基因工程考试试题

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1、基因工程一名词解释1、限制与修饰系统：限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染，可讲解外来DNA，从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说，与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶，或者说是甲基化酶，能保护自身的DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。2、各种限制与修饰系统的比较Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型识别位点4~6bp，大多为回文序列二分非对称5~7bp非对称切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性，至少在识别位点外100bp识别位点下游24~26bp3、回文序列palindrome：这样的序列呈现为旋转对称，反向重复。4、切口酶Nickin

2、genzyme：有些限制酶只切割双链DNA中的一条链，产生单链缺口，这种酶称为切口酶。5、同裂酶Isoschizomer：识别相同序列的限制酶称同裂酶，但它们的切割位点可能不同。6、同尾酶Isocaudarmer：许多不同的限制酶切割DNA产生的末端是相同的，且是对称的，即它们可能产生相同的粘性突出末端。其切割得到的产物可进行互补。7、位点偏爱Sitepreferences:某些限制酶对同一介质中的不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称为位点偏爱。8、星星活性Staractivity:在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性

3、称星星活性。实际上星星活性是限制内切酶的一般性质，任何一种限制酶在极端非标准条件下都能切割非典型位点。9、Klenow片段Klenowfragment：KlenowDNA聚合酶是E.coliDNApolymerase经蛋白酶（枯草杆菌蛋白酶）裂解而从全酶中除去5'--3'外切活性的多肽大片段，而聚合活性和3'--5'外切活性不受影响。10、反转录酶Reversetranscriptase：即依赖于RNA的DNA聚合酶，它有5'--3'合成DNA活性，但是无3'--5'外切活性。它来自AMV（禽成髓细胞瘤病毒）或Mo-MLV（Moloney鼠白血病病毒，又称M-MuLV

4、）。11、末端转移酶Terminaltransferase：来源于小牛胸腺，是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的DNA聚合酶，在二价阳离子存在下，末端转移酶催化dNTP加于DNA分子的3'羟基端。若dNTP为T或C，此二价阳离子首选钴离子；若dNTP为A或G，此二价阳离子首选镁离子。12、连接酶Ligase：催化DNA5'磷酸基与3'羟基之间形成磷酸二酯键，将两段核酸连接起来的酶。13、T4多核苷酸激酶T4polynucleotidekinase、：催化ATP的γ-磷酸基转移至DNA或RNA的5'末端。14、碱性磷酸酶Alkalinephosph

5、atase：主要来源于牛小肠（Calfintestinalalkalinephosphatase），简称CIP或CIAP，也有来自细菌（BAP）。催化除去DNA或RNA5'磷酸的反应。15、核糖核酸酶AribonucleaseA或RnaseA：来源于牛胰，为内切核酸酶，可特异攻击RNA上的嘧啶残疾的3’端。可出去DNA:RNA中未杂交的RNA区，可用来确定DNA或RNA上单碱基突变的位置。广泛用来除去DNA样品中的RNA.16、脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DNaseⅠ）：来源于牛胰，是内切核酸酶，可优先从嘧啶核苷酸的位置水解双链或单链DNA。可用于出去RNA中的DNA。17、核

6、糖核酸酶HribonucleaseH：是内切核酸酶，特异性水解与DNA杂交的RNA上的磷酸二脂键，产生带有3’羟基和5’磷酸基末端的产物，不降解单链核酸。dsDNA或dsRNA。该酶主要用于在cDNA克隆合成第二链之前去除。18、Ct值的含义C代表Cycle，t代表threshold，是：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。19、质粒：是染色体外的遗传因子，能进行自我复制（但依赖宿主细胞编码的酶和蛋白质）；大多数为超螺旋的双链共价闭合环状DNA分子（covalentlyclosedcircle,cccDNA）,少数为线性，大小一般为1—200kb。2

7、0、质粒拷贝数：按照质粒控制拷贝数的程度，可将质粒的复制方式分为严谨型与松弛型。严谨型质粒在细胞中的拷贝数有限，大约1—几个；松弛型质粒拷贝数较多，可达几百。21、pMB1质粒的复制并不需要质粒编码的功能蛋白，而完全依靠宿主提供的半衰期较长的酶来进行。22、质粒的不相容性Plasmidincompatibility：两个质粒在同一宿主中不能共存的现象。它是指在第二个质粒导入后，在不涉及DNA限制系统是出现的现象。不相容的质粒一般都利用同一复制系统，从而导致不能共存于同一宿主。23、标记基因：按其用途可分为选择标记基因和筛选标记基因，选择标记基因用于鉴