人教版高中生物选修1专题5DNA和蛋白质技术复习教案

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1、选修1专题5DNA和蛋白质技术复习（教案）复习要点1.DNA的粗提取与鉴定2.PCR技术3.血红蛋白的提取和分离复习过程一、DNA的粗提取与鉴定【知识点讲解】1.实验原理（l）DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同溶解规律2mol/LNaCl溶液0.14n)ol/LNaCl溶液DNACDNA溶解度.NaCl)0.14mol/L浓度溶解析出蛋白质WC1溶液物质的量浓度从2mol/L逐渐降低的过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利

2、用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。（3）DNA与二苯胺沸水浴加热，呈蓝色。2.操作流程（1）材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织（2）破碎细胞（以鸡血为例）：鸡血细胞一加蒸憎水一用玻璃棒搅拌一用纱布过滤一收集滤液（3）去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液屮溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质（4）DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液（5）DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液屮加入二苯胺试剂，混合均匀后将试管置于沸水屮加热5mi

3、n,溶液变成蓝色【例题讲解】如图为菜花DNA的粗提取与鉴沱的实验流程图。据图冋答下列问题：（1）选择菜花作为捉取DNA的实验材料的原因是c（2）研磨前，向研钵屮加入石英砂的目的是—，加入的物质a是。（3）研磨液过滤后，应向滤液中加入2mol/L的*iCl溶液，目的是；也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是o（4）鉴定DNA所用的化学试剂为,鉴定实验中，A、B两支试管属于对照组的是，对照组试管中加入的物质有o【答案】（1）菜花中的DNA含量相对较高（2）使研磨充分洗涤剂和食盐（3）溶解DNA,析出不溶的杂质分解蛋

4、白质（4）二苯胺ANaCL溶液和二苯胺试剂【解析】（1）原则上含DNA的生物材料都可以作为提取DNA的实验材料，只是选用DNA含量相对较高的生物组织，实验成功的可能性更大。菜花中DN八含量相对较高，可以作为提取DNA的材料。（2）向研钵中加入石英砂是为了使研磨更充分。在本实验中同时向研钵中加入一定量的洗涤剂和食盐，洗涤剂可以瓦解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。（3）在含有DNA的滤液中，加入2mol/L的NaCL溶液，可以使DVA溶解、析出不溶的杂质；嫩肉粉中含有

5、木瓜蛋白酶，能分解滤液屮的蛋白质。（4）鉴定DNA的原理是在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色，因此鉴定DNA所用的化学试剂为二苯胺。B试管中呈现蓝色，说明含有DM,所以属于对照组的是A试管；对照组试管中加入的物质有NaCl溶液和二苯胺试剂，0的是排除NaCl溶液对二苯胺显色的影响。【变式训练】“DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是（）A.取制备好的鸡血细胞液5〜10mL注入烧杯中,迅速加入物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液20mL,同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5min,可使血细

6、胞破裂，释放岀DNAB.整个DNA提取过程中，两次加蒸馆水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，析出DNA分子C.整个DNA提収操作中，两次加入2mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中A.DMA鉴定操作屮，只要向溶有DNA的MCI溶液屮加入4mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色【答案】C【解析】取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中，迅速加入蒸锢水并用玻璃棒沿同一方向搅拌，使血细胞破裂,将DNA释放出来；整个DNA提取过程屮，使用两次蒸饰水，第一次是使血

7、细胞吸水涨破，释放DNA,第二次是用来稀释NaCl溶液，使DNA析出；在DNA鉴定操作小，DNA遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成。【方法点拨】①本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。②实验屮两次使用蒸锢水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。二、PCR技术【知识点讲解】1.原理DNA热变性原理,即：双链加热，双螺能结构解体单链DNA缓慢冷却.分离的DNA链又垂新结合DNA2.条

8、件在一定的缓冲溶液中提供DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核昔酸，耐热的DNA聚合酶，同时控制温度使DNA复制在体外反复进行。3.过程（1）变性：当温度上升到90°C以上吋，双链DNA解旋为单链。（2）复性：温度下降到55C左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。⑶延伸：温度上升到72°C左右时，溶液中的四种脱氧核甘酸（A、T、C、G）在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA