pcos胰岛素抵抗受体后信号转导分子机制的分析

pcos胰岛素抵抗受体后信号转导分子机制的分析

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1、可F釆用放射兔境法测定各实验组血清空腹腕岛素(Fastinginsulin,FIN)的浓度二采用葡萄檐氧化酶法测定血浆空腹血糖印制咱抖asmaguc圃,FP出来肘11恻(Homeost凶smodelassnment,HOMA)模型计算腆岛索抵抗指数(HOMA-IR),以分析研究指标与顶的关系.2、采用免疫组织化学技术检测AR在三组卵巢组织、中的表达3、采用1AsternbJot技术检测IRS-j,IRS-2及PI・3KP8号亚单位蛋臼在二组脂肪组织屮的表达,进行半定量分靳!并采用免疫组织化学技术检测IRS・1及IRS・2在脂肪组织

2、中的分布a4、应用免度沉淀技术及增强化学发光法(Enhancedchemilumines阳联ECL)检测三组脂肪组织中IRS-1及IRS-2蛋门质的酶氨酸磷酸化程度,并进行半定量分析E5、采用RT陀R方法检测三组脂肪组织PI-3激酶P85亚单位mRNA的表达!并进行半定量分析:采用免疫沉淀、薄层层析及V液闪计数方法俭测PI・3擞酶的活性,并进行分析.结果1、PCOSIR组患者血清L1I,L11!FSH及皇盲kl的水平均显著商于阿O非IR组与对照组(P<0.0曰!问S非IR组患者血清LH、LH/rSH及率阁的水平亦显著商于对照组(P

3、<0.05)民郎IR组患者fIN、H则IR与PCOS非1R组及对照级相比明显升高,差异具有显著性CP<0.01),PCOIR组血清町、擎酬的水平及LII1FSH值与HpqA-IR呈显著正相关(植I关系数分别为[<*0.51,阳也?5;・r二0.62,P<0.01:.[=0.46,严〈队05)•2、雄激素受体主要在细胞核表达在PCOSIR组卵巢组织,其表达强度显著高于PCOS非1R组与对照组(均PvO.0日,且与HOMA-IR呈显著正相关(.1〃0・72,PvO.O日,3,Wsternblot检测显示PCC、IR组与匹凶非IR组及对

4、照组相比,IRS-1蛋白表达量明显下降(P<0.05),而RS・2蛋白表达无显著性差异U;阻。SIR组PI-3激酶P85亚单位蛋白质的表达与问S非IR组及对照组相比差异无显著性意义(P〉0.0FI.兔疫纽化显示1RS・1、IR气2均表达于脂肪细胞的胞浆和细胞膜!者蛋白表达量与WesternbloL检测结呆致.3,脂肪组织IR号I及1RS-2蛋白质酶氨酸键酸化分析表阴阳SIR纫二者的酗氨酸磷酸化程度与rcos非IR组及对照组栩比均显著下降(p<0.05)04,RT陀R结果显示PCOSIR组PI—3激酶P85亚单位耐阳的表达与rcos

5、非IR组及对照组柑比差异无显著性意义(P〉队出),而P1-3激酶的活性则显著下降(PvO.O忡,与HOMA・IR呈显著负栩关(队69严〈0.01),>/结论1、IR是影响PCOS患者血清性激素水平和卵巢组织AR表达的重要因素。2、曲COSIR患者中,其发生川的重县委环节是由于族岛素信号转导温路中IRSJ表达的下降、IRSJ及IRS-2蛋白质酷氨酸磷酸化程度降低!从而减弱了腕岛索信号a3、阳由IR患者PI-3激酶P85亚单位的转录及翻译水孚均龙改变放株洲该撤酶的活性降低是由子IRS因素造成的,井边一步影响了膜岛素信号通路中信号分子的

6、生物学作用,导致凹的形成匚以上结论提示R夷岛蒙受体后信号转导恩路中IRS-1、1RS・2及PI-3激酶活性在PCOS1R的发'〃机制中起着关键作用,是PCOS病理牛理改变的重要机制深入研究院岛素受体后信号转导机制,将进步阎明PC克的发病机制并为临床诊断放抬拧开拓了新的思路.本研究的创新性丄、首次研究了AH在pg因患者卵巢组凯中的表达与凹的关系,2首次从细胞却分子水平茅挽研究?麟岛素受体后信号转导途径在问OS发.IR的重要分子机制!提示IRS-j,IRS-21坚PI・3激酶在IR受体后缺陷中可能发挥重要的作用。3、首次研究了PCOS

7、脂耐组织IRS・j及IRS-2的表芈工PI・3擞酶活性的检测,为以后的临床应用研究提供了新的方法•丿t关键回乡囊卵巢综合征,信号转导腕岛索抵抗雄激素受体:兔疫组织化学技术兔疫印边!腕岛素受体底物1,腕岛素受体底物・2,[免鬣會瑞强化学发光法酶氨酸磷酸化,薄层层析确脂酸肌醇3激酶丿,MolecularMechanismofPost-insulin-receptorSignalTransductionMoleculeinPolycysticOvaHJJSyndromewithInsulinResistance.Depn.rtmento

8、fObstetricsli.ndGynecology^XiebeHospi低l,Ton囚iMedic泪ICollegeRH皿油ongUnivei'!iityofScienceli.ndT,肘uulogyYongliChuDoctoralCandid

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