陆地棉GhLipase基因的克隆、特征分析及定位

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1、农业生物技术学报JournalofAgriculluralBiotechnology2009J7(1):84-86•研究论文・陆地棉GhLipase基因的克隆、特征分析及定位*贺亚军、郭旺珍，张天真"(南京农业大学作物遗传与种质创新国家巫点实验室，郴花研究所，南京210095)摘奕利用已构建际地棉7235纤维cDNA文库测序，结合5，RACE技术从陆地椀(GossypiumhimutumL)7235纤继中获得了1个I286bp的cDNA。序列分析结果表明，该cDNA包含一个编码368个氨恋酸的开放读码框,5,非翻译

2、区和一个带何Poly(A)的丁非翻译区区域，马已报道的其它植物的脂肪酶用冈具冇较高的氨茶战序列同源件,命名为G/iLipase,提交到GenBank,登录号为EU273298。RT-PCR分析衣叽GhLipase在棉花的胚珠及纤维细胞屮优孙表达。Southernblot分析结果表明,GhLipase任陆地棉基因组可能存在两个拷贝。将该堆因定位在四倍体棉花遗传图讹的A13染色体ho关键词:棉花;脂肪酚基因；克隆;表达分析;基因定位中图分类号:S188文献标识码:A文章编号：1006-1304(2009)01-0084

3、-06MolecularCloning,CharacterizationandMappingofGhLipaseGeneinGossypiumhirsutumHEYa-jun.GUOWang-zhcn,ZHANGTian-zhen**(NationalKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement.CottonResearchInstitute,NanjingAgriculturalUniversity.Nanjing210095,China)AbstractA

4、cDNAlibrarywasconstructedusingfibersofGossypiumhirsutum7235line・Thelibrarywasrandomlysequencedandanexpressedsequencetag(EST)withthefunctionoflipasewasobtained.Thefull-lengthcDNAencodinglipasein7235linewasclonedbytherapidamplificationofcDNAends(RACE)techniquean

5、dnamedGhLipase・Sequenceanalysisshowedthatthefull-lengthcDNAwas1286bpwhichcontainedamajoropenreadingframeof368aminoacids.5’un-translatedregions.3’un-trans-latedregions,andaPoly(A)tail・ThesequencewassubmittedtoGenBank,andaccessionNo.EU273298・Ilhadhighhomologytor

6、e・portedlipasegenesfromotherplants・RT-PCRanalysisconfirmedthattheGhLipasegenewasup-regulatedinovulesandfiberscom・paredwithroots,stems,andleavesof7235・SouthernblotanalysisshowedthatthereweretwocopiesoftheGhLipasegeneinthegenomeofG・hirsutum・GhLipasegenewasmapped

7、onchromosomeAl3in[(TM・1xHai7124)TM-1]population.Keywords:cotton;lipasegene;molecularcloning;expressionanalysis;genemapping♦基金项目:国家噸点基础研究发展规划(973颅目(No.2002CBl】1301)和长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0432)资助。"通讯作者cAuthorfbrcorrespondence.教授.博士•主要从事棉花分子育种研究。Tel:025-84395311;E-

8、mail:.收稿日期:2007-12-18接受日期:2008-114)3脂肪酶(triacylglycerollipase)是广泛存在于动植物和微生物中的一种酶，是一类能催化长链脂肪酸廿油酯水解为甘油和长链脂肪酸的酶类(或者是此反应的逆反应)(JaegerandReetz,1998)。脂肪酶是脂肪代谢最基本的酶，在脂质