第十二单元第43讲微生物的培养与应用

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1、第43讲微生物的培养与应用［考纲点击］1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.利用微生物进行发酵来生产特定的产物课本温故知识融通研析教材丄夯基固本］［学生用书P295］)一、微生物的实验室培养1.培养基(1)概念：人们按照微牛物对营养物质的不同需求,配制出供具牛•长繁殖的营养基质。(2)营养构成：一般都含有水、邂涯、氮源和无机盐。此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有

2、防止杂菌污染的方法。(2)关键：防止外来杂菌的入侵。'〔煮沸消毒法、、，丰］巴氏消毒法消奇］化学药剂消毒法⑶方法vI紫外线消毒法［灼烧灭菌灭菌<干热灭菌<〔高压蒸汽灭菌3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白月东固体培养基计算一称量-溶化一灭菌一倒平板。(2)纯化大肠杆菌①关键的步骤是接种°②纯化培养方法：平板划线法和稀释涂布平板法。③纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌浚，即可获得较纯的菌种。二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1.分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是山于它们能合成鯉，这

3、种物质在把丿永索分解成无机物的过程屮起催化作川。以尿索为唯i氮源的培养基能促进分解丿來索的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而将目的菌分离。2.统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。3.实验流程：土壤取样一制备培养基一微生物的培养与观察-＞细菌的计数。三、分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶（1）组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括G酶、Cx酶和葡萄糖甘酶。（2）作用

4、•纤维索酶（复枷）-j2.菌种筛选⑴方法：刚果红染色法。⑵原理纤维素分解菌刚果红］一红色复合物纤维索甲红色消失、出现透明圈。

5、即：使用以纤维素为唯-碳源的选择培养棊，根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3.筛选流程土壤取样：富含纤维索的环境I选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量梯度稀释涂布平板：将样詁涂布于含CR的鉴别纤维索分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈微观清障1.（2016-北京海淀区期末）培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。（丁）2.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养棊上分离分解尿索的细菌，是否无菌操作影响较小。（V）3.培养基分装到培养皿后进行灭菌。（X）4.从有机废

6、水中分离微生物用于废水处理时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。（X）5.外植体消壽的原则是既杀死材料表面的微住物，乂减少消毒剂对细胞的伤害。（丁）6.（2015-高考四川卷T3D）用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30〜300菌落数的平板。3）7.（2016-山东青乌市期末）筛选能分解床素的细菌所利川的培养基屮，丿求素是唯一的氮源。(v)8.分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低。(X)1.土壤屮纤维索分解菌的筛选流程屮的“选择培养”是必不可少的。(X)2.在富含纤维素的培养基中加

7、入刚果红染色剂，若岀现周围存在透明圈的菌落，则说明筛选到了分解纤维素的微生物。(丿)讲练设计层级突破重难透析丄命题破译］考点一培养基及微生物的纯化培养技术［学生用书P296］i要点讲解.1•培养基的种类(1)按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定⑵按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物対某些物质的特殊需求或抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青

8、霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品产生特定的颜色或其他变化鉴别不同种类的微生物用伊红美蓝培养慕鉴別大肠杆菌2.培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养H的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：细菌为6.5〜7.5,放线菌为7.5〜&5,真菌为5.0〜6.0,培养不同微生物所需pH不同。3.消毒与灭菌条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生煮沸消毒法日常用品巴氏

9、消程法不耐高温的液体物化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽抱和范子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属丁具高床蒸汽灭菌法培养基及容器4•大肠杆菌的纯化(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。(1)纯化微生物的接