLUT4mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组相比,PA组STARSmRNA和蛋白的表达明显增加(均P=0.000);STARS±调组肌细胞STARSmRNA和蛋白表达均明显增加(均P=0.000),IRS-1(P=0.000)、GLUT4(P=0.000)和AKTmRXA(P=0.000)表达明显下降,AKT
4、丝氨酸磷酸化水平(P二0.000)和GLUT4(P=0.000)蛋白的表达显著降低,IRS-1丝氨酸磷酸化水平显著增加。下调STARS的表达后出现了与上述相反的结果。经上述干预后,SRF和MKL1基因和蛋白水平均没有明显变化。结论:STARS与胰岛素敏感性密切相关,但其下游靶点MKL1和SRF没有变化。可能通过影响其修饰后翻译,也可能通过其他信号通路在胰岛素抵抗中发挥作用,需要进一步研究。关键词:胰岛素抵抗;肌细胞;Rh。信号横纹肌激活剂;血清应答因子;巨核细胞白血病因子1;胰岛素信号通路;作者简介:张W;
5、Emai1:zhangliuhbyk@163.com;研究方向:胰岛素抵抗。作者简介:马慧娟,Ema订:huijuanma76@163.com。收稿日期:2016-06-20基金:国家自然科学基金资助项目(编号:81200638)RoleofSTARSininsulinresistanceinducedbypalmiticacidinmusclecellsZhangLiuMaHuijuanXingHanyingNiuShangmeiLtiXiuqinSongGuangyaoGroduateInstitute
6、ofHebeiMedicalUniversity,DepartmentofEndocrinology,HebeiGeneralHospital,HebeiKeyLaborstoryofGeriatries;Abstract:Objectivc:TostudytheroleofthestriatedmuscleactivatorofRhosignaling(STARS)ininsulinresistanceinducedbypalmiticacidinmusclecellsaswellasthepotenti
7、almechanismsmodulatingSTARSexpression.Methods:L6myoblastswereincubatedwithpalmiticacidtoestablishamodelforinsulinresistance.TheeffectsofSTARSoninsulinresistaneeinL6musclecellswereobservedanditspotentialmochanismsofactionwerefurtherexploredbyinducingitsover
8、-expressionandknockdown.LevelsofSTARS,SRF,MKL1,AKT,IRS-1andGLUT4mRNAandproteinweredetectedbyRT-PCRandWesternblot,respectively.ResuIts:Comparedwiththoseinthecontrolgroup,STARSmRNAandprotein1evelsweresignificei