基因工程考试

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1、基因工程考试复习名词解释1.基因工程是指将一种或多种生物体(供体)的基因或基因组提取出来,或者人工合成的基因,按照人们的愿望,进行严密的设计,经过体外加工重组,通过一定的方法,转移到另一种生物体(受体)的细胞内,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术.2.质粒:一类存在于细菌或真核细胞屮,独立于染色体之外能自主复制的裸露的双连环状(少数为线状和RNA)DNA分子,是与细菌或真核细胞共生的遗传成分。3.PCR技术:是一种通过模拟体内DNA的复制方式,在体外两种分别与基因两端不同DNA链互补的特异引物,经聚合酶酶促作用下选择性地将

2、DNA某个特殊区域快速扩增出来的技术4.不对称PCR:用不等量的一对引物(非限制性引物与限制性引物),PCR扩增后产生大量的单链DNAo5.反向PCR:一种简单的扩增已知序列周边未知序列的方法,根据已知片段两端的序列设计引物,可将邻近的DNA片段扩增出来注:一种用于指数式扩增位于一个已知DNA区段的PCR法6.巣式PCR:方法由两轮PCR扩增和利用两套引物对所组成,在第一-轮扩增中,使用一对引物产生扩曾产物,然后用一对内引物对第一轮扩增的产物进行第二轮扩增,用于DNA及RNA病毒的检测。7.基因定点诱变:是指在DNA序列屮的某一特定

3、位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。(体外特异性改变某个碱基的技术)&盒式诱变:是利用一段人工合成的具有突变序列的寡核昔酸片段取代野生型基因中的相应序列获得数量众多的突变体。9•探针:一小段单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列,只有同特异性目标产生很强的相互作用和对其相互作用的产物进行有效检测的分子10.放射自显影:利用放射性同位素所发射出来的带电离子(a或B粒子)作用于感光材料的卤化银品体,从而产生潜影,用显彫液显示这种潜影,成为可见的“像”。11・限制性内切核酸酶:识别并切割

4、特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶12.星号活性:某些条件下,一种特异性识别顺序的限制性内切酶,在酶切同一种DNA片段时会产生新的酶切微位点而得到不同的酶切片段,这种酶活性则称星号活性。13.物理图谱:限制性内切酶切割位点Z间距离和顺序的图谱,是进行DNA分析和基因组织结构研究的基础14.接头:一类由人工合成的一头具有某种限制酶粘性末端,另一头为平末端的特殊的双链寡核苜酸短片段。15•衔接物:是指用化学法合成的一段由10〜12个核苛酸组成具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核葫酸短片段。16.Klenow大片段:DNA聚合

5、酶I在枯草杆菌蛋白酶下生成大片段和小片段,,大片段即为klenow片段,是具有3,—5,核酸外切酶活性及聚合酶活性17.T7DNA聚合酶:与Klenow—样,但比Klenow的3'—5'外切酶活性高1000倍,合成能力最强,可以合成数千个核昔酸(经修饰切除3--5*外切活性,可作为测序酶)1&载体:运载外源基因进入宿主细胞,并在宿主细胞内进行复制和表达的DNA分子19・穿梭载体:具有不同复制起点和选择标记的,可在两种寄主细胞中自主复制或整合到宿主基因组屮的载体20.质粒的迁移:有一些非接合型质粒在接合型质粒的帮助下,从一个细胞转移到

6、另一个细胞的作用称之为质粒的迁移性。21•结合型质粒:自我转移性质粒,除含冇自我复制基因外,还带冇一套控制细菌配对和质粒接合转移的基因22•非接合型质粒:只能在一种寄主细胞内生存的质粒23•质粒的不相容性:在没有选择圧力的情况下,两种亲缘关系密切的不同质粒是不能在同一宿主细胞中稳定共存的,这一现象称为不亲和性或者不相容性。24.插入失活:在一个基因位点中插入外源DNA片段,而使该基因活性丧失的效应25.MCS(多克隆位点):由许多限制酶切位点组成,往往是人工合成的一段供外源基因的插入部位的DNA序列26.体外包装:在离体条件下,用噬

7、菌体或病毒蛋白质包裹噬菌体或病毒的裸核酸组装成有感染性的噬菌体或病毒颗粒的过程27.Conjugation结合:受体DNA通过性须从一个细胞转移到另一个细胞的作用28.Transformation转化:重组质粒DNA分子通过丁•膜蛋白结合进入受体细胞,并在受体细胞中稳定表达的过程。29.Transfection转染:将重组的X噬菌体DNA分子直接导入受体细胞内的过程。30.Transduction转导:通过的入噬菌体颗粒感染宿主细胞,将外源DNA分子导入受体细胞内并稳定遗传的过程31.COS细胞:是來源于非洲绿猴肾的细胞系。主要用来

8、做基因的瞬时表达,因为它在转染后的瞬时表达量较别的细胞系(如CHO,HEK等)要高得多32.柯斯质粒载体cosmid:人工构建的含有X噬菌体的粘性末端和质粒复制子的特殊类型的质粒载体.33.cossite(cos位点):入DNA分子两

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