组织病理学制片技术ppt课件

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1、Notice1.上课请关手机(或调成振动,接电话到室外)。2.选修课自愿选择,试听一次,下次课班长提交选修课学生名单(包括email)。3.学分问题⑴平时表现如:纪律、问答、作业。⑵结课测验?⑶对本课程的意见和建议;组织病理学制片技术Histopathologictechnology生命科学研究中心邢立强emxlq@163.com2目的和要求AimsandRequirements了解生物组织的特点及取材的注意事项;熟悉切片的原理、一般要求及注意事项;掌握石蜡切片制作技术;病理学常用的观察手段Thecommonsurveymeansinpathology1、大体标

2、本观察:主要用肉眼、量尺及各种衡器等辅助工具,对所检标本的大小、形状、色泽、重量、表面及切面、病灶特点进行观察及测量。2、组织切片的观察:取正常或病变组织进行切片、染色(HE染色最常用)在显微镜下进行观察。病理学标本的种类Typesofpathologicsamples1、活体组织检查(Biopsy):简称活检,从患者活体局部切取、钳咬、细针吸取和摘取等手术方法获取病变组织进行病理检查。2、脱落细胞学检查(Exfoliativecytologicalexam):对患者痰液、胸腹水、尿液以及阴道刮片、食管拉网、纤维胃/支气管镜所取得的材料进行涂片,以检查脱落细胞,

3、是早期发现和诊断肿瘤的好方法。3、尸体解剖(Autopsy):通过尸检可查出病因和病变,及时发现和确诊某些传染病、新发现的疾病,积累经验,提高诊疗水平。4、动物实验(Animalexperiment):根据研究需要,在动物身上复制人类某些疾病的模型、进行观察研究,了解疾病的病因、发病机制及药物疗效等。5、组织/细胞培养(TissueandCellculture):将某种组织或单细胞在适宜的培养基中体外培养,来研究各种病因作用下组织、细胞的病理变化及治疗效果。病理技术的应用Applicationofpathologictechnique帮助临床查明死因(尸检);手

4、术后病变标本,明确诊断(临床活检);为教学、科研提供资料;取材(Samplecollection)→固定(Fixation)→脱水(Dehydration)→透明(Transparentizing)→浸蜡(Paraffinsoaking)→包埋(Embedding)第一节组织处理Tissueprocessing1.人为因素2.标本大小3.取材时间4.包埋方向5.边缘标记一、取材(Samplescollection)6.小标本的处理方法7.特殊情况取材8.取材数量9.清除多余成分10.重复取材11.核对取材12.剩余组织存放二、固定(Fixation)固定就是用物

5、理或化学方法,阻止组织细胞离体或培养细胞脱离生存环境后发生形态学变化。(一)固定的目的1.迅速阻断组织细胞离体后的自溶性变化,防止腐败,尽量保持组织细胞生活状态下的形态结构。2.使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变成不溶性物质,并保持原有的空间位置。3.固定剂有硬化作用,增加组织的硬度,便于制片。4.组织中的各种物质经固定后产生对染料的亲和力,利于染色和观察。(二)常用的固定方法1.浸泡固定法2.灌注固定法3.细胞涂片的固定方法4.微波固定法5.蒸气固定法(三)常用的固定液1.单纯固定液(1)甲醛(formaldehyde)(2)酒精(alcohol)(3)

6、苦味酸(picricacid)(4)丙酮(acetone)(5)醋酸(aceticacid)2.混合固定液(1)Bouin液:用于结缔组织及脂肪染色;(2)Zenker液:常用于三色染色;(3)4%多聚甲醛-磷酸二氢钠-氢氧化钠液;(四)固定后的处理1.一般固定液(甲醛等)固定组织后,用流水冲洗以清除组织内的固定液终止固定。2.含有乙醇、乙酸及苦味酸的固定液,组织固定后不需要或不能用水冲洗。3.含有铬酸、重铬酸钾和锇酸的固定液,组织固定后应充分水洗,一般为12~24h。4.用含汞的固定液固定组织后,要进行脱汞处理,可在组织脱水前或切片染色前进行,一般多在染色前脱

7、汞。其方法为切片脱蜡入水后,入0.5%碘乙醇5~10min,水洗后再入3%~5%硫代硫酸钠或95%乙醇1~2min,再充分水洗,蒸馏水洗后进行染色。(五)固定时的注意事项1.标本应新鲜并及时取材,快速放入固定液中。特殊标本应单独固定和存放。2.固定液的用量一般固定液用量为组织块体积的10~20倍,贵重的固定液不少于3~5倍。避免组织紧贴容器底部,影响固定效果。对于特殊染色的组织(如神经染色及酶组织化学染色等)固定时应考虑组织块的大小、固定液种类、固定时间和温度等。酶组织化学染色组织的固定应置于冰箱4℃固定。3.防止组织变形柔软或较薄的组织先平铺在吸水纸上,再投入

8、固定剂中;含气或脂肪多的

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