高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养素材21!

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养庖丁巧解牛知识•巧学一、培养基1.培养基的概念及其分类：微生物生命活动所需要的营养基质称为培养基。培养基有很多种，根据物理状态可以分为固体、半固体和液体培养基；根据化学组成可以分为天然培养基和合成培养基，根据用途可分为选择培养基和鉴别培养基等。辨析比较培养基的分类种　类特点及用途物理性质液体培养基工业生产半固体培养基保藏菌种，观察微生物运动固体培养基微生物的分离、鉴定化学成分天然培养基营养丰富、来源广，用于工业生产合成培养基成分明确、稳定，用于分离、鉴定用　途选择培养基加入某种化学物质以抑

2、制不需要的微生物的生长，促进所需微生物的生长，用于分离或培养目标细菌鉴别培养基根据微生物的代谢特点，加入某种指示剂化学物质，用于微生物的鉴别2.培养基的成分：各种培养基的成分是不同的，但是所有培养基都包含微生物生长繁殖所需的必需成分，如水、无机盐、碳源和氮源等，有些微生物生命活动过程中还需要一些微量有机物——生长因子。联想发散碳源和氮源的种类和作用功　能举　例碳　源为微生物提供碳素营养、能源物质，形成代谢产物，构成细胞成分无机化合物：CO2、NaHCO3；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮　源为微生物提供氮素营养、合成蛋白质、核

3、酸、含氮代谢产物无机化合物：氮、氨、铵盐、硝酸盐；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等3.培养基的其他条件：除了营养物质外，培养基还要满足微生物生长所需要的温度、酸碱度以及氧气含量等条件。不同微生物所需的这些条件是不同的，例如培养真菌时，pH要调整到5.0～6.0之间，培养细菌时要调整到6.5～7.5之间，培养放线菌时要调整到7.5～8.5之间。二、无菌技术1.无菌技术的内容（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）对培养微生物所用的器皿、接种工具和培养基等器具进行灭菌（3）实验操作的过程要保证无菌。（4）要避免

4、灭过菌的材料再次被污染。2.灭菌方法(1)灼烧灭菌：主要用于接种环（针）或其他金属工具的灭菌。(2)干热灭菌：将待灭菌的物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃的情况下加热1～2小时进行的灭菌。(3)高压蒸气灭菌：将待灭菌的物品放入盛有适量水的高压蒸气灭菌锅内，把锅内水加热至沸腾，将其中的冷空气彻底排除后，将锅密闭后继续加热使锅内温度上升，压力增加，最后温度可以达到100℃以上，常用的灭菌锅灭菌时压力为100kPa，温度为121℃，维持15～30min,即可达到彻底灭菌的结果。（4）紫外线灭菌:这种方法只能适用于表面灭菌和空气灭菌。深

5、化升华灭菌所依据的原理基本都是使菌体内的蛋白质和核酸发生变性，从而达到杀菌的效果.三、制备培养基和纯化大肠杆菌1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：首先要根据培养基的配方要求，计算出各种成分的用量，然后用天平准确地称量，对于牛肉膏和蛋白胨等易吸潮的物质称量时要迅速，称量完成后要及时盖上瓶盖；为了使各种成分混合均匀，需要将它们溶化，溶化后千万不要忘记调整pH；溶化后的培养基分装完成后放入高压蒸气灭菌锅内进行灭菌（平板培养基一般是灭菌后再分装）。深化升华培养基的配置要遵循一定的原则，第一，目的要明确，要根据所培养的微生物的种类、培养的目的选择原

6、料；第二，营养要协调，配制培养基时必须要注意各种营养物质的浓度和比例，否则会产生不良后果；第三，pH要适宜，这是因为各种微生物适宜生长的pH范围不同。2.纯化大肠杆菌时需要注意的问题（1）每次划线之前都要将接种环上的剩余物质烧掉以灭菌，整个操作完成后也要将接种环灭菌。（2）接种环灼烧完成后，要等到其冷却后才能用于接种，以防培养基溶化、划线不整齐或杀死菌种。（3）作第二次划线时，要从上一次划线的末端开始，使微生物随划线次数的增加而减少，并逐步分散，最后可在平板表面得到单个菌落。（4）用涂布法接种时，将涂布器的末端浸在盛有体积分数为70％的

7、酒精的烧杯中，取出时要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。（5）操作过程都要在火焰附近的无菌区进行。（6）整个过程中要注意防火。疑点突破（1）未接种的培养基表面若有菌落生长，说明培养基已被污染，必须更换或者重新灭菌。（2）在接种大肠杆菌的培养基上可以观察到独立的菌落，有光滑型菌落、粗糙型菌落、黏液型菌落等。（3）培养12h和24h菌落的大小不同，后者菌落大，灰色加深，光泽度强。（4）若在培养基中观察到不同形态的菌落，则说明菌液不纯或者操作过程中被杂菌污染。问题•探究问题1配制培养基时，除了营养要齐全外，各

8、种营养物质的比例也要适中，而且还要调整好pH、温度等，试从多个方面探究其原因。思路:虽然微生物个体微小，但是其代谢过程丝毫不比多细胞生物简单，它也要不断地进行吸水、吸收营养物质、代谢、排泄等