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时间:2019-10-07
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1、MDR:世界卫生组织指南2011IngeMuylle定义单耐药对一种一线抗结核药物耐药多耐药对一种以上一线抗结核药物(但不同时包括异烟肼和利福平)耐药耐多药MDR至少对异烟肼和利福平耐药广泛耐药XDR耐多药同时对任何喹诺酮类和阿米卡星、卡那霉素或者卷曲霉素中的一种耐药。定义也叫“MDR+”:耐多药同时耐任何一种喹诺酮类药物,或者二线注射用药TDR:完全耐药对当地所有可以获得的二线和三线抗结核药均耐药2011世卫指南建议1利用现有资源,推荐开展异烟肼和利福平或者利福平快速药敏试验,以替代传统试验或者在诊断结核时不进行药物敏试验的模式。线性探针试验:Hain-tes
2、t,Inno-Lipa实时自动PCR:GenXpert线性探针试验线性探针试验(INNO-Lipa利福平结核试验)培养菌株利福平耐药的特异度和敏感度高,直接使用临床标本进行操作不是太好线性探针试验基因型结核分枝杆菌耐药加强试验(Hain生命科学)即使是直接使用临床标本进行检测,利福平耐药的特异度和敏感度很好线性探针基因型结核分枝杆菌耐药二线药试验(Hain生命科学)GenXpertBoehme,NEJM,20101.使用2:1的标本试剂对痰菌液化并灭活2.将2ml的处理后的标本导入检测盒3.将检测盒插入MTB-RIF检测平台(完成手工操作)4.标本自动过滤和清洗
3、5.超声溶解过滤捕获的微生物来释放DNA6.DNA分子与干PCR试剂混合7.在一体式反应试管中进行半巢式实时扩增和检测8.可打印的检测结果检测结果105分钟后获得GeneXpert–敏感结核Migliori,ERS-onlinecourse,2011患者发现的比例天液体培养固体培养涂片GenXpertBoehme,Lancet2011灵敏度特异度(非结核)PPVNPV所有培养阳性涂阳培阳涂阴培阳合计表4:快速MTB/RIF检测的灵敏度,特异度和预测值GenXpertMarlowe,JClinMicrobiology2011痰涂片&培养结果XpertMTB/RI
4、F结果灵敏度Xpert+Xpert–合计M+(高&中等)C+33033100%97,7%M+(低)C+5225496,3%M–C+31124372,1%所有C+1161413089,2%涂片结果(n=216)检测结果的数量MTB培养+GeneXpert+MTB培养+GeneXpert-MTB培养-GeneXpert+MTB培养-GeneXpert-合计阳性大量(4+)21011335中等(3+)1200214少量(1+/2+)52232077阴性(未见抗酸杆菌)311204790合计11614482216表1涂片结果与GeneXpertMTB/RIF阳性,MTB
5、培养阳性结果比较*涂片结果的标本来源于痰和支气管标本。其中一个支气管标本不包括在表中,这个标本的结果是GeneXpertMTB/RIF试验抑制,涂片阴性,培养阴性,PCR抑制以及MTB阴性。表1涂片结果与GeneXpertMTB/RIF阳性,MTB培养阳性结果比较*涂片结果的标本来源于痰和支气管标本。其中一个支气管标本不包括在表中,这个标本的结果是GeneXpertMTB/RIF试验抑制,涂片阴性,培养阴性,PCR抑制以及MTB阴性。GenXpertMigliori,ERS-onlinecourse,2011痰涂片-痰涂片+培养阳性培养阴性培养阳性联合Xpert
6、MTB/RIF检测出MTB7030275PPV99.1%未检测出MTB71710NPV96.1%灵敏度特异度98.0%98.3%涂阳培阳的灵敏度为100%,涂阴培阳的灵敏度为91%DST利福平耐药DST敏感联合XpertMTB/RIF利福平耐药584PPV93.6%利福平不耐药2280NPV99.3%灵敏度特异度96.7%98.6%利福平耐药检测准确率高。有差异结果的测序数据显示Xpert是正确的。GenXpert在低发病率环境的作用?疾病合计存在不存在检测结果阳性9799196PPV=97/196=49%阴性398019804合计100990010.000频率
7、=100/10.000=1%灵敏度=97/100=97%特异度=9801/9900=99%疾病合计存在不存在检测结果阳性1940802020PPV=1940/2020=96%阴性6079207980合计2000800010.000频率=2000/10.000=20%灵敏度=1940/2000=97%特异度=7920/8000=99%GeneXpert–检测结核的时间Migliori,ERS-onlinecourse,2011均数:中位数均数:中位数均数:中位数均数:中位数涂片(503)液体培养(946)固体培养(539)GeneXpert–检测利福平耐药的时间M
8、igliori,ERS-
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