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时间:2019-10-12
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1、一.氨基酸的测定1)含硫氨基酸(王阿娜)1.拿一个盒子并盛上冰2.找过氧化氢和甲酸(1:9)混合,配成氧化液(提前1小时)3.去2楼称样,80-90mg4.到三楼前处理室加氧化液2ml(使用移液枪)5.在振荡器上振荡溶解,Z后加盖子6.放入冰水中4摄氏度,16h7.取出冷却,加0.5ml偏重亚硫酸钠溶液(16.8g/50ml水),摇匀。8.力Q8mlHcl(7.5mol/l),划刻度9.HO摄氏度下放24h10.取出冷却,补加Hcl至刻线,混匀11.夹子过滤至lml离心管中(使用滤纸)12.加750ul缓冲液+150ulNaOH(于空离心管中)13.+101ulii滤液样品14.振荡机上振荡混
2、匀15.用注射器过滤到小瓶屮2)15种氨基酸1.称60-80mg的样品2.加10mlHCI(6mol/L)(分两次加入,弄湿)3.充入氮气,盖上(盖子要先加新的里垫)4.110摄氏度下放24h5.用滤纸过滤到lml离心管(此处跟含硫氨基酸一样)6.1R200ul到试管中(平口的,不要坏的),加入400ul超纯水7.加热,抽真空,放进架子中去,气管插上,打开吹风机,真空机打开,悬上方,抽空气打开,3min,吹风机关上,真空机关上,抽空气关上,立即拔气管(提前加液氮)停lOmin,振荡8.过滤。将注射器的针头拿掉,芯拿下来,装上滤膜,将液体加入注射器的空管中,前几滴弃去不要,过滤到小瓶中,加盖(十
3、字口)3)苏氨酸1.称60-80mg样品于小塑料管屮(需要剪)2.加300ul超纯水,润湿3.力[14.0mol/L2(氧化锂1.5ml(两次加),中I'可振荡4.充氮气,加盖子5.120摄氏度下放20h6.冷却,调pH值于4~5之间(诀窍:可先加一管盐酸)7.定容在50ml的容量瓶中,摇匀,用注射器抽8.两层滤膜过滤到小瓶中注意:a.若定容时过刻度了,记录过的量(在公式屮改一下)b.用银子将小塑料管从瓶中取出,倒出,冲洗小塑料管,用玻璃棒将贴在壁上的刮下来二、粗蛋白质的测定1)准备消化管和盖子(洗好)2)称样(按种类)粪样0.2饲料原料0.43)加1粒催化剂和10ml浓硫酸,在420°C消化
4、一个半小时4)冷却。用蒸馅水冲洗盖子,取掉5)打开测氮仪,水洗加热5分钟6)进行测定7)30ml硼酸+1滴甲基红+2滴澳甲酚绿(如混合指示剂加一滴)8)滴定注意:1.测定前检查仪器的蒸饰水、碱、盐酸和硼酸是否够用三、粗纤维和粗灰分的测定1)称样(呕左右),记录袋重,样品重2)封口3)放入机器屮,加上重量阀4)先排废液并倒掉(先45度,后90)5)排废液阀关上6)加7.2ml/L的硫酸至没刀设定:100°C,半个小时8)烧一壶开水9)热水冲洗三遍(先排水再开机器)10)加氢氧化钾(12.9g/L)至没11)设定:100°C,半个小时12)烧一壶水,热水冲洗三遍13)用吸水纸挤干水分,103°C烘
5、6-8小时14)取出,在干燥器中冷却,称量重量(若干燥器吸水,可提前烘干)15)称量圮堺的重量16)将袋子放入垃埸中,电炉上炭化至无烟17)转入到马弗炉中,500°C3-4小时;或55O°C1小时18)干燥器中冷却并称量注意:塩堀上编号要加深及特殊编号!若看不清,可以对着光看一下四、水分的测定1)准备测水分的盒子2)擦拭,并烘半个小时3)干燥器屮冷却,并称重4)加入样品,2g左右5)103°C烘干4小时6)在干燥器中冷却,称重五、NDF和ADF的测定1)屮性洗涤剂配方(1000ml,每个机器需要2L):1.EDTA18.6g,四硼酸钠6.8g,无水磷酸氢二钠4.56g,将这三种先溶于水中,并定
6、容2.加乙二醇乙醯10ml,最后加十二烷基硫酸钠(易起沫)30g2)酸性洗涤剂配方(1000ml,每个机器需要2L):1.在1000ml水屮加入27.78ml硫酸2.称取20g十六烷基三中基漠化镀加上述溶液中溶解1.注:配好后最好过夜,因为不易溶解3)NDF步骤1.将废液桶屮的液体先倒掉2.侧面的闸门关上,加NDF液,没过架子3.加20ml淀粉酶溶液,再加20g无水亚硫酸钠,打开开关4.将上面的盖子拧紧(小片在上方),按下加热并搅拌,2个按钮开始,待温度升到100°C,计时1小时5.关掉加热按钮,打开闸门,先45度,再90度排液体6.用热水冲洗3次(加热水后,搅拌2min)7.将纤维包的水分挤
7、干,用吸水纸吸干水8.103°C烘干6・8小时,在干燥器中冷却,并称重4)ADF方法与NDF方法一样(去掉第3步)六、粗脂肪1)称重,纸满为宜2)在103°C烘2-4小吋3)立即热称4)加乙M70ml/桶,开始测定,双开电源和水开关R#5:l小时;#5:1小时30分钟七、钙和磷的测定磷的测定1)清洗,烘干圮期2)称量1甘烟重,样品重(2g左右)3)先在电炉上烧至无烟,转到马弗炉550度4h(马弗炉
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