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《抗氧化剂抗氧化活性的测定方法_二_王会》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、食品与发酵工业FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES＊抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(二)121王会郭立谢文磊1(河南工业大学化学化工学院,郑州,450052)2(河南省粮油机械工程有限公司,郑州,450003)摘要综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法,并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。关键词抗氧化剂,抗氧化活性,测定方法3.3以抗氧化剂抑制自由基对底物的氧化降解为基全。在ORAC法中,AAPH与抗氧化剂的摩尔
2、比非础的方法常高(超过2000),使得此法专一性强,测量的是抗氧此法与3.1.3.2方法不同之处在于测试体系中化剂直接清除自由基的能力,由于使用荧光技术,此既有底物又有自由基,但底物自身不能生成自由基,法也能测量含有抗氧化剂的稀释的油乳状液。此法它与外源自由基反应,形成有荧光或带颜色的特征物测得的是总的抗氧化活性,而且可自动化、标准化,但质,抗氧化剂的加入使生成的特征产物减少,由此可需要全自动系列化分析仪。该法最初用于测定生物测得抗氧化活性。体系中的抗氧化剂,后来广泛用于天然酚类物质和食3.3.1ORAC法品(如茶叶、
3、蔬菜、水果和草药提取物)的测定。ORAC(oxygenradicalabsorbancecapacity,氧自3.3.2TRAP法[31]由基吸收能力)法是近年来由Cao等人在Glaz-Wayner等人的TRAP(totalradicaltrappingan-er[32]研究的基础上发展起来的,原理如下:天然蛋白[35]tioxidantparameter,总自由基清除抗氧化能力)法质β-藻红蛋白(β-phycoerythrin,β-PE)在540nm光波是过去10年中测量血浆或血清总抗氧化能力最广的激发下可发射565
4、nm的荧光。在有自由基或氧化剂方法。该法中的过氧自由基由AAPH产生,在向血时,β-PE的荧光逐渐减弱;当有抗氧化剂存在时,β-浆中添加完AAPH后,通过测量反应过程中消耗的PE的荧光减弱被抑制。自由基或氧化剂可用AAPH氧检测底物的氧化状况。在诱导期内,氧化被血浆中2+(产生过氧自由基)、H2O2-Cu(主要产生HO·)和的抗氧化剂抑制。结果以血浆的诱导期与标准抗氧2+Cu。使用AAPH时,可测量所有公认的抗氧化剂,化剂Trolox的诱导期的比值表示。而Ghiselli等人如抗坏血酸、α-生育酚、β-胡萝卜素。使用C
5、u2+-H[34][32]2O2报道的TRAP法基本上是Glazer法的复制。时,可测量甘露醇、葡萄糖、尿酸以及过渡金属螯合剂Glazer于1990年发表的TRAP法用AAPH产生过这类物质,不用于测定抗坏血酸、α-生育酚[33]。测定2+氧自由基或用Cu-抗坏血酸产生HO·,氧化底物B-结果以Trolox(标准抗氧化剂)当量表示。或R-PE(藻红蛋白)。Glazer假定在过氧自由基或此法是一种新的、独特的评价各种物质抗氧化活HO·存在时,PE荧光的减弱与时间呈线性关系。由[32,34]性的方法。该法优于其他类似方法的
6、原因有2试样保护PE防止过氧自由基或HO·氧化的诱导期个:(1)使用了曲线下面积(AUC)的方法,将抗氧化与Trolox诱导期的比值定量给出试样的抗氧化能剂对自由基作用的抑制时间和抑制程度结合成一个力。然而,PE荧光淬灭的速度与过氧自由基或HO·单独的量。其他类似的方法是在固定抑制率时使用不是线性关系,而且诱导期一般很难测定[36]。抑制时间或在固定的时间内使用抑制率作为定量分Ghiselli等人的TRAP法[34]和ORAC法使用同析的基础。(2)此法使用不同的自由基生成剂或氧化样的测试体系,不同之处在于动力学曲线以
7、及由动力剂,这点很重要,因为抗氧化活性与分析中使用的自学曲线计算出的抗氧化活性。TRAP法[34]中PE荧由基或氧化剂有关,而且PE和自由基间的反应完光的减弱与时间呈线性关系(以恒定的速率减弱),直[37]第一作者:硕士研究生(谢文磊为通讯作者)。到荥光减弱80%;而ORAC法中荧光强度的减小＊此篇文章续本刊2006,32(3):92～96随时间减慢(不以恒定的速率进行)。造成这个差异收稿日期:2005-12-05最可能的原因是PE的起始浓度不同。TRAP法的982006Vol.32No.4(Total220)综述与专
8、题评论抗氧化活性可用图表法、诱导期计算;在ORAC法β-胡萝卜素漂白法(β-carotenebleachingtest)是中,抗氧化能力用动力学曲线下的面积计算。二者都根据乳状液中的亚油酸能自动氧化,生成的自由基与以Trolox当量的形式来表示。β-胡萝卜素反应,引起β-胡萝卜素的黄色衰减(在4703.3.3DCFH-DA法nm处
