脓汁和粪便标本中病原菌的检测-1

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1、张三李四020-62-7891230757-299-85246南方医科大学公卫学院微生物学系医学微生物学实验MedicalMicrobiologyPracticum微生物学实验室规则LabSafetyRegulation进入实验室必须穿白大衣，戴帽子。书本、文具放在抽屉里。实验室内不准吃东西、喝饮料，不准把任何东西放入嘴中，也不要用手抚摸头脸等部位。凡是废弃的细菌培养物、带菌材料，应放在指定地点等待灭菌处理，不得随便乱放或用水冲洗。一旦发生意外，造成污染，应立即报告老师进行处理。离开实验室前,必须洗手。怀疑污染应及时用1‰新洁而灭泡

2、手。每次实验后，实验台用消毒液擦拭，地板先用湿的拖布拖地以后再扫地，实验室用紫外线灯照射1小时。实验分组（45人）俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲乙丙丁。甲乙4丙丁甲乙3丙丁甲乙2丙丁甲乙1丙丁甲乙5丙丁甲乙8丙丁甲乙7丙丁甲乙6丙丁甲乙10丙丁甲乙9丙丁讲台左右11甲乙丙丁戊实验分组（40人）俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。甲乙4丙丁甲乙3丙丁甲乙2丙丁甲乙1丙丁甲乙5丙丁甲乙8丙丁甲乙7丙丁甲乙6丙丁甲乙1

3、0丙丁甲乙9丙丁讲台左右实验分组（36人）俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。甲乙4丙丁甲乙3丙丁甲乙2丙丁甲乙1丙丁5甲乙8丙丁甲乙7丙丁甲乙6丙丁甲乙10丙丁甲乙9丙丁讲台左右实验室器材介绍常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。试管架上器材：靠近插座一侧第1列放置接种针,第2列放置接种环，另一侧中间两行放置油性笔和打火机。※器材使用后，必须放回原处，依次摆整齐。普通冰箱(3颗星***)冷藏室(上柜）：温度4～8℃，保存细菌培养物，培养基，常用菌种和抗菌

4、素纸片等。冷冻室（下柜）：温度－18℃，保存诊断血清、血浆，长期保藏的抗菌素纸片。卫生工具：扫帚,拖布,撮箕,垃圾筐,放在冰箱和水池之间。隔水式电热恒温培养箱：35～37℃，一般细菌培养时间为18～24小时。奥林巴斯CX21型生物显微镜（实验柜内，每人一台）注意：只能横放，不得竖放。革兰染色瓶染色架石蜡油拭镜纸吸水纸乙醇乙醚微生物学器材柜-1（西侧边台中段）电炉→右侧柜内微生物学器材柜-2（东侧边台中段）酒精棉球碘酒棉球镊子电炉、石棉网手套1500W电炉▲安全警告1.电源插塞与电炉插孔接触良好→插头插入插座。2.如果培养基暴沸溢出，流

5、入电炉；必须立即切断电源、拔除插头；以免触电，危及生命！东西两侧边台各一个电炉，每个电炉可同时放置4个300ml锥形瓶进行加热。蒸馏水：配制培养基。1‰新洁而灭：怀疑病原菌污染，泡手3～5分钟。消毒液：擦拭实验台台面。玻片缸：浸泡用过的载玻片。医学微生物学实验综合性实验一ComprehensiveExperiment1脓汁和粪便标本中病原菌的检测（P2）Isolationanddetectionofpathogenicbacteriainpusandstoolspecimens培养基的制备P2消毒与灭菌P5细菌的人工培养无菌技术（录

6、像）摆斜面，倾注平板。脓汁、痰、咽部分泌物观察菌落特征、溶血性、色素肉汤增菌培养挑取可疑菌落涂片染色镜检血平板培养直接涂片、革兰染色、镜检血液、穿刺液纯培养培养液涂片染色境检染色镜检生化反应血清学鉴定双糖铁培养基增菌培养血、骨髓挑取可疑菌落SS琼脂、伊红美蓝平板分离培养粪便常见肠道致病菌的检查程序P48：常见病原性球菌的检查程序P47：生化反应动物实验药敏实验脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验流程(6次课12学时）①培养基的制备②细菌的分离培养③细菌的纯培养④细菌的形态学检查⑤细菌的生化试验等⑥细菌的血清学试验、结果分析→实验论文撰写培

7、养基的制备PreparationofCultureMedia组号培养基称量水量煮沸分装备注（45人份）1，11营养琼脂11.4g300ml--4瓶，500ml瓶，平板2～4营养琼脂3.0g80ml3次5ml16支×3，中试管，斜面5～7营养肉汤1.1g50ml1次3ml16支×3，小试管，肉汤8～10半固体琼脂1.9g65ml3次4ml16支×3，小试管，高层※公共培基，勿作标记！培养基的制备PreparationofCultureMedia组号培养基称量水量煮沸分装备注（40人份）1营养琼脂11.4g300ml--4瓶，500ml瓶

8、，平板2～4营养琼脂2.9g75ml3次5ml15支×3，中试管，斜面5～7营养肉汤1.1g50ml1次3ml15支×3，小试管，肉汤8～10半固体琼脂1.7g60ml3次4ml15支×3，小试管，高层※公共培基，勿作标