艾滋病的实验室检查及其临床意义

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1、艾滋病的实验室检查及其临床意义广州市第八人民医院传染病研究所唐漾波HIV感染者/AIDS患者的诊断1．临床体检及病史资料的分析，可提供重要线索，筛选出可疑患者。2．HIV感染的病原学检查，以确定是否感染HIV。这是明确诊断的必备条件。3．对机体免疫功能的检查，尤其是CD4+细胞的测定，是诊断AIDS的必备条件。HIV感染者/AIDS患者的诊断4．对机会性感染的病原学和病理学检查，以确认AIDS的指针性疾病。如有复杂的表现不易解释和治疗，要考虑有机会性感染，通过活检、内窥镜、支气管肺泡灌洗（BAL）、穿刺等

2、手段采取标本作病理检查，借助特殊染色或免疫组化、免疫荧光技术、PCR、原位杂交等技术检测病原体。5．对肿瘤（主要是卡波西肉瘤和淋巴瘤）的病理学检查，对确定AIDS也很有必要。6．影像学检查，对患者的病变部位与范围进行确认与随访。HIV的实验室检查1、HIV感染的诊断（1）检测HIV的抗体成分（首要检测指标）（2）检测HIV的核酸成分HIV血浆病毒载量（HIVRNAload）（3）检测HIV的抗原成分（4）病毒分离培养2、免疫功能的检查（1）细胞免疫功能的检查（2）体液免疫功能的检查3、机会性感染及肿瘤的诊

3、断（1）感染病原体的诊断（2）感染部位病理学诊断HIV-1的结构电镜下，成熟的HIV-1病毒呈现为一高密度筒状核心及一个脂类病毒外壳。病毒表面是由72个刺突组成的20面体，每个刺突由3~4个病毒表面gp多聚体组成：gp120—外膜蛋白，gp41—跨膜蛋白，病毒内膜—p17病毒核心是由病毒RNA（由两条完全同源RNA链组成），病毒核心结构蛋白（p24Gag蛋白）和病毒繁殖所需的酶蛋白（包括逆转录酶蛋白p66，p53及整合酶）组成。HIV-1复制周期与CD4受体结合融合与穿入逆转录与整合转录翻译病毒颗粒的释放

4、HIV主要抗原•gap基因（核心基因）：聚合蛋白p55→主要核心蛋白p17、p24核酸结合蛋白p15•pol基因（逆转录酶基因）：p64、p53、p31•env基因（包膜基因）：gp160（糖蛋白）→gp120（包膜糖蛋白）gp41（跨膜糖蛋白）以上蛋白质均具有抗原性，可刺激机体产生相应抗体，其中p24和gp41抗原最有诊断意义HIV主要抗体感染HIV后一般于1~3个月内产生抗体，由于HIV抗原成分多，抗体种类也较多，出现时间不同。•出现最早：gap蛋白（P24,P25）的抗体•同时或稍后出现：env蛋白

5、（gp41,gp120,gp160）的抗体pol蛋白（p66,p51,p31）的抗体•其中P24抗原和抗体可能随疾病进展而下降gp41抗体较稳定而持久，是HIV主要的检测抗体HIV感染的诊断程序：HIV初筛检测→阴性→发出阴性报告↓阳性HIV初筛检测→阴性→发出阴性报告↓阳性HIV确证检测↓阳性确定HIV感染诊断血清HIV抗体的检测1．HIV初筛检测（1）酶联免疫吸附法（ELISA）方法：间接法、双抗体夹心法、竞争法特点：灵敏性99.5%，特异性99.8%，简便易普及。（2）斑点免疫胶体金快速试验

6、（金标法）特点：快速、简便，但灵敏性、特异性均低于ELISA。结果不能作为诊断依据，仅供参考。血清HIV抗体的检测2．HIV确证实验（1）蛋白印迹（WB）检测法方法：用已知的HIV-Ag（主要是gp160/gp120、p41、p13、p24）检测待测标本中的HIV抗体。HIV-Ag：纯化的病毒蛋白质或基因工程抗原产物或人工合成的某段病毒多肽。特点：特异性高，不需活病毒作抗原，但操作较复杂。（2）其他：免疫荧光检测法（IFA）放射免疫沉淀试验（RIPA）条带免疫试验（LIA）3．HIV抗体检测的主意事项H

7、IV抗体检测的阳性率受个体差异、病程进展、试剂敏感性和检测方法等许多因素的影响。（1）重复检验，或改用更敏感的方法检验。（2）定期复查：由于存在数周至数月的窗口期，需要于1.5月、3月、6月查三次。（3）检测HIV-2抗原或抗体。（4）病情严重病人或免疫严重缺陷者，可能不能检出抗体，需要直接检测HIV抗原、病毒基因或病毒颗粒。一．检测HIV的核酸成分1.RT-PCR技术：高效率、高敏感性、高特异性RT-PCR定量技术：设置内参进行定量测定HIVRNAload2．bDNA技术：利用分支DNA信号扩

8、增实验测定HIVRNAload。特点：特异性强，能排除污染的干扰，敏感性弱低于PCR技术3.分子杂交技术：同位素标记的HIVRNA探针（三）HIV抗原的检测1、检测方法：双抗体夹心ELISA法p24抗原捕获实验优点：简便、迅速，并可定量缺点：敏感性低于病毒培养或PCR2、临床意义（1）窗口期的诊断：感染HIV后约2周可检出HIV抗原（抗原血症），持续约6~8周；感染后1~3月，抗体出现，抗原浓度下降。（2）晚期判断预后：