丁娟娟定稿论文

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1、©何皿④总辱眈毕业论文（设计）题目：酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶的分离及SDS-PAGE分析姓名：丁娟娟学号：200907020047系别：生命科学系专业：生物工程年级班级：2009级生物工程指导教师：陈良兵2013年6月2日毕业论文（设计）作者声明本人郑重声明：所呈交的毕业论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。本人完全了解有关保障、使用毕业论文的规定，同意学校保留并向有关毕业论文管理机构送交论文的复印件和电子版。同意省级优秀毕业论文评选机构将本毕业论文通过影印、缩印、扫描等方式进

2、行保存、摘编或汇编；同意本论文被编入有关数据库进行检索和查阅。本毕业论文内容不涉及国家机密。论文题目：酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶的分离及SDS-PAGE分析作者单位：生命科学系作者签名：（学号：200907020047）年月日摘要1引言11.材料与方法21.1实验所用的材料和仪器21.1.1实验材料21.1.2实验仪器和药品及试剂21.1.3培养基配制31.2实验方法31.2.1米酒中酵母的富集31.2.2酵母增殖液中酵母的分离纯化41.2.3酵母的扩大培养及生长曲线的测定41.2.4酵母细胞的破碎41.2.5甲基转移酶的初步分离41.2.6甲基转移酶的SDS-PAGE分析51.结果

3、与分析52.1酵母菌分离结果52.2酵母菌显微镜检测结果62.3酵母菌纯化结果62.4酵母菌生长曲线72.5结果分析82.结论8参考文献9致谢11酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶的分离及SDS-PAGE分析摘要：本文以米酒为材料，从中筛选出酿酒酵母，将其作为菌种。通过分光光度法测定酵母的生长曲线。收集对数期酵母细胞并将菌体细胞通过超声波破碎，然后离心分离得到粗酶液，采用凝胶层析的方法对粗酶液进行分离，将分离出的各管粗酶液进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，根据甲基转移酶的分子量范围，通过对甲基转移酶所在管粗酶液电泳从而将甲基转移酶初步分离纯化。关键词：酵母；辅酶Q生物合成甲基转移酶；离心分离；聚丙

4、烯酰胺凝胶电泳ThePrimaryPurificationandSDS-PAGEAnalysisofCoenzyme-QBiosynthesisMethyltransferaseEnzymeinSaccharomycesCerevisiaeAbstract:Inthisstudy,Saccharomycescerevisiaewasscreenedfi*omricewine.Thegrowthcruveofyeastwasdeterminedusingspectrophotometry.Thecellsofyeastwerebrokenbyultrasonic,thenthebroke

5、ncellswerecentrifugaledandobatainedthesupernatant.Thesupernatantwasseparatedthroughthechromatographyandgottheseparatedsimples.Finaly,theseparatedsimpleswereanalysisedusingSDS-PAGE.Theresultsshowedthatthemethyltransferasewasprimarypurified.Keywords:Yeast;Coenzyme-Qbiosynthesismethyltransferase;Ce

6、ntrifugation;SDS-PAGE引言甲基转移酶是生物冇机体内普遍存在的一种重要酶类，它能催化遗传物质DNA的甲基化，在基因表达及动物生长、发育屮起着重要的调控作用；同吋，乂能催化多种牛理过程中间产物的甲基化进而合成或降解牛理活性物质〔7。本研究通过对酿酒酵母的筛选纯化卩句，在低温条件下将酵母细胞破碎捉取粗酶液。通过文献得知该甲基转移酶的分了量，采用葡聚糖G・75柱层析分离出多组粗酶液，并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS・PAGE,SodiumDodecylSulfatePolyacrylamideGelElectropheresis)将甲基转移酶初步分离〔冋。整个晦提取过程均在

7、4°C条件卜•进行，从而保持甲基转移酶的活性，保证实验结杲的科学性及严谨性。木文之所以选取酵母为取材对象，是因为口前酵母作为高等真核生物特别是人类基因组研究的模式牛物，其最直接的作用体现在生物信息学领域。当人们发现了一个功能未知的人类新基因时，可以迅速地到任何一个酵母基因组数据库屮检索与Z同源的功能已知的酵母基因，并获得其功能方面的相关信息，从而加快对该人类基因的功能研究。研究发现，冇许多涉及遗传性疾病的基因均与酵母基因具有很高的同源性，研究这