ATP荧光检测系统使用说明书

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1、ATP荧光法微生物（细菌总数）快速检测系统使用说明书第一部分ATP荧光法微生物（细菌总数）快速检测系统简介1、系统原理32、组成部件及相关功能33、应用领域、特点、效益44、检测注意事项及操作步骤45、ATP快检系统使用注意事项及故障排除76、对应关系曲线87、有关食品安全和卫生检测的问答9第二部分ATP荧光法微生物（细菌总数）快速检测系统使用说明1、技术参数及性能122、仪器操作说明132.1开机、初始化132.2参数设置132・2・1选择RLU方式142.2.2选择其它样品名方式142.2.3设置文件类型152.2・4设置日期时间1

2、62.2.5设置检测时间162.2.6U盘格式化162.3测试162.4查询172.4.1查询测试结果172.4.1.1删除测试结果182.4.1.2删除文件182.4.2查询文件信息192.4.3查询仪器信息192.4.4查询电池电量192.4.5快速查询192.5通讯213、上位机软件223.1软件安装223・2驱动程序的安装253・3软件启动273・4软件运行283・5样品及回归方程设定292.6“文件名”说明302.7文件、记录操作和数据库314、电池充电325、保修32第一部分ATP荧光法微生物（细菌总数）快速检测系统简介1、

3、系统原理萤火虫会发光是由于它能合成将化学物质的化学能转变为光能的生物催化剂—萤火虫荧光素酶(简称虫光素酶，luciferase)、虫荧光素(DJuciferin)以及所有细胞生物都产生的生物能量物质一三磷酸腺昔(ATP)o在有氧的条件下，虫光素酶催化虫荧光素和ATPZ间发生氧化反应，形成氧化荧光素并发出荧光，其生化反应式如下：ATP+D-Luciferin+O2—>AMP+Oxyluciferin+PPi+C02+LightLuciferase上式表明，只要具备适当条件，不仅萤火虫，即使在试管中也能发出荧光。当反应系统屮，虫光素酶和虫荧

4、光素处于过量的情况下，荧光的强弱取决于ATP的数量。以检测含细菌的样品为例，细菌细胞越多，ATP量越高，发岀的荧光也就越强。由于虫光素酶对ATP的反应非常灵敏，荧光强弱可通过荧光仪10〜15秒内计量。所以，在排除样品中非细菌ATP干扰的情况下，通过荧光值就能确定样品中细菌ATP的含量，从而确定细胞数量，因此，此系统为半定量快速检测系统。2、组成部件及相关功能2.1试剂组，按检测操作顺序分为：(1)体细胞裂解试剂(TRA),能专一而有效地裂解样品中的非细菌细胞(体细胞)并释出ATP,然后，通过过滤比色杯底部的滤膜将其排除。(2)细菌细胞裂

5、解试剂(XRA),能专一而有效地裂解样品中细菌细胞并释出ATPo(3)荧光反应试剂组(LLR),能与样品中的细菌ATP相互作用并有效地发出荧光。2.2微量荧光检测仪(也称微量光度计)，准确计量检样的荧光值。2.3可供100次测定的样品预处理耗材。(1)放置过滤比色杯的杯架一个。(2)加压器一个，用于加压、排出体细胞ATP和试剂组。(3)带滤膜荧光反应比色杯100个，为荧光反应容器。(4)专用无菌吸水纸，置于过滤比色杯架，吸收加压后流出的液体。(5)带密封圈专用无菌浓缩器，用于浓缩样品。（6）自备微生物学无菌操作所需常规用具、器皿，样品采

6、集无菌、无ATP的容器、塑料袋、手套、银子等。3、应用领域、特点、效益使用ATP荧光法细菌快检仪实施食品、饮料、乳品加工等全程卫生学监测生产程序监测内容加工生产前生产设施清洁、消毒效果检测，原、辅料细菌总数检测，以保障原料质量或明确原料品质级别。加工生产过程中生产设备关键控制点（例如供水、通风阀门）卫生学监测，影响乳品发酵饮料、酒类特殊微牛物总数检测。加工生产后制成品污染细菌总数检测。废弃物排放、环境、人员卫生学及细菌总数检测。4、检测注意事项及操作步骤4.1试剂的准备和注意事项：4.1.1本公司提供的“ATP荧光法细菌总数快检系统”所

7、含试剂组和微量荧光检测仪需匹配使用，不可用其它试剂替代。4.1.2LLR试剂（含萤火虫荧光素酶和D■荧光素）应在冰箱冷冻室・20°C中贮存,有效期6个月。LLR试剂组易变质，室温下不得超过8小时，在0・4°C有效期为3天。4」.3试剂（LLR）在用于检测前按规定低温存放，检测前20分钟取出平衡到室温方可应用。如果超过有效期，应弃用，重新购置。体细胞裂解试剂（TRA）及细菌细胞裂解试剂（XRA）4°C保存。4.1.4检测应按微牛物学常规无菌操作程序进行，并切实注意萤火虫荧光素酶对ATP极其敏感，生物材料容易引起ATP交叉污染的特性，才能取

8、得准确、真实的检测数据。检测样品的预处理：（操作过程中需配戴一次性无菌手套）4.2.1固体样品处理：无菌操作称取25g被检固体样晶溶于225mlPBS溶液（磷酸盐缓冲液，GB/T4789.28-2003中3