全优课堂·2016高考生物一轮配套课件：1143生物技术的应用酶的研究和应用

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1、第43课时　生物技术在食品加工及其他方面的应用酶的研究和应用考点134生物技术实践应用——植物组织培养2．植物激素与组织培养(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点：①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。②使用顺序不同，结果不同，具体如下：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高3．影响植物组织培养的因素(1)材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说，容易

2、进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。(2)营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。提醒培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。(3)环境条件：pH、温度、光照等环境条件。如菊花组织培养所需pH为5.8，温度为18～22℃，光照条件为每日用日光灯照射12小时。【对位训练】1．紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。研究人员欲用植物组织培养技术通过

3、培养紫草细胞生产紫草素，下列相关操作不合适的是()A.对作为外植体的紫草叶片进行消毒处理既能保证细胞活性也可减轻污染B.培养基中只加入细胞分裂素以保证已分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织C.调节植物激素的种类和比例以保证愈伤组织D.在培养细胞的过程中要不断通入无菌空气以保证氧气的充足供应【答案】B1．原理、方法和目的考点135生物技术实践应用——DNA的粗提取与鉴定基本原理方法目的DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl溶液为2mol/L时，DNA溶解，而部

4、分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶液稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质DNA可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴鉴定DNA2.实验步骤及注意事项(1)步骤：提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)→溶解(2mol/L的NaCl溶液)→过滤(除杂质)→析出(滴蒸馏水，降NaCl溶液浓度至0.14mol/L)→

5、过滤→再溶解(2mol/L的NaCl溶液)→过滤→进一步提纯(体积分数为95%的冷却酒精)→鉴定。(2)鉴定(3)注意事项①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。②两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。③鉴定DNA时需沸水浴加热。④二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。【对位训练】2．(2014·汕头模拟)下列有关“DNA的粗提取液和鉴定”实验的叙述正确的是()A．去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入酒精反应10～15minB．在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成紫色C

6、．析出DNA时可用玻璃棒轻缓搅拌，可提高DNA的提取量D．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强【答案】D【解析】A错误，去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入嫩肉粉(含蛋白酶)反应10～15min。B错误，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。C错误，析出DNA时用玻璃棒轻缓搅拌，不能提高DNA的提取量，而是保持DNA分子的完整性。D正确，大多数蛋白质难忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。1．原理：DNA复制。2．条件：模板、原料、酶、ATP。3．场所：体外PCR扩增仪。考点136生物技术新手段——PCR扩增技术4．方

7、向：DNA复制的具体过程涉及DNA双链的方向。DNA的两条链是反向平行的，为了明确表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3′端，两磷酸基团的末端称为5′端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。5．过程(1)变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图：6．检测PCR扩增效果(1)将样品进行50倍稀释：取2μLPCR反应液，

8、加入98μL蒸馏水。(2)以蒸馏水作为空白对照，在波长260nm处，将紫外分光光度计的读数调节至零。(3)将步骤①中的DNA稀释液加入到厚度为1cm的比色杯中，测定